賈艷艷　張永良

【中圖分類號(hào)】R687 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】2095-6851（2017）03-0-01

目前，丙型肝炎病毒（HCV）感染已呈世界性分布，嚴(yán)重影響了人類的健康，是人類慢性肝炎、肝硬化、肝癌發(fā)生的重要病因[1]。我國丙型肝炎約占輸血后肝炎的60%～80%，丙型肝炎的感染率僅次于乙型肝炎。丙型肝炎自然轉(zhuǎn)陰率低，治療效果差，病程遷延，且與肝硬化、肝癌顯著相關(guān)[2]。因此，早期的檢測及診斷治療對(duì)預(yù)防和控制丙型肝炎的傳播尤為重要。目前，丙肝的實(shí)驗(yàn)室診斷主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（ELASA法）、膠體金免疫層析法（金標(biāo)法）和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法（RT-PCR法），其中，前兩者用于檢測丙肝病毒抗體，后者用于檢測丙肝病毒RNA。本文旨在分析這三種檢測方法在臨床應(yīng)用中對(duì)丙型肝炎的診斷價(jià)值。

1.資料和方法

1.1 研究對(duì)象：對(duì)2015年5月1日至2016年12月11日來我院就診的38017名住院及門診患者血清采用ELASA法或金標(biāo)法進(jìn)行丙肝抗體篩查試驗(yàn)，陽性373例，其中，男212例，女161例，平均年齡43.9歲。之后對(duì)陽性標(biāo)本分別用三種方法進(jìn)行復(fù)查。

1.2 試劑方法：①酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（ELASA法）：采用北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)的丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒；②膠體金免疫層析法（金標(biāo)法）：采用英科新創(chuàng)科技有限公司生產(chǎn)的丙型肝炎病毒抗體檢測試劑盒；③逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法（RT-PCR法）：采用中山達(dá)安基因有限公司生產(chǎn)的丙型肝炎病毒RNA診斷試劑盒，所用基因擴(kuò)增儀為ABI7500。各項(xiàng)操作嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。

2.結(jié)果

利用ELASA法或金標(biāo)法進(jìn)行丙肝抗體初篩試驗(yàn)，共復(fù)查373例樣本，其中，142例ELASA法、金標(biāo)法和RT-PCR法三者均陽性，即該類人群處于丙肝病毒復(fù)制期，傳染性強(qiáng)；100例ELASA法和金標(biāo)法陽性但RT-PCR法陰性，此系各種原因?qū)е碌谋尾《綬NA缺失所致（詳見討論）；131例金標(biāo)法陽性但ELASA法和RT-PCR法陰性，此類標(biāo)本系金標(biāo)檢測法敏感性高而特異性偏低所致，即所謂假陽性結(jié)果。

3.討論

丙型肝炎病毒感染是一種持續(xù)性的終生感染，主要通過輸血傳播，目前尚無有效疫苗進(jìn)行預(yù)防。診斷丙型肝炎主要從兩個(gè)方面去考量：首先要檢測抗HCV抗體和丙肝病毒核糖核酸等丙肝相關(guān)標(biāo)志物是否為陽性，還要做超聲檢測及肝臟功能生化檢測等檢查，完成上述兩個(gè)方面即可診斷丙肝[3-5]。實(shí)驗(yàn)室及時(shí)準(zhǔn)確的檢測結(jié)果對(duì)丙肝的臨床診療尤為重要。

目前，丙肝抗體檢測已成為一個(gè)非常有效而普遍的實(shí)驗(yàn)室檢測方法，尤其ELISA法檢測丙肝抗體診斷試劑盒發(fā)展己較為成熟，大大縮短了血清學(xué)窗

口期，檢測成本低廉，具有較高的靈敏度，臨床應(yīng)用廣泛，已成為臨床上首選的丙肝抗體篩查試驗(yàn)方法。但是由于丙肝感染者血中的丙肝病毒濃度低，抗體反應(yīng)弱而晚，血清抗HCV抗體在感染后平均18周才陽轉(zhuǎn)，故急性肝炎患者抗HCV抗體陰性并不能完全排除丙肝病毒感染，而慢性肝炎患者抗HCV抗體可持續(xù)多年。用常規(guī)試劑盒檢出的抗HCV抗體并非保護(hù)性抗體，它的檢出只說明血液有傳染性。抗病毒治療后，抗HCV抗體一般不會(huì)在短期內(nèi)轉(zhuǎn)陰。

金標(biāo)法檢測丙肝抗體操作方法較簡單、快速，適合單個(gè)檢測，但試劑成本較高，可用于急診檢測或快速篩查，也可用作為ELISA法陽性標(biāo)本的校核試驗(yàn)以排除試驗(yàn)中人為因素造成的假陽性，該法敏感性高而特異性低，容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果，如本文所指，131例假陽性標(biāo)本出現(xiàn)，因此金標(biāo)法可疑陽性的結(jié)果必須要用ELISA法進(jìn)行復(fù)查。

HCVRNA檢測對(duì)實(shí)驗(yàn)室條件的要求較高，一般可在病毒感染后數(shù)日便可檢出，特異性很高，但是并不可以完全替代ELISA法，有報(bào)道顯示僅有55%的抗HCV抗體陽性者能夠檢出HCVRNA[6]。其可能的原因有：①HCV有可能發(fā)生自發(fā)性丟失；②HCV基因多樣性或HCV基因突變性等降低了RT-PCR方法的敏感性；③因操作復(fù)雜、儀器昂貴，對(duì)實(shí)驗(yàn)條件和技術(shù)人員素質(zhì)要求較高，由于操作不當(dāng)造成污染或RNA酶的降解都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；④在血清抗體陽轉(zhuǎn)以后，血清中的病毒載量可能降至極低水平，使HCVRNA的結(jié)果呈陰性[7]。本資料顯示，242例ELASA法和金標(biāo)法陽性樣本中HCVRNA陽性標(biāo)本只有142例，占58.7%，不排除有上述各原因存在。血清中HCVRNA的檢出，表明血液中存在丙肝病毒，是具備傳染性的直接證據(jù)。RT-PCR法常用于評(píng)價(jià)抗病毒藥物的療效及研究HCVRNA復(fù)制水平與肝臟病變的關(guān)系，HCVRNA含量可作為監(jiān)測肝內(nèi)HCVRNA復(fù)制程度的一個(gè)指標(biāo)?？共《局委熀笕鏗CVRNA轉(zhuǎn)陰，則是治療有效的根據(jù)。

綜上所述，丙型肝炎常用的三種檢測方法各有利弊，聯(lián)合檢測有利于提高丙肝的陽性檢出率，并且能夠降低ELASA法和金標(biāo)法的假陽性率。對(duì)于急診的病人或者需要快速篩查的病人可先用金標(biāo)法進(jìn)行抗體篩查，陽性者用ELASA法進(jìn)行確認(rèn)，之后再用RT-PCR法進(jìn)行HCVRNA定量檢測。對(duì)臨床住院及門診病人應(yīng)首選ELASA法對(duì)丙肝抗體進(jìn)行初篩，并對(duì)陽性標(biāo)本應(yīng)用膠體金法進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，兩種方法均陽性則用RT-PCR法進(jìn)行HCVRNA定量檢測加以確認(rèn)。對(duì)于確認(rèn)患丙型肝炎的病人應(yīng)定時(shí)檢測HCVRNA進(jìn)行抗病毒療效監(jiān)測，以協(xié)助臨床對(duì)丙肝病毒感染者的早發(fā)現(xiàn)、早治療。

參考文獻(xiàn)

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