韓竹俊，張學娟，程 錦（1.東臺市人民醫(yī)院藥學科，江蘇東臺 400；.東臺市人民醫(yī)院手術(shù)室，江蘇東臺 400；3.鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學院藥學院，江蘇鹽城 4000）

賴氨酸布洛芬緩釋液體栓的制備及體內(nèi)外評價

韓竹俊1＊，張學娟2，程 錦3#（1.東臺市人民醫(yī)院藥學科，江蘇東臺 224200；2.東臺市人民醫(yī)院手術(shù)室，江蘇東臺 224200；3.鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學院藥學院，江蘇鹽城 224000）

目的：制備賴氨酸布洛芬緩釋液體栓劑，并進行體內(nèi)外評價。方法：以泊洛沙姆溶液為主要基質(zhì)、卡波姆為生物黏附劑、月桂氮酮為滲透劑，制備賴氨酸布洛芬緩釋液體栓劑。以膠凝溫度、凝膠強度、生物黏附力及體外釋放度為指標篩選泊洛沙姆407（P407）-泊洛沙姆188（P188）比例和卡波姆的含量，比較所制液體栓劑與普通固體栓劑經(jīng)直腸給藥后在Beagle犬體內(nèi)的藥-時曲線和藥動學參數(shù)。結(jié)果：處方中P407-P188比例為1∶1.2時緩釋液體栓劑的膠凝溫度為30.4～38.1℃，最接近直腸溫度；卡波姆含量為0.8%時緩釋液體栓劑的體外釋放符合零級方程，相關(guān)性最好（R2＝0.996）。普通固體栓的tmax為3.206 h，隨后血藥濃度下降明顯，緩釋時間不超過12 h，AUC0-∞為501.826 mg·h/L；緩釋液體栓劑的tmax為8.814 h，隨后血藥濃度下降，緩釋時間超過24 h，AUC0-∞為715.489 mg·h/L。結(jié)論：成功制得賴氨酸布洛芬緩釋液體栓劑，與普通固體栓劑比較其緩控釋效果更佳、體內(nèi)外相關(guān)性良好。

賴氨酸布洛芬；緩釋液體栓；釋放度；藥動學

布洛芬，又名丁苯丙酸，為非甾體類消炎鎮(zhèn)痛藥，常用于緩解關(guān)節(jié)炎、發(fā)熱、中度疼痛等癥狀[1-3]，因其療效顯著在臨床上使用廣泛。布洛芬溶解度低，將其制備成賴氨酸鹽后體內(nèi)生物利用度增高，消除速率加快。布洛芬體內(nèi)半衰期短，若長期大劑量口服給藥會刺激胃腸道，對患者的腎功能造成損傷[4]。

液體栓劑屬于原位凝膠，具有適宜的膠凝溫度（低于直腸生理溫度），膠凝溫度以下為液態(tài)，進入直腸后，能在體溫作用下迅速轉(zhuǎn)化為半固體的黏稠凝膠態(tài)，膠凝強度較大，不易從肛門漏出，避免了肝首關(guān)效應，提高了藥物的生物利用度[1]。泊洛沙姆407（P407）和泊洛沙姆188（P188）是制備液體栓的常用基質(zhì)，添加卡波姆可在降低膠凝溫度的同時提高凝膠強度和生物黏附力，使藥物達到緩釋效果。本研究以不同比例的P407-P188溶液為主要基質(zhì)，卡波姆為生物黏附劑，月桂氮酮為滲透劑，制備賴氨酸布洛芬緩釋液體栓，并進行體內(nèi)外評價。

1 材料

1.1 儀器

1260高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；KA-10000臺式離心機（上海化工機械廠）；pHS-3B pH計（上海儀電科學儀器股份有限公司）。

1.2 藥品與試劑

賴氨酸布洛芬原料藥（山東新華制藥廠，批號：150322，純度：99.5%）；P407、P188（江蘇海安石油化工廠，批號：140912、150103，純度：99.5%）；小兒布洛芬栓（廣東頤生堂生物醫(yī)藥科技有限公司，批號：10930050，規(guī)格：每粒50 mg）；卡波姆（重慶永華化工集團有限公司，批號：150228，型號：940）；月桂氮酮（湖北興銀河化工有限公司，批號：151230）；甲醇、乙腈為分析純，水為超純水。

1.3 動物

Beagle犬，♂，體質(zhì)量8～12 kg，由鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學院動物實驗中心提供，合格證號為00004123。實驗前24 h禁食，自由飲水。本實驗經(jīng)我醫(yī)院倫理委員會批準同意。

2 方法

2.1 賴氨酸布洛芬緩釋液體栓的制備

分別稱取不同比例P407-P188（處方A：P407 1.5 g、P188 1.5 g；處方B：P407 1.5 g、P188 1.8 g；處方C：P407 1.5 g、P188 2.0 g），加入超純水攪拌至分散均勻，4℃冰箱放置24 h，使凝膠充分溶脹至澄明，各處方平行5份，共15份；再精密稱取卡波姆0.02、0.04、0.06、0.08、0.1 g各3份，平行加至15份混合溶液中；最后分別加入賴氨酸布洛芬原料藥0.85 g、月桂氮酮0.1 g，攪拌均勻后加水至10.0 g，4℃冰箱保存。

2.2 凝膠性能

參照文獻[5]的方法分別檢測“2.1”項下制備的3種處方的賴氨酸布洛芬緩釋液體栓的膠凝溫度、凝膠強度、生物黏附力。

2.2.1 膠凝溫度 將含磁力攪拌轉(zhuǎn)子、溫度計的樣品置于水浴鍋中，攪拌下加熱，記錄攪拌轉(zhuǎn)子停止轉(zhuǎn)動時的溫度，即為膠凝溫度。

2.2.2 凝膠強度 采用自制裝置，將樣品放入自制的圓筒中，插入載重活塞，把活塞下降一定高度的時間作為衡量凝膠強度的標準。

2.2.3 生物黏附力 采用剝離試驗，將模型黏膜分別牢固黏附于上、下平板，固定其中一塊平板，再將樣品置于兩塊黏膜中間，壓緊，90°或180°拉另一塊平板，直到凝膠與黏膜完全分離，此時的剝離力即為生物黏附力。

2.3 體外釋放度

由于直腸蠕動無規(guī)律性，與常規(guī)溶出儀體系相差較大，因此體外釋放度測定采用自制體外溶出裝置[6]。將若干個帶刻度的直徑為3 cm的10 mL玻璃試管固定在自制木板孔道中，從試管底部向上延伸一根玻璃細管取樣用，玻璃試管中插入自制的帶孔塑料滴管。試管底部浸入37℃恒溫水浴鍋，將1.5 g樣品（卡波姆含量分別為0.6%、0.8%、1.0%的賴氨酸布洛芬緩釋液體栓）注入帶孔塑料管中，緩慢滴加37℃超純水2 mL。分別于0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 h從外側(cè)細管取溶出液10 μL，置于1 mL離心管中，加流動相稀釋至刻度，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾后，采用高效液相色譜法測定布洛芬的峰面積，以外標法計算累積釋放度[6]。

2.4 體內(nèi)血藥濃度測定

將8只犬隨機分為緩釋液體栓組和普通固體栓組，每組4只，緩釋液體栓組用注射器吸入緩釋液體栓4 g直接注入犬直腸內(nèi)；普通固體栓組直接將市售小兒布洛芬栓塞入犬直腸內(nèi)。給藥后0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、13.0、24.0 h于犬前腿靜脈取血1.5 mL，取血后立即加入1%肝素抗凝，8 000 r/min（離心半徑為3.0 cm）離心20 min，分離血漿。取肝素抗凝血漿0.5 mL，置于具塞離心管中，加入0.1 mol/L鹽酸0.1 mL，渦旋混勻，用環(huán)己烷-異丙醇（9∶1）提取3次，每次1.0 mL，渦旋2 min后合并提取液置于30℃下自然吹干。殘留物用流動相1.0 mL溶解，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾后，進樣測定，繪制藥-時曲線，采用3p97軟件計算藥動學參數(shù)。

3 結(jié)果

3.1 P407-P188和卡波姆對凝膠性能的影響

結(jié)果表明，緩釋液體栓中卡波姆含量越高，膠凝溫度越低、凝膠強度和生物黏附力越高。當P407-P188比例為15∶18時，膠凝溫度為30.4～38.1℃，最接近直腸溫度（36.3～37.5℃）。因此選擇P407-P188比例為15∶18。不同比例泊洛沙姆溶液與不同含量卡波姆對緩釋液體栓凝膠性能的影響見圖1。

圖1 不同比例泊洛沙姆溶液與不同含量卡波姆對緩釋液體栓凝膠性能的影響Fig 1 Effects of poloxamer solution with different ratios and carbomer with different contents on geling property of sustained-release liquid suppository

3.2 體外累積釋放度

不同含量卡波姆制備的緩釋液體栓的體外釋放特征均符合零級方程（R2＞0.975），相關(guān)性良好。當卡波姆含量為0.8%時，緩釋液體栓3 h時的體外釋放度近50.0%，7 h的體外釋放度近98.0%，R2＝0.996，均符合2015年版《中國藥典》（四部）規(guī)定的控釋制劑標準。不同含量卡波姆所制緩釋液體栓的體外釋放曲線見圖2。

3.3 藥動學參數(shù)與藥-時曲線

普通固體栓在犬體內(nèi)的tmax為3.206 2 h、cmax為55.770 1 μg/mL，隨后血藥濃度下降明顯，釋藥時間為8～12 h；緩釋液體栓在犬體內(nèi)的tmax為8.814 0 h、cmax為47.961 2 μg/mL，隨后血藥濃度下降，釋藥時間長達24h；另外緩釋液體栓的平均滯留時間（MRT）為10.93 h，提示其緩釋效果較普通固體栓更佳；緩釋液體栓的AUC0-∞為715.489 4 mg·h/L，相比普通固體栓增加約42%。普通固體栓劑與緩釋液體栓劑在犬體內(nèi)的藥-時曲線見圖3，主要藥動學參數(shù)見表1。

圖2 不同含量卡波姆所制緩釋液體栓的體外釋放曲線Fig 2 Release profile in vitro of sustained-release liquid suppository by carbomer with different contents

圖3 普通固體栓劑與緩釋液體栓劑在犬體內(nèi)的藥-時曲線Fig 3 Concentration-time curves of common solid suppository and sustained-release liquid suppository in Beagle dogs in vivo

表1 普通固體栓劑與緩釋液體栓劑在Beagle犬體內(nèi)的藥動學參數(shù)Tab 1 Pharmacokinetic parameter of common solid suppository and sustained-release liquid suppository in Beagle dogs in vivo

4 討論

研究表明，卡波姆能降低膠凝溫度，增強凝膠強度和生物黏附力[7-8]。凝膠強度越大，分子間空隙越小，藥物釋放越緩慢。但是卡波姆含量過高又會使緩釋時間延長（＞24 h），不利于藥物的釋放和血藥濃度的提高，甚至導致藥物釋放不出。本研究表明，卡波姆作為生物黏附劑，含量在0.2%～1.0%時能調(diào)節(jié)凝膠性能，為0.8%時體外釋放度最佳。

本研究中P407用量不變，膠凝溫度隨著P188比例增大而降低，降低幅度不大，而凝膠強度和生物黏附力隨著P188比例增大而增強，與洪春雪、李星等[9-10]報道一致。生物黏附力的增強可延長藥物停留于黏膜的時間，起到緩釋作用，但黏附力過大亦會造成黏膜損傷，給患者帶來用藥痛苦。因此筆者認為P407-P188（1∶1.2）最適合制備緩釋液體栓。本研究還表明，賴氨酸布洛芬緩釋液體栓的體內(nèi)緩釋時限與體外溶出釋藥時間基本一致，顯示良好的內(nèi)外相關(guān)性。普通固體栓的血藥濃度3 h后即下降，而賴氨酸布洛芬緩釋液體栓的血藥濃度在8 h后才緩慢下降，直至24 h血藥濃度仍在有效范圍?？梢?，緩釋液體栓雖然降低了峰濃度，但是推遲了有效物質(zhì)的tmax，延長了MRT，同時降低了清除率，具有更明顯的緩釋特點。

綜上所述，本研究優(yōu)化的賴氨酸布洛芬緩釋液體栓緩控釋效果良好，具有較好的應用前景。

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（編輯：鄒麗娟）

Preparation of Ibuprofen Lysine Sustained-release Liquid Suppository and Its Evaluation in vivo and in vitro

HAN Zhujun1，ZHANG Xuejuan2，CHENG Jin3（1.Dept.of Pharmacy，People’s Hospital of Dongtai City，Jiangsu Dongtai 224200，China；2.Operating Room，People’s Hospital of Dongtai City，Jiangsu Dongtai 224200，China；3.School of Pharmacy，Yancheng Vocational Institute of Health Sciences，Jiangsu Yancheng 224000，China）

OBJECTIVE：To prepare Ibuprofen lysine sustained-release liquid suppository，and conduct the evaluation in vivo and in vitro.METHODS：Ibuprofen lysine sustained-release liquid suppository was prepared by using Poloxamer solution as main matrix，carbomer as bioadhesive agent，laurocapram as penetrant.The ratios of poloxamer 407（P407）-poloxamer 188（P188）and carbomer content were screened by using gel temperature，gel intensity，biological adhesion and release rate in vitro as indexes，and the concentration-time curves and pharmacokinetic parameters of prepared liquid suppository and common solid suppository after rectal administration in Beagle dogs in vivo were compared.RESULTS：When the P407-P188 ratio was 1∶1.2，the gel temperature of sustained-release liquid suppository was 30.4-38.1℃，which was the nearest to the rectal temperature；when the content of carbomer was 0.8%，the in vitro release of sustained-release liquid suppository was in zero-order model，with favorable correlation（R2＝0.996）.The tmaxof common solid suppository was 3.206 h，then plasma concentration decreased significantly，release time did not exceed 12 h，AUC0-∞was 501.826 mg·h/L；tmaxof sustained-release liquid suppository was 8.814 h，then plasma concentration decreased，release time exceeded 24 h，AUC0-∞was 715.489 mg·h/L.CONCLUSIONS：Ibuprofen lysine sustained-release liquid suppository is successfully prepared，which shows better sustained-release effect and excellent correlation in vivo and in vitro than common solid suppository.

Ibuprofen lysine；Sustained-release liquid suppository；Release rate；Pharmacokinetics

R944；R971+.1

A

1001-0408（2017）10-1389-03

2016-09-21

2016-11-25）

＊副主任藥師。研究方向：藥物分析。電話：0515-85253855。E-mail：dryhzj@163.com

#通信作者：副教授，博士。研究方向：藥物制劑。電話：0515-88588630。E-mail：469828317@qq.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.10.25