古桑德吉 尼瑪潘多西藏自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所,西藏 拉薩 850000

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藏藥二十五味獐牙菜丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高

古桑德吉 尼瑪潘多
西藏自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所,西藏 拉薩 850000

目的：建立二十五味獐牙菜丸的質(zhì)量控制方法。方法：采用顯微鑒別法對(duì)處方中顯微特征強(qiáng)、重復(fù)性高的紅花和甘草進(jìn)行顯微特征的定性鑒別；對(duì)處方中小檗皮、丁香、木香進(jìn)行薄層色譜法定性鑒別。結(jié)果:顯微鑒別方法的專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好；薄層色譜方法簡(jiǎn)便、專屬性強(qiáng)。結(jié)論：本方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于藏藥二十五味獐牙菜丸的質(zhì)量控制。

二十五味獐牙菜丸；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；顯微特征；薄層鑒別

藏藥二十五味獐牙菜丸系藏族驗(yàn)方，最早記載于藏醫(yī)著名古籍《四部醫(yī)典》。1978年六省區(qū)藏藥標(biāo)準(zhǔn)開(kāi)始收載，名稱為“二十六味蒂達(dá)丸”，1995年《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》藏藥第一冊(cè)進(jìn)行了修訂[1]。二十五味獐牙菜丸由印度獐牙菜、松久蒂達(dá)、花錨、波棱瓜子、止瀉木子、訶子(去核)、木香、紅花、石灰華等二十五味藏藥材組成，具有清熱，利膽的功效，臨床用于各種“赤巴”“龍”病合并癥，急、慢性膽囊炎引起的腹部疼痛，鞏膜、皮膚出現(xiàn)黃疸等。原標(biāo)準(zhǔn)僅有理化鑒別及齊墩果酸的薄層鑒別，缺少對(duì)其他藥味的控制方法。為全面控制藏藥二十五味獐牙菜丸的質(zhì)量，本研究采用顯微鑒別法、薄層色譜法對(duì)處方中的對(duì)紅花、甘草、小檗皮、木香、丁香進(jìn)行定性鑒別研究。

1 儀器與材料

1.1 儀器 MettlerAB204-S電子天平，日本奧林巴斯BX-51 生物顯微鏡。

1.2 材料 鹽酸小檗堿(批號(hào)：110713-200208)、丁香(批號(hào)：121039-201405)、木香(批號(hào)：120921-201309)對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定研究院提供。高效G板薄層色譜板(青島海洋化工廠)，所用試劑均為分析純，水為自制純化水。

二十五味獐牙菜丸樣品(批號(hào)：20150606、20151207、20161007)由西藏神猴藥業(yè)有限責(zé)任公司提供，配制陰性樣品的藥材由西藏自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所提供。

2 顯微鑒別

將本品研細(xì)，取少許載玻片上，滴加水合氯醛液加熱透化后，置顯微鏡下觀察：花粉粒眾多，類圓形、橢圓形或橄欖形，具3個(gè)萌發(fā)孔，外壁呈齒狀突起；長(zhǎng)管狀分泌細(xì)胞內(nèi)含黃棕色至紅棕色分泌物為紅花顯微特性。纖維成束，周?chē)”诩?xì)胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維為甘草顯微特性。木纖維眾多，成束或散在，常碎斷，末端傾斜，壁呈連珠狀增厚，具斜紋孔為印度獐牙菜顯微特性。碳酸鈣結(jié)晶短棒狀或柱狀，直徑2～4μm為石灰華顯微特征。薄壁細(xì)胞壁連珠狀增厚為蓽茇顯微特性。胚乳細(xì)胞無(wú)色或淡黃色，類方或類多角形，細(xì)胞中常含草酸鈣簇晶、脂肪油滴為止瀉木子顯微特性[2]。見(jiàn)圖1～6。

3 薄層色譜法鑒別

3.1 小檗皮的薄層色譜鑒別[3-4]

3.1.1 供試品溶液的制備 取本品1g，研細(xì)，加甲醇10mL，置水浴上加熱回流15min，濾過(guò)，濾液濃縮至1mL，作為供試品溶液。3.1.2 對(duì)照品溶液的制備 取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.1.3 陰性樣品溶液的制備 按處方配比，取除小檗皮外的其他藥材，按上述供試品溶液制備方法制得陰性樣品溶液。3.1.4 薄層條件及結(jié)果 照薄層色譜法(2015年版《中國(guó)藥典》四部通則0502)進(jìn)行試驗(yàn)，吸取上述三種溶液5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10∶7∶1∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同的黃色熒光斑點(diǎn)。本方法鹽酸小檗堿對(duì)照品及供試品中有一黃色的熒光主斑點(diǎn)，陰性對(duì)照樣品無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)圖7。

3.2 丁香薄層色譜鑒別[3-4]

3.2.1 供試品溶液的制備 取本品6g，研細(xì)，加熱水20mL溶解，振搖20min，離心，取上清液用乙醚30mL分2次提取，合并乙醚液，揮干，殘?jiān)?mL甲醇溶解，作為供試品溶液。

3.2.2 對(duì)照品溶液的制備 取丁香酚對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含4μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.2.3 陰性樣品溶液的制備 按處方配比，除丁香的其它藥材，按上述供試品溶液制備方法制得陰性樣品溶液。

3.2.4 薄層條件及結(jié)果 照薄層色譜法(2015年版《中國(guó)藥典》四部通則0502)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照樣品無(wú)干擾。見(jiàn)圖8。

3.3 木香薄層色譜鑒別[3-4]

3.3.1 供試品溶液的制備 取本品2g，加甲醇30mL，超聲30min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液。

3.3.2 對(duì)照藥材溶液的制備 取木香對(duì)照藥材0.2g，加甲醇15mL同法制成對(duì)照藥材溶液。

3.3.3 陰性樣品溶液的制備 按處方配比，除木香外的其它藥材，按上述供試品溶液制備方法制得陰性樣品溶液。

3.3.4 薄層條件及結(jié)果 照薄層色譜法(2015年版《中國(guó)藥典》四部通則0502)試驗(yàn)，取上述兩種溶液各10μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試。品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同的斑點(diǎn)，且陰性無(wú)干擾。見(jiàn)圖9。

4 討論

本研空采用顯微鑒別法對(duì)二十五味獐牙菜丸處方藥材進(jìn)行了大量的顯微鑒別試驗(yàn)，由于處方藥味多，多種藥均含石細(xì)胞，不具有專屬性，不易歸屬，故石細(xì)胞不在收入正文中。雖有印度獐牙菜、石灰華、蓽茇、止瀉木子等的顯微特性，因不易查檢。故只加了顯微特征強(qiáng)，重復(fù)性高的紅花和甘草的顯微特征作為本制劑的顯微特征鑒別。

在處方藥材中小檗皮、丁香、木香的薄層色譜鑒別斑點(diǎn)清晰，且均無(wú)陰性干擾，經(jīng)過(guò)反復(fù)試驗(yàn)，專屬性強(qiáng)，色譜行為的重現(xiàn)性較好，可以作為本制劑中所含小檗皮、丁香、木香藥材的定性鑒別。

本研究部分內(nèi)容在原先1995年版《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》藏藥第一冊(cè)基礎(chǔ)上增加了小檗皮、丁香、木香薄層色譜法鑒別。結(jié)果顯示，該質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)符合制劑的有關(guān)規(guī)定，為藏藥二十五味獐牙菜丸提供了簡(jiǎn)便有效的質(zhì)量控制方法。

[1]中國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)(藏藥第一冊(cè))[S].北京：人民衛(wèi)生出版社，1995.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典中藥材顯微鑒別彩色圖譜[M].北京: 人民衛(wèi)生出版社，2009.

[3]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典中藥薄層色譜彩色圖集[M].廣州:廣東科技出版社，1993.

[4]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(四部)[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015.

Improve on the Quality Standard for Tebian Medicine Ershiwuweizhangyacai Pills

Gusang Deji Nima Panduo

Tibet Institute forFood and Drug Control，Lhasa 850000，China

Objective To establish a quality Standard for Ershiwuweizhangyacai Pills．Methods CarthamiFlos and Glycyrrhize Radix et Rhizoma are main components of Ershiwuweizhangyacai Pills，it were distinguished by microscopic distinction．Berberidis Cortex，Caryophylli Flos and Aucklandiae Radix were identified by TLC(Thin Layer Chromatography)．Results Microscopic identification is specific and repeatable；TLC is easy going and has a good specificity．Conclusion TLC is simple，precise and repeatable．This method is worked for quality control of Ershiwuweizhangyacai pills．

Ershiwuweizhangyacai Pills； Quality Standards; Microscopic Characteristic；Thin Layer Identification

古桑德吉(1990-)，女，藏族，本科，初級(jí)藥師，研究方向?yàn)椴厮庂|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。E-mail:511415007@qq.com

R284.1

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1007-8517(2017)07-0015-03

2017-02-10 編輯：程鵬飛)