李 娟 樸天華 王 睿 王云楓

(牡丹江醫(yī)學院附屬紅旗醫(yī)院眼科，黑龍江 牡丹江 157000)

中老年翼狀胬肉患者癌胚抗原相關細胞黏附分子6和血管內(nèi)皮生長因子表達與微血管密度的關系

李 娟 樸天華 王 睿 王云楓1

(牡丹江醫(yī)學院附屬紅旗醫(yī)院眼科，黑龍江 牡丹江 157000)

目的 檢測翼狀胬肉中癌胚抗原相關細胞黏附分子(CEACAM)6、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和CD105標記的微血管密度(MVD)的關系，探討其臨床價值。方法 64例翼狀胬肉患者臨床資料及術后標本作為觀察組，15例正常結(jié)膜組織標本作為對照組。應用免疫組化方法檢測兩組CEACAM6、VEGF和CD105的表達。結(jié)果 兩組CEACAM6、VEGF表達的陽性率及MVD值差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。觀察組CEACAM6、VEGF和MVD在不同病變的表達差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。相關分析顯示觀察組CEACAM6與MVD值、VEGF與MVD值均呈正相關性。結(jié)論 翼狀胬肉中CEACAM6、VEGF高表達預示病變處于進展狀態(tài)，間質(zhì)中有較高的血管密度。

翼狀胬肉；癌胚抗原相關細胞黏附分子(CEACAM)6；血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)；微血管密度(MVD)

翼狀胬肉是一種纖維血管組織從結(jié)膜向角膜增生的常見外眼疾病，中醫(yī)稱“胬肉攀睛”，俗稱“魚肉”，不僅影響局部結(jié)構(gòu)，還可以損害視功能〔1,2〕，目前其發(fā)病因素不清楚。近來研究認為翼狀胬肉的發(fā)生需要新生的血管化〔3〕。癌胚抗原相關細胞黏附分子(CEACAM)6是在細胞表面和細胞膜中形成的跨膜糖蛋白，是癌胚抗原亞型，近來的研究發(fā)現(xiàn)其與血管生成有一定關系〔4,5〕。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是經(jīng)典的血管生成促進因子，可以引起血管內(nèi)皮的繁殖和新生，并促進間質(zhì)的血管化〔6,7〕。本實驗觀察翼狀胬肉中CEACAM6、VEGF的表達特征，關注二者與CD105標記的微血管密度(MVD)的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2013～2015年行翼狀胬肉切除的患者64例作為觀察組，其中靜止期31例，進行期33例，男34例，女30例，年齡40～69例，平均59歲，病程11個月～10年。均無其他角膜及結(jié)膜的病變。15例正常結(jié)膜組織標本作為對照組，來源于無眼病的供體眼或活體手術眼，男10例，女5例，年齡35～65例，平均53歲?；颊吲c家屬簽署知情同意書，并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準。兩組一般資料差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 CEACAM6、VEGF和CD105的檢測 均應用免疫組化SP法、二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色。操作嚴格按實驗步驟進行，做好質(zhì)控工作。

1.3 CEACAM6、VEGF和MVD結(jié)果的判定方法 CEACAM6、VEGF：定位于細胞質(zhì)，以細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒物質(zhì)為陽性。隨機計數(shù)5個高倍視野區(qū)域(400倍)，取其平均值，以陽性細胞≥10%為陽性表達，<10%為陰性表達。CD105結(jié)果的判定方法：以微血管內(nèi)皮細胞的細胞質(zhì)呈棕黃色為陽性細胞，MVD計數(shù)參照Weindner等〔8〕方法，先確定棕色染色的內(nèi)皮細胞或細胞叢作為一個計數(shù)的血管，首先在低倍鏡下確定腫瘤內(nèi)血管密度的熱點區(qū)，再在高倍鏡下觀察腫瘤細胞與結(jié)締組織成分明顯區(qū)別的任何一個染色的內(nèi)皮細胞或細胞叢計為一個血管，如果不連續(xù)，其分支結(jié)構(gòu)也作為一個血管計數(shù)。記錄5 個視野內(nèi)的微血管數(shù)，取其平均值。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SAS6.12統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗、t檢驗、Pearson相關分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組CEACAM6、VEGF和MVD比較 兩組CEACAM6、VEGF陽性率、MVD值差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2 觀察組CEACAM6、VEGF和MVD在不同病變中的表達 觀察組CEACAM6、VEGF和MVD在不同病變中的表達差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

2.3 觀察組CEACAM6、VEGF和MVD的相關性 CEACAM6與MVD值(r=0.48，P=0.045 1)、VEGF與MVD值(r=0.54，P=0.012 2)均呈正相關性。

表1 兩組CEACAM6、VEGF陽性表達和MVD比較〔n(%)〕

表2 觀察組CEACAM6、VEGF陽性表達和MVD在不同病變中的表達〔n(%)〕

3 討 論

翼狀胬肉一般認為是由外界刺激而形成的局部球結(jié)膜纖維血管組織的炎性病變，瞼裂部球結(jié)膜及結(jié)膜下組織變性、肥厚、增生，向角膜內(nèi)發(fā)展，形成三角形贅生組織，單眼或雙眼受犯，侵犯角膜后逐漸增大，甚至可覆蓋至瞳孔區(qū)而嚴重影響視力〔9〕。近來認為外界刺激、慢性炎癥引起的局部組織的細胞增殖和血管形成可能對病變有明顯的促進作用〔10〕。而新生的血管是翼狀胬肉的主要病理表現(xiàn)〔11〕。VEGF定位在染色體的6p21.3，全長14 kb，由8個外顯子，7個內(nèi)含子組成，這是被研究最多的與血管生成相關的因子〔12,13〕，其高表達時可以通過受體參與間質(zhì)的血管生成〔14〕。CD105被認為是與細胞增生有關的內(nèi)皮細胞膜抗原〔15〕，也有學者認為CD105是轉(zhuǎn)化生長因子-β受體的復合物之一，正常情況下CD105表達的間質(zhì)血管內(nèi)皮中，因此CD105陽性的部位提示為血管〔16,17〕。CEACAM6作為免疫球蛋白超家族的成員，也是細胞表面的糖蛋白，主要在炎性反應和免疫反應部位活化淋巴細胞、巨噬細胞、血管內(nèi)皮細胞及各種上皮細胞和成纖維細胞表面表達；研究顯示其在腫瘤中的表達異常，并對腫瘤進展有一定作用〔18〕；其與細胞的血管生成相關，尤其是在高增殖狀態(tài)的腫瘤中〔19〕。張哲等〔20〕通過研究CEACAM6在骨肉瘤中的表達，發(fā)現(xiàn)CEACAM6參與細胞惡性轉(zhuǎn)變的增殖過程，同時對間質(zhì)的血管生成有重要的促進作用。本實驗提示翼狀胬肉中CEACAM6、VEGF的表達升高可以促進病變的形成；CEACAM6、VEGF可以在一定程度上促進間質(zhì)中CD105陽性的血管新生，此時實質(zhì)細胞和間質(zhì)細胞生長活躍，血液供應充足。此結(jié)果也提示翼狀胬肉是以血管生成為中心環(huán)節(jié)的病變，積極研究病變的血管生成，對闡明其生長機制有重要價值，而阻斷血管生成可能對治療提供一種可行的手段〔21,22〕。

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〔2015-03-17修回〕

(編輯 苑云杰)

牡丹江市科學技術計劃項目(No.Z2015s0030)

王云楓(1981-)，男，主治醫(yī)師，碩士，主要從事內(nèi)分泌學研究。

李 娟(1980-)，女，主治醫(yī)師，碩士，主要從事眼科學研究。

R777.33

A

1005-9202(2017)06-1497-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.06.087

1 內(nèi)分泌科