李曉博 趙敬聰 劉孝利 王 琦
(1 山東福禾菌業(yè)科技有限公司,山東鄒城273500;2 山東省科創(chuàng)食用菌產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院,山東鄒城273500;3 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食藥用菌教育部工程研究中心,吉林長春130118)
來福蘑(Lyophyllum decastes)是李玉院士已成功馴化,并可進(jìn)行商業(yè)化栽培的珍稀食用菌荷葉離褶傘命名的商品名,它屬擔(dān)子菌門(Basidomycota),傘菌綱(Agaricomycetes),傘菌目(Agaricales),離褶傘科(Lyophyllaceae),離褶傘屬(Lyophyllum Karst)真菌[1]。來福蘑肉質(zhì)細(xì)膩、帶有淡淡荷葉的清香,味道鮮美,口感清脆,且子實體營養(yǎng)價值高,有增強(qiáng)免疫力的藥用功能,是一種食藥兼用的珍稀食用菌。
隨著食用菌液體菌種的普及,液體菌種具有污染率低、接種速度快、降低工廠化栽培食用菌的生產(chǎn)成本等優(yōu)勢越來越受到重視。很多學(xué)者對荷葉離褶傘的液體發(fā)酵進(jìn)行了研究[2~6],但至今沒有關(guān)于利用發(fā)酵罐制作工廠化栽培液體菌種的報道。筆者通過探究來福蘑液體菌種的配方,以此確定最佳的工廠化液體菌種培養(yǎng)配方[7]。現(xiàn)將試驗結(jié)果總結(jié)如下。
1.1 供試菌株供試來福蘑菌株由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)菌物研究中心提供。
1.2 試驗方法
1.2.1 配方設(shè)計 試驗配方設(shè)計源自山東福禾菌業(yè)科技有限公司使用原材料,配方設(shè)計見表1。
1.2.2 觀察統(tǒng)計方法
表1 原料配方設(shè)計 (kg)
1.2.2.1 菌球比較 五個配方的發(fā)酵罐接入相同日期的搖瓶菌種后,觀察菌球濃度、菌球的大小、到達(dá)發(fā)酵終點的時間。
1.2.2.2 顯微鏡比較 取少量菌液進(jìn)行顯微鏡的微觀觀察,觀察菌絲的生長情況。記錄菌絲的粗壯、相同視野下鎖狀聯(lián)合的數(shù)量。
1.2.2.3 接種栽培包比較 達(dá)到發(fā)酵終點時,將五個配方的液體菌種接入栽培包,每個配方接種100包,栽培包配方為木屑52%,麩皮5%,玉米芯41%,碳酸鈣1%,石灰1%。料含水量65%,pH9~10。觀察并記錄菌種萌發(fā)時間、栽培包長滿菌絲時間、污染率以及出菇品質(zhì)和產(chǎn)量[8]。
2.1 供試配方發(fā)酵罐菌球比較結(jié)果由表2 可以看出,相同體積的菌液中,配方4 的菌球數(shù)量最多,其次是配方3 和配方2,最少的是配方5。配方4、5的菌球最小,似小米狀,而配方1、2、3 菌球太大,似黃豆粒,尤其是配方1。發(fā)酵終點,配方1、2、3、4 均是5 d,而配方5 的發(fā)酵終點太長,達(dá)9 d。綜上所述,配方2、4液體菌種生長最佳。
表2 菌球比較結(jié)果
圖1 各配方菌絲在顯微鏡下形態(tài)比較(40倍,發(fā)酵第4周)
圖2 各配方的來福蘑液體菌種接種栽培包子實體形態(tài)特征
2.2 顯微鏡觀察結(jié)果觀察圖1 發(fā)現(xiàn)配方1 菌球大,絮狀菌絲少,鎖狀聯(lián)合也少;配方2 菌絲長勢較好,絮狀菌絲較多,鎖狀聯(lián)合較配方1 最多;配方3和配方4長勢最好,相同培養(yǎng)時間,達(dá)到的菌絲濃度最大;配方5 由于加入的玉米粉、豆粉較少,絮狀菌絲較配方1多,但是菌絲較少,長勢弱。
2.3 接種栽培包栽培結(jié)果由表3 可以看出,配方2、3、4 培養(yǎng)的液體菌種接種后萌發(fā)時間最短,配方1、5萌發(fā)時間較長。原因是配方1菌種菌球過大,菌種活性較差,而配方5,由于加入的糖分過高,沒有豆粉、玉米粉這樣的菌種附著體,活性較其他配方較差,導(dǎo)致菌種的萌發(fā)時間較長;配方2、4培養(yǎng)液體菌種接種后菌絲滿包時間最短;配方3、4 的污染率最低、配方5 的污染率最高,是由于添加的糖分過多,導(dǎo)致液體菌種營養(yǎng)過盛,引起污染較多。配方4的原基數(shù)量最多,品質(zhì)最佳,不易開傘,生物學(xué)轉(zhuǎn)化率最高。
表3 液體菌種接種栽培包培養(yǎng)結(jié)果
液體菌種配方的選擇對來福蘑生長周期,以及出菇產(chǎn)量和品質(zhì)有很大的影響。試驗配方中最佳福蘑液體菌種的配方為配方4(玉米粉3 kg,豆粉3 kg,葡萄糖4 kg,白砂糖4 kg,磷酸二氫鉀1 kg,硫酸鎂0.5 kg,加水800 L)。該配方菌種菌球數(shù)量多,菌球小,5 周天即可達(dá)到發(fā)酵終點,接入栽培包后,菌種24 h 即可萌發(fā),長滿包時間48 d,污染率0.5%;出菇期間,原基數(shù)量最多,出菇品質(zhì)佳(圖2),生物學(xué)轉(zhuǎn)化率可達(dá)90%。