付剛，郭敏，陳晨

（1.韶關(guān)出入境檢驗檢疫局，廣東韶關(guān)512023；2.東莞出入境檢驗檢疫局，廣東東莞523071）

PCR技術(shù)在動植物檢疫中的應(yīng)用探究

付剛1，郭敏1，陳晨2

（1.韶關(guān)出入境檢驗檢疫局，廣東韶關(guān)512023；2.東莞出入境檢驗檢疫局，廣東東莞523071）

在當(dāng)下我國養(yǎng)殖業(yè)與種植業(yè)不斷發(fā)展的時代背景下，PCR技術(shù)得到了進(jìn)一步的推廣和普及。PCR技術(shù)在動植物檢疫工作中發(fā)揮了關(guān)鍵性的作用。關(guān)于PCR的基本原理、優(yōu)點、在動植物檢疫工作中的應(yīng)用、對于動植物檢疫工作的貢獻(xiàn)及其未來發(fā)展趨勢，進(jìn)行簡單的闡述和分析。

PCR技術(shù)；動植物檢疫；應(yīng)用

近年來，隨著社會養(yǎng)殖業(yè)及其種植業(yè)的不斷發(fā)展，其面臨著一個關(guān)鍵的挑戰(zhàn)，關(guān)于檢疫工作的有效、合理、準(zhǔn)確開展，一直以來，都是動植物基本行業(yè)發(fā)展中的重心。伴隨著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，各種氣候問題的影響、還有飼料和農(nóng)藥對動植物行業(yè)的作用，合理開展檢疫工作，加強(qiáng)對動植物檢疫工作的推進(jìn)，勢在必行。關(guān)于動植物檢疫技術(shù)的發(fā)展，一直處于一個不斷發(fā)展和更新的狀態(tài)中，目前，PCR作為一項新的生物檢測技術(shù)，在動植物檢疫工作中發(fā)揮了不可估量的影響和作用。

1 PCR技術(shù)的原理及其優(yōu)點概述

PCR技術(shù)是一種新型的生物檢測技術(shù)，PCR技術(shù)又被稱為多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，或者稱為無細(xì)胞分析克隆法。其屬于一種特定DNA片段體外擴(kuò)增法，根據(jù)相關(guān)的生物學(xué)原理及其環(huán)節(jié)，進(jìn)行特定DNA分子的擴(kuò)增，這是PCR技術(shù)的主要應(yīng)用目標(biāo)。PCR技術(shù)的基本原理如下：在兩個寡聚核苷酸雜交對應(yīng)鏈的側(cè)邊上，發(fā)生一定的引物退火、酶促退火或者模板變性作用等，通過一系列的基本作用，實現(xiàn)特定DNA片段的擴(kuò)增，從一個母鏈生成一定產(chǎn)物的過程，并在PCR技術(shù)的指導(dǎo)下，能夠加強(qiáng)對一些特定物質(zhì)的熒光檢測。PCR技術(shù)是一門新型的生物學(xué)檢測技術(shù)，目前已經(jīng)與多門學(xué)科發(fā)生了重要的聯(lián)系。關(guān)于PCR技術(shù)的基本優(yōu)點，如下所示：①高效、快速的優(yōu)點。隨著生物學(xué)檢測技術(shù)的發(fā)展，PCR技術(shù)得到了廣泛的應(yīng)用。傳統(tǒng)的生物學(xué)檢測技術(shù)具有速度慢的特征，其高效性不強(qiáng)。而PCR技術(shù)具有高效、快速的特征，無論是在動物檢測領(lǐng)域當(dāng)中，還是在植物檢測技術(shù)發(fā)展中，PCR技術(shù)都具有一定的高效特征，能夠快速進(jìn)行生物學(xué)檢測。與傳統(tǒng)的檢測技術(shù)相比，具有高效性。②PCR技術(shù)具有準(zhǔn)確性。這是在動植物檢疫工作中，使用PCR技術(shù)的關(guān)鍵優(yōu)勢。在傳統(tǒng)的檢疫工作中，檢測技術(shù)的準(zhǔn)確性不是很好，對于檢測物質(zhì)的工作開展，準(zhǔn)確性低。但是PCR技術(shù)具有高度的準(zhǔn)確性，經(jīng)過PCR技術(shù)檢測，可以保證檢測工作的良好開展和準(zhǔn)確進(jìn)行。

2 PCR技術(shù)在動植物檢疫中的應(yīng)用

關(guān)于PCR技術(shù)在動植物檢疫中的應(yīng)用，在這里，舉出兩個主要的例子。PCR技術(shù)具有良好的應(yīng)用空間，在當(dāng)下的動植物檢疫工作推進(jìn)中，PCR技術(shù)表現(xiàn)出了良好的應(yīng)用性能。

（1）PCR技術(shù)在動物檢疫中的應(yīng)用。隨著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人類養(yǎng)殖業(yè)水平的提升，目前，我國的養(yǎng)殖業(yè)處于不斷發(fā)展的進(jìn)程中，與此同時，養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展也面臨著動物檢疫工作的挑戰(zhàn)。在新時代背景下，如何提升檢測工作高效性和準(zhǔn)確性，是養(yǎng)殖業(yè)不斷發(fā)展中的重點工作。關(guān)于PCR技術(shù)在動物檢疫中的應(yīng)用，可以從對豬細(xì)小病毒的檢測方向分析，豬細(xì)小病毒是屬于細(xì)小病毒科的一種自助復(fù)制病毒，主要的生理作用是引發(fā)母豬的流產(chǎn)或者新生小豬的大量死亡，還有一些常見的皮膚病、腹瀉等不良情況，也都是由于豬細(xì)小病毒引發(fā)的。使用PCR技術(shù)進(jìn)行豬細(xì)小病毒的檢測，能夠?qū)崿F(xiàn)早期快速診斷。關(guān)于PCR技術(shù)對豬細(xì)小病毒的檢測，主要的內(nèi)容如下：首先，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)與病毒增殖，利用SK傳代細(xì)胞和原代豬腎細(xì)胞增殖病毒，將豬細(xì)小病毒接種于0.01個感染復(fù)數(shù)的優(yōu)良細(xì)胞當(dāng)中，培養(yǎng)72h后，收集懸浮液，在20℃的條件下保存。其次，進(jìn)行病毒提取，使用一定的生物學(xué)實驗方法進(jìn)行病毒的提取，并且加強(qiáng)相關(guān)產(chǎn)物的擴(kuò)增。然后，選擇合適的引物和探針，引物主要分為內(nèi)部引物和外部引物，外部引物與內(nèi)部引物之間的寡聚核苷酸作為探針，檢測細(xì)胞特異性。最后，是套式PCR體外擴(kuò)增方法，嚴(yán)格按照相關(guān)生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行，并且確保PCR產(chǎn)物的合成。產(chǎn)物經(jīng)過一定的處理，可以進(jìn)行豬細(xì)小病毒的檢測。

（2）PCR技術(shù)在植物檢疫中的應(yīng)用。在植物檢疫工作中，可以使用PCR技術(shù)進(jìn)行菜豆黃色花葉病毒的檢測，傳統(tǒng)的檢測方法不能夠?qū)崿F(xiàn)對球莖的檢測，菜豆黃色花葉病毒作為一種感染唐菖蒲的病毒，對于唐菖蒲的良好生長，具有消極的作用。利用PCR技術(shù)進(jìn)行檢測，能夠加強(qiáng)對球莖的檢測，檢測其中是否含有病毒，可以對無毒繁殖材料進(jìn)行選擇，實現(xiàn)唐菖蒲的增產(chǎn)。在植物檢測工作中，使用PCR檢測技術(shù)，具有很強(qiáng)的應(yīng)用形勢。當(dāng)下許多的植物檢測工作都使用了PCR技術(shù)。隨著PCR技術(shù)在動植物檢測工作當(dāng)中的推進(jìn)，在未來，PCR技術(shù)對于動物相關(guān)病情的診斷、疾病的預(yù)防、流感病毒等的控制，對于植物基本產(chǎn)量的提升，病蟲害的綜合防治，PCR技術(shù)發(fā)揮了關(guān)鍵性的影響。

3 結(jié)語

PCR技術(shù)是一種重要的生物檢測技術(shù)，對于動植物檢疫工作的推進(jìn)，具有重要的影響。PCR技術(shù)具有高效、快速、準(zhǔn)確的特征。在動物檢疫中，能夠及時發(fā)現(xiàn)潛在的疾病風(fēng)險，便于管理者采取有效方法，加強(qiáng)相關(guān)疾病的綜合預(yù)防。在植物檢疫中，可以為植物的成長創(chuàng)造一個良好的環(huán)境條件，有效解決影響植物生長的問題，提高產(chǎn)量。總而言之，PCR技術(shù)是現(xiàn)代動植物檢疫工作中的重要技術(shù)，值得普及和推廣。

［1］蔡光英.PCR技術(shù)在動物檢疫中的新應(yīng)用［J］.湖北畜牧獸醫(yī)，2008，（7）：14-15.

付剛（1984-），男，湖南岳陽人，大學(xué)本科，助理農(nóng)藝師，主要研究方向：動植物檢疫。