宋美玉 ，馮曉娜

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科,黑龍江 佳木斯 154003 )

基質(zhì)金屬蛋白酶-9和CD44s與子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系①

宋美玉 ，馮曉娜

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科,黑龍江 佳木斯 154003 )

目的：探討基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)和細(xì)胞黏附分子CD44s的表達(dá)與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。方法：實(shí)驗(yàn)組為患有巧克力囊腫的患者30例取其在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜，對照組為宮頸上皮內(nèi)瘤變切除子宮的患者30例，采用SP免疫組化方法和光鏡分析病理組織中MMP-9和CD44s的表達(dá)水平。結(jié)果：巧囊異位內(nèi)膜組與其他兩組相比MMP-9、CD44s的表達(dá)均增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；異位內(nèi)膜組子宮內(nèi)膜組織CD44vs與MMP-9的表達(dá)水平呈正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論：子宮內(nèi)膜異位癥患者的在位內(nèi)膜與異位內(nèi)膜中MMP-9與CD44s的表達(dá)均有變化，提示子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生、發(fā)展可能與MMP-9和CD44s的表達(dá)增加相關(guān)。

子宮內(nèi)膜異位癥； 基質(zhì)金屬蛋白酶-9；CD44s； 免疫組織化學(xué)

子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis，EMT)是一種良性、慢性疾病，但有類似惡性腫瘤侵襲性的特點(diǎn)，易引起女性不孕、慢性骨盆疼痛(35%～50%)等嚴(yán)重影響女性心理和生理健康，降低生活質(zhì)量。EMT病因尚未明，近年來發(fā)現(xiàn)與免疫功能異常有關(guān)，在正常生理情況下，逆行月經(jīng)血通過免疫系統(tǒng)誘導(dǎo)腹腔的炎癥反應(yīng)，能夠起到清除異位的子宮內(nèi)膜組織，腹腔免疫功能下降使異位內(nèi)膜逃脫免疫監(jiān)視，給其在腹腔內(nèi)存活提供了有利條件[1,2]。病灶形成的過程很復(fù)雜，首先需要子宮內(nèi)膜組織黏附于腹膜上，最終侵襲種植形成病灶。在影響惡性腫瘤的侵襲能力方面，細(xì)胞黏附分子與細(xì)胞外蛋白水解酶類是至關(guān)重要的因素，可以增強(qiáng)其侵襲及轉(zhuǎn)移能力。例如檢測骨肉瘤中的黏附分子CD44s與細(xì)胞外蛋白水解酶MMP-9，腫瘤侵襲力的強(qiáng)弱與二者表達(dá)水平的高低有關(guān)[3]。本實(shí)驗(yàn)通過檢測卵巢巧克力囊腫患者在位及異位內(nèi)膜中MMP-9和CD44s的表達(dá)，討論二者表達(dá)水平與子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對象與分組

選取2015-03～2015-10在筆者所在單位住院的患者。年齡25～50歲間未絕經(jīng)。卵巢巧克力囊腫患者未應(yīng)用藥物治療，需行腹腔鏡或開腹手術(shù)治療，取其在位內(nèi)膜與異位內(nèi)膜(巧克力囊腫壁)。實(shí)驗(yàn)組為患有巧克力囊腫的患者，取其在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜，各30例。對照組為宮頸上皮內(nèi)瘤變切除子宮的患者，取其在位子宮內(nèi)膜30例。實(shí)驗(yàn)組術(shù)后病理證實(shí)為子宮內(nèi)膜異位癥，對照組術(shù)后病理證實(shí)子宮內(nèi)膜無病變并且無子宮腺肌病。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與方法

所有在位內(nèi)膜與異位內(nèi)膜均常規(guī)制片處理，染色采用免疫組化SP法。試劑為免疫組織化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)型CD44s和MMP-9單克隆抗體和超敏SP光譜試劑盒。

1.3 結(jié)果分析

CD44s染色陽性主要位于胞膜和胞漿，MMP-9染色陽性信號主要位于胞漿，均呈棕褐色顆粒。根據(jù)RemmeleandStegnerdeIRS[4]對表達(dá)強(qiáng)度計(jì)分: 0分：陽性率小于5%,細(xì)胞無顯色；1分：陽性率6%～25%，淺黃色；2分：陽性率26%～50%，棕黃色。3分：陽性率51%～75%，棕黃色；4分：陽性率>75%，棕褐色。小于3分為(-)，3～5分為(+)，6～8分()，大于等于9分()。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1CD44s表達(dá)水平結(jié)果

CD44s在異位內(nèi)膜組的陽性率表達(dá)高于在位內(nèi)膜組及對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表1 不同分組子宮內(nèi)膜組織CD44s的表達(dá)(n=30，%)

注:a與b相比較，P<0.05；a、b與Ⅲ組相比較，P值均<0.05。

2.2MMP-9表達(dá)水平結(jié)果

表2 不同分組子宮內(nèi)膜組織MMP-9的表達(dá)(例)

注:a與b相比較，P<0.05；a、b與Ⅲ組相比較，P值均<0.05。

MMP-9在異位內(nèi)膜組(Ⅰ組)的陽性率表達(dá)高于在位內(nèi)膜組(Ⅱ組)及對照組(Ⅲ組)，P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3CD44s與MMP-9在異位內(nèi)膜組的中表達(dá)

Pearson相關(guān)分析顯示P<0.05，異位內(nèi)膜組子宮內(nèi)膜組織CD44vs與MMP-9表達(dá)呈正相關(guān)。

3 討論

對于EMT的病因有多種猜測，子宮內(nèi)膜在腹腔最終形成病灶是一個(gè)復(fù)雜、多因素作用的結(jié)果，無論哪種學(xué)說是正確的，既往研究表明[5～7]，子宮內(nèi)膜細(xì)胞在宮腔以外種植需經(jīng)黏附、侵襲、血管生成三個(gè)過程。在眾多因素中細(xì)胞表面黏附分子及細(xì)胞外水解蛋白起到重要作用。CD44s結(jié)合其在腹膜上的配體纖維黏連蛋白(FN)，起到增強(qiáng)蛋白水解酶的作用，會(huì)使進(jìn)入腹腔的子宮內(nèi)膜種植及侵襲能力增強(qiáng)，利于子宮內(nèi)膜細(xì)胞在黏附。參與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移過程的蛋白水解酶種類繁多，如MMP-9，它可以降解多種膠原成分、破壞基底膜屏障和與多種細(xì)胞因子起協(xié)同作用，最終導(dǎo)致腫瘤組織內(nèi)新生血管的增多，為腫瘤細(xì)胞的大量增殖提供養(yǎng)分，并且保護(hù)腫瘤細(xì)胞不被機(jī)體的免疫殺傷作用清除，促進(jìn)其生長和侵襲?？傊緦?shí)驗(yàn)結(jié)果與之前研究相符：二者對子宮內(nèi)膜異位癥的影響類似于對腫瘤細(xì)胞的作用。巧囊患者異位內(nèi)膜組中CD44s的表達(dá)含量明顯高于其他兩組，可能提示我們異位內(nèi)膜也具有在其作用下黏附、侵襲能力變強(qiáng)的特點(diǎn)；對比于其他兩組，MMP-9的表達(dá)在異位內(nèi)膜組中增高，提示異位內(nèi)膜的水解蛋白能力可能更強(qiáng)，MMP-9通過使血管新生增多、細(xì)胞間黏附的作用變強(qiáng)，使異位內(nèi)膜的黏附侵襲能力大大加強(qiáng)，利于其種植在除子宮體以外的部位，最終形成病灶。此外，MMP-9與CD44s在子宮內(nèi)膜異位癥組織的陽性表達(dá)呈正相關(guān)，提示CD44s與MMP-9在EMT的發(fā)病過程中可能具有協(xié)同作用，使其促血管形成及細(xì)胞間黏附作用更強(qiáng)，以此為靶點(diǎn)為EMT的治療及臨床診斷又提供了一條新途徑。

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宋美玉(1990～)女，黑龍江牡丹江人，在讀碩士研究生。

馮曉娜(1980～)女，黑龍江佳木斯人，碩士，主治醫(yī)師。E-mail：14696074@qq.com。

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