冷曉雪，田 寅，王洪勝，曹玉杰，李 壯

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤外科，黑龍江 佳木斯 154003)

SRC-3、IGF-1R在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義①

冷曉雪，田 寅，王洪勝，曹玉杰，李 壯

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤外科，黑龍江 佳木斯 154003)

目的:探索類固醇受體共激活因子3(SRC-3)、胰島素生長(zhǎng)因子-1受體(IGF-1R)在乳腺癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系及其意義。方法：用免疫組化檢測(cè)SRC-3、IGF-1R在47例乳腺癌組織及其癌旁組織中的表達(dá)情況。結(jié)果：SRC-3陽性表達(dá)率在乳腺癌組織中是66.00%,而在正常乳腺組織中是36.20%，且SRC-3在乳腺癌組織與癌旁正常乳腺組織表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，并且與乳腺癌臨床分期，組織分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)；IGF-1陽性表達(dá)率在乳腺癌中是為76.60%、在正常乳腺組織中為48.90%，且IGF-1在乳腺癌與癌旁正常乳腺組織的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，同時(shí)與乳腺癌臨床分期、組織分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)；在乳腺癌組織中SRC-3與IGF-1R之間的關(guān)系呈現(xiàn)正相關(guān)(r=0.769，P<.001)。結(jié)論：SRC-3過度表達(dá)和IGF-1R表達(dá)水平的增高在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過程中都起到重要作用。聯(lián)合檢測(cè)SRC-3及IGF-1R兩因子將有助于評(píng)估乳腺癌進(jìn)展及轉(zhuǎn)移情況,它們很可能成為乳腺癌的三級(jí)預(yù)防及尋找分子靶向治療的提供重要的參考價(jià)值。

胰島素生長(zhǎng)因子-1受體(IGF-1R)；類固醇受體共激活因子3(SRC-3)；乳腺癌；免疫組織化學(xué)

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一[1],已成為女性健康最大的威脅，每年約120萬女性患乳腺癌,而因患此病死亡的人數(shù)約50萬；乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致臨床治療失敗和患者死亡的中心環(huán)節(jié)。近年來研究表明，胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)及其受體(IGF-1R)是原癌基因與抑癌基因發(fā)揮生物活性的中心環(huán)節(jié)，是腫瘤治療的理想靶點(diǎn)；研究表明IGF-1R通過自分泌、旁分泌的方式在乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用[2]。IGF1R信號(hào)通路紊亂會(huì)導(dǎo)致很多疾病,如生長(zhǎng)缺陷、代謝障礙甚至腫瘤發(fā)生[3]。細(xì)胞核激素受體共激活劑P160包含類固醇受體輔助活化因子3(steroidreceptor-coaetivator-3，SRC-3)，又名ACTR、TRAM-1、p/CIP、RAC3[4],是p160類固醇受體輔助活化因子SRC基因家族成員，定位于人類染色體20q12[5]。SRC-3作為新定義的原癌基因，是SRC家族中唯一發(fā)現(xiàn)其基因的擴(kuò)增或蛋白過度表達(dá)與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，其過度表達(dá)可通過作用多種信號(hào)通路來啟動(dòng)或是抑制腫瘤的形成。本課題研究通過免疫組織化學(xué)方法測(cè)驗(yàn)47例乳腺癌、47例癌旁正常組織中SRC-3、IGF-1R兩因子的表達(dá)情況及其相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源

搜集在2014-07～2015-11佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科47例乳腺癌石蠟包塊。術(shù)前均未行放、化療、內(nèi)分泌治療及生物靶向治療等手段，術(shù)后病理診斷明確，上述標(biāo)本均常規(guī)制作石蠟包埋切片，切片厚4μm。根據(jù)國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC)TNM[6]分期 Ⅲ～Ⅳ期25例、Ⅰ～Ⅱ期22例。取距腫瘤邊緣大于5cm的癌旁正常組織47例。

1.2 主要試劑

SRC-3兔抗單克隆抗體、IGF-1R兔抗單克隆抗體都由北京博奧森生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，通用Elivision法試劑盒以及DAB顯色試劑都是從北京中衫金橋生物技術(shù)有限公司買入。

1.3 免疫組化

通過免疫組化方法(Elivision法)探索SRC-3、IGF-1R在乳腺癌及癌旁正常組織中的表達(dá)情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0軟件包處理。用χ2檢驗(yàn)，采用Spearman等級(jí)相關(guān)進(jìn)行相關(guān)性檢驗(yàn)分析；均以α=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1SRC-3、IGF-1R在乳腺中的表達(dá)

SRC-3在乳腺癌組織及癌旁正常組織中有表達(dá)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=9.253，P<0.05)，通過表1得出，而表達(dá)結(jié)果為66.00%，而癌旁組織為,36.2%，顯然為高表達(dá)。

正常乳腺組織區(qū)域和癌組織里IGF-1R均有表達(dá)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=11.325，P<0.05)，通過對(duì)表1的觀察得出，乳腺癌組織里的IGF-1R表達(dá)結(jié)果為76.6%，癌旁正常組織表達(dá)結(jié)果為48.9%，前者高于后者，為高表達(dá)。

表1 SRC-3和IGF-1R在乳腺癌組織和癌旁組織中表達(dá)情況

注：P<0.01

2.2 乳腺癌組織中SRC-3、IGF-1R的表達(dá)與其臨床病理特征的關(guān)系

見表2，SRC-3與乳腺癌的分化程度(χ2=9.070、P=0.11)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況(χ2=5.108、P=0.024)和臨床分期(χ2=4.305、P=0.0.038)相關(guān)，而與年齡、絕經(jīng)情況、腫瘤大小、病理類型無關(guān)(P>0.05)。IGF-1R與乳腺癌分化程度(χ2=10.319、P=0.006)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況(χ2=8.051、P=0.005)、和臨床分期(χ2=6.172、P=0.013)相關(guān)，而與年齡、絕經(jīng)情況、腫瘤大小、病理類型無關(guān)(P>0.05)。

表2 在乳腺癌不同臨床病理特征中SRC-3、IGF-1R的表達(dá)情況

病理因素例數(shù)SRC-3陽性例數(shù)χ2值P值IGF-1R陽性例數(shù)χ2值P值年齡(歲)<50140．0000．995170．0001．000≥501719絕經(jīng)情況是131．0580．304180．0001．000否1818病理類型浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌181．5500．461200．1810．914浸潤(rùn)性小葉癌1214其他癌12組織分化高149．0700．111510．3190．006中1417低34腫瘤大小(cm)≤251．8740．39243．5880．1662～5157>51118臨床分期Ⅰ～Ⅱ期104．3050．038126．1720．013Ⅲ～Ⅳ期2124淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無轉(zhuǎn)移115．1080．024138．0510．005有轉(zhuǎn)移2023

2.3 乳腺癌組織和癌旁組織中SRC-3與IGF-1R表達(dá)相關(guān)性

乳腺癌組織中SRC-3高表達(dá)，IGF-1R也是高表達(dá)，兩者呈正相關(guān)(P<0.05)，其相關(guān)系數(shù)rs=0.769；癌旁正常組織中SRC-3低表達(dá)，IGF-1R也是低表達(dá)，兩者仍呈正相關(guān)(P<0.05)，其相關(guān)系數(shù)rs=0.608，見表3。

表3 乳腺癌組織和癌旁組織中SRC-3和IGF-1R表達(dá)相關(guān)性

3 討論

胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(insulin-likegrowthfac-tor-1receptor,IGF-1R)是一種四聚體結(jié)構(gòu)(α2β2)的酪氨酸蛋白跨膜受體,由膜外2個(gè)ct亞基和膜內(nèi)2個(gè)p亞基構(gòu)成；與胰島素有70%的同源性[7],其具有潛在的有絲分裂原作用，當(dāng)它與其配體結(jié)合后,激活細(xì)胞內(nèi)的酪氨酸激酶,通過引起胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖分裂,并且促進(jìn)細(xì)胞向惡性表型轉(zhuǎn)化,此外還抑制腫瘤細(xì)胞凋亡的作用[8]。已有報(bào)道證實(shí)乳腺癌中存在IGF1R異常表達(dá)。然而,關(guān)于IGF1R表達(dá)在乳腺癌中的作用機(jī)制目前尚未達(dá)到共識(shí),其對(duì)乳腺癌預(yù)后的影響仍然存在爭(zhēng)議。

SRC-3作為新定義的原癌基因,又稱ACTR、TRAM-1[2，3]、p/CIP、RAC3[4]該基因蛋白的高表達(dá)與多種腫瘤發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。大量研究表明,SRC-3既可以對(duì)激素依賴性乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展起到關(guān)鍵作用,又可以和轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合對(duì)非激素依賴性乳腺癌發(fā)揮作用[9]不同的作用,可能通過不同的調(diào)控途徑在乳腺癌的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用。

本研究結(jié)果表明，SRC-3在乳腺癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)，并且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期及組織分級(jí)有關(guān)，這與海內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道一致。證明了過度表達(dá)的SRC-3對(duì)乳腺癌的進(jìn)展過程起到重要作用，被認(rèn)為是乳腺癌患者預(yù)后不良的標(biāo)志。在SRC-3對(duì)癌旁組織轉(zhuǎn)移以及表達(dá)方式上都能對(duì)其造成一定的影響，人們將其視為病人預(yù)后不良的結(jié)果。

本研究結(jié)果表明，在乳腺癌中SRC-3、IGF-1R之間存在正相關(guān)關(guān)系(rs=-0.5856、P<0.05)。SRC-3、IGF-1R在乳腺正常組織之間仍呈正相關(guān)(rs=-0.4840、P=0.0004)。IGF-1R是IGF信號(hào)傳導(dǎo)通路中的跨膜酪氨酸激酶受體之一，而又有文獻(xiàn)報(bào)道，SRC-3通過調(diào)控IGF信號(hào)通路中多種基因的表達(dá)，參與癌細(xì)胞的增殖和存活。因本實(shí)驗(yàn)僅細(xì)胞水平研究SRC-3、IGF-1R在乳腺癌中的表達(dá)及意義,有待從基因及蛋白質(zhì)水平進(jìn)一步研究證實(shí)。SRC-3、IGF-1R可否作為乳腺癌的診斷指標(biāo)及評(píng)估預(yù)后標(biāo)準(zhǔn)，需進(jìn)一步證實(shí)。若進(jìn)一步的研究證實(shí)了本實(shí)驗(yàn)的結(jié)論,利用技術(shù)阻斷其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,可以抑制體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的分裂增殖,阻止腫瘤細(xì)胞向惡性表型轉(zhuǎn)化。這將為乳腺癌的治療和預(yù)防提供了新的方向，大大提高了患者的生存質(zhì)量。

綜上所述，SRC-3、IGF-1R在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，SRC-3的高表達(dá)及IGF-1R的過度表達(dá)可以預(yù)測(cè)乳腺癌的轉(zhuǎn)移情況。SRC-3、IGF-1R很可能成為乳腺癌早期診斷、判斷預(yù)后的新指標(biāo)及治療的新靶點(diǎn)。

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冷曉雪(1986～)女，黑龍江綏化人，在讀碩士研究生。

李壯(1963～)男，黑龍江佳木斯人，學(xué)士，副主任醫(yī)師，碩士研究生導(dǎo)師。E-mail:453170050@qq.com。

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