洪俊，饒永彩

(1.武漢大學人民醫(yī)院檢驗科，武漢 430060；2.武漢生物制品所，武漢 430060)

·臨床檢驗技術研究·

Sysmex XN-9000血液分析儀前體白細胞通道(WPC)原始/異常淋巴細胞報警可靠性的評價

洪俊1，饒永彩2

(1.武漢大學人民醫(yī)院檢驗科，武漢 430060；2.武漢生物制品所，武漢 430060)

目的 評價Sysmex XN-9000血液分析儀(簡稱“XN-9000”)前體白細胞通道(WPC)檢測外周血觸發(fā)WBC報警的可靠性。方法 采用與手工血涂片白細胞形態(tài)鏡檢結果比對的方法，復核520例分別經(jīng)Sysmex XE-2100血液分析儀(簡稱“XE-2100”)和XN-9000檢測觸發(fā)WBC報警的標本，按報警種類統(tǒng)計判讀結果。結果 XN-9000 WPC通道的Blast(原始細胞)報警比XE-2100特異性高(χ2=6.98,P<0.05)，XN9000將假陽性率從XN2100的64%降低至36%(χ2=6.18，P<0.05)。XN-9000 WPC的Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴細胞)綜合有效率90.4%、94.4%，高于XE2100的72.2%和80.1%(χ2分別為5.6、6.33，P均<0.05)。在WPC通道自動復測模式下，在所有被檢標本 (體驗健康者和患者，包括新生兒)中，WPC通道Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報警的特異性和總有效率高于WDF(χ2=6.15、4.14、6.02、4.88，P<0.05)，降低了WDF通道誤報率；XN-9000(WDF/WPC)總報警復片率低于XE-2100(χ2=4.33，P<0.05)；而XN-9000(WDF/WPC)Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報警的復片率為32%(84/260)，低于XE-2100的41%(107/260)(χ2=4.38，P<0.05)。結論 XN-9000 WPC通道相較于XE-2100，提高了Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報警的綜合有效性，降低了誤報率和復片率，提高了臨床實驗室的工作效率。

血液分析儀；白細胞；前體白細胞通道

標本檢驗結果周轉時間(TAT)是評價臨床實驗室服務質量的重要指標[1-3]。血常規(guī)標本復片率高低直接影響TAT長短；血液分析儀白細胞報警信號是血常規(guī)標本復片的重要參考信息之一，其可靠性直接影響血常規(guī)檢驗結果TAT和臨床服務質量。XN-9000血液分析儀(Sysmex公司，以下簡稱“XN-9000”)在白細胞分類通道(WDF)基礎上增加了1個白細胞前體通道(WPC)，能對白細胞群完成較高精度的分析。XN-9000綜合了2個通道檢測結果，其白細胞報警信號的可靠性是否提高，國內(nèi)尚無相關臨床研究報道。本研究采用與手工血涂片白細胞形態(tài)鑒別與計數(shù)對比的方法評價XE-2100血液分析儀(Sysmex公司，以下簡稱“XE-2100”)和XN-9000異常白細胞報警的可靠性和有效性，并評價使用WPC通道的XN-9000能否通過降低白細胞誤報警率來減少臨床標本的復片率。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集2015年1月至2016年6月本院住院和門診患者EDTA-K2抗凝血標本520例，包括192例健康者和328例患者(包括骨髓增生異常綜合征、鐮狀細胞病、噬血細胞淋巴組織細胞增多癥、特發(fā)性血小板減少性紫癜患者接受化療或造血干細胞移植、敗血癥或腎功能衰竭、術后患者和其他類型白血病)。520例中含57例新生兒?；颊邩吮局饕糜谠u價XN-9000 WPC通道報警的有效性。

1.2 XE-2100、XN-9000檢測外周血標本白細胞數(shù)量和分類 取研究對象外周血標本，測試項目選擇“CBC”、“Diff”，XN-9000加選“WPC”。WPC分析可采用手動設定和自動復測分析[即只有WDF通道產(chǎn)生Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報警時才觸發(fā)WPC通道進行二次分析]2種模式，WPC分析后校正WDF報警，結果有3種：(1)Blast(原始細胞)；(2)Abn Lympho(疑似異常淋巴細胞)；(3)刪除初始報警。因XN-9000僅WPC通道有2種分析模式，而WDF通道只有自動分析1種分析模式，所以在評價WPC通道時將標本平均分成2組，260例為手動預先設定WPC測定，260例為WPC自動復測分析。

1.3 人工光學顯微鏡下血涂片白細胞鏡檢 由本實驗室具備形態(tài)學分析資質的檢驗技師按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》方法判讀上述血涂片2次。

1.4 統(tǒng)計學分析 用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行。率的比較用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 XE-2100和XN-9000 WDF通道WBC報警有效性 結果見表1。二者綜合有效率差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。但XN-9000 WDF通道Atypical lympho(異型淋巴細胞)報警的敏感性高于XE-2100(χ2=6.13，P<0.05)。

表1 XE-2100和XN-9000(WDF) WBC報警有效性評價

2.2 XE-2100和XN-9000 WPC通道手動預先設定摸式下WBC報警的有效性 結果見表2。XN-9000 WPC通道Blast(原始細胞)報警的特異性高于XE-2100(χ2=6.98，P<0.05)；假陽性率為36%(24/67)，低于XE-2100的64%(68/106)(χ2=6.18，P<0.05)；而假陰性和敏感性分別為0.51%(1/193)和97.5%，與XE-2100的3.2%(5/154)和89.3%差異無統(tǒng)計學意義(χ2分別為0.20、0.31，P均>0.05)。

XN-9000 WPC的Blast(原始細胞)、Abn Lympho(異常淋巴細胞)綜合有效率(90.4%和94.4%)高于XE-2100(72.2%和80.1%)(χ2別為5.6、6.33，P均<0.05)。XN-9000的Atypical lympho(異型淋巴細胞)報警均來自WDF通道，二者Atypical lympho(異型淋巴細胞)的比對結果與表1一致(P>0.05)。

表2 XE-2100和XN-9000(WPC)手動預設摸式下WBC報警有效性評價

注：*，包括Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴細胞)。

2.3 XN-9000 WPC自動復測分析模式下的WDF和WPC通道WBC報警有效性 根據(jù)XN-9000 WPC檢測原理，260例標本中有128例觸發(fā)了WPC通道自動復測分析，結果見表3。在所有被檢測標本(體檢健康人和患者，包括新生兒)中，與WDF通道相比，WPC 通道Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報警的特異性和總有效率均提高(χ2分別為6.15、4.14、6.02、4.88、5.66，P均<0.05)，WDF通道誤報率明顯降低。

表3 XN-9000 WDF通道和WPC通道自動分析模式WBC報警有效性評價

注：*，包括體檢健康者和患者；**，無真陽性標本。

2.4 復片率 按照WBC報警手工復片原則，XN-9000(WDF/WPC)總報警復片率32%(166/520)，低于XE-2100的38%(198/520)，χ2=4.33，P<0.05；而Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報警，XN-9000(WDF/WPC)的復片率32%(84/260)，低于XE-2100的復片率41%(107/260)，χ2=4.38，P<0.05。

3 討論

研究資料顯示，因血液分析儀WBC報警所致復片占總復片量的30%[4]，而儀器WBC報警中部分經(jīng)復片證實為誤報。因此，如果能提高WBC報警的準確性，將減少不必要的復片從而縮短TAT。

XN-9000分析白細胞在原有WDF通道基礎上增加了WPC通道。在自動復測模式下，當WDF通道報警時激活WPC通道以進一步分析標本，修正WDF的報警結果。WPC原理是采用WPC試劑lysercell溶解白細胞膜上脂質讓熒光染料fluorocell滲入細胞從而使細胞核DNA染色。因未成熟細胞的細胞膜(如原始細胞)比正常成熟或反應性細胞的細胞膜有更低的脂質含量，從而導致不同細胞吸收的染料和產(chǎn)生的熒光信號存在差異，使原始細胞、異常淋巴細胞和正常白細胞被分離和鑒定。此外，較以往的血液分析儀，XN-9000的WDF通道還采用了改進的溶血劑，能提高淋巴細胞和單核細胞區(qū)分能力。但這些改變在臨床上是否真正有效，目前國內(nèi)尚缺乏足夠的相關臨床資料予以證實。

本研究結果顯示，僅用XN-9000 WDF通道時XE-2100和XN-9000(WDF)Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報警的綜和有效性基本一致，見表1。而Atypical lympho(異型淋巴細胞)報警，XN-9000(WDF)的敏感性高于XE-2100近兩倍，且XN-9000(WDF)假陽性報警并沒有明顯增加；可能與XN-9000(WDF)使用了改進的溶血劑有關，與國外的相關報道一致[5-6]。

XN-9000 WPC通道手動預先設定摸式下，XN-9000 Blast(原始細胞)報警的特異性優(yōu)于XE-2100；相較于XE-2100，XN-9000 WPC假陽性減少，敏感性提高。XN-9000 WPC僅有1例Blast(原始細胞)假陰性報警，該病例后被確診為急性前體B細胞淋巴細胞性白血病(ALL)早期復發(fā)，血膜復片鏡檢可見9%小淋巴母細胞(形態(tài)與成熟淋巴細胞相似)；而XE-2100有5例假陰性。在Abn Lympho(異常淋巴細胞)報警方面，XN-9000 WPC較XE-2100也有明顯優(yōu)勢，見表2。需要說明的是，由于XE-2100不能將Abn Lympho(異常淋巴細胞)單獨從Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴細胞)單獨區(qū)分開來，而XN-9000可以。因此，二者無法真正有效對比Abn Lympho(異常淋巴細胞)報警。

根據(jù)制造商的報警定義，儀器Abn Lympho(異常淋巴細胞)報警是特指腫瘤性淋巴細胞；最近一份關于血細胞形態(tài)識別的歐洲共識報告明確指出應避免使用Abn Lympho(異常淋巴細胞)，建議在描述與正常形態(tài)有差異細胞的時應采用“atypical lymphocytes，suspect reactive”(非典型淋巴細胞疑似反應性增生)或“atypicallymphocytes，suspect neoplastic”(非典型性淋巴細胞疑似惡性增生)[7]。盡管當前關于此命名還有部分爭議，本研究認為儀器軟件細胞形態(tài)報警提示名稱應采納和接受淋巴細胞國際命名指南，以便于使報警命名更準確和科學，同時也便于國際交流。

在XN-9000 WPC的自動復測分析模式下(此種方式更貼近臨床實驗室的實際使用方式) 與自身WDF通道比較結果表明，WPC通道提高了WDF Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報警的特異性(見表3)，降低了WDF道的誤報率，且敏感性與WDF一致；在Atypical lympho(異型淋巴細胞)報警方面，二者差異雖無統(tǒng)計學意義，但WPC無論在敏感性還是在特異性上都比WDF有提高。

國外研究表明[8-9]住院新生兒外周血中含有0.5%～6%(重癥嬰幼兒的比例可能更高)的形態(tài)與淋巴母細胞十分相似的B祖細胞樣淋巴細胞(haematogone-like lymphocytes，HLL)[10]，而這種細胞極易引起血液分析儀的假陽性報警[11]。鑒于此，本研究對比分析新生兒標本的測定數(shù)據(jù)，結果與成人一樣，WPC通道Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報警特異性顯著提高(表3)，有利于嬰幼兒標本的檢測。

XE-2100和XN-9000總復片率結果顯示：XN-9000(WDF/WPC)總報警復片率低于XE-2100;而Blast/Abn Lympho(原始/異常淋巴)報警，XN-9000(WDF/WPC)的復片率低于XE-2100近9個百分點，而敏感性卻無影響，對于血常規(guī)日平均測試量近千例的大型綜合性醫(yī)院而言，其復片量減少相當可觀。

[1]黎海生，熊林怡，張鴻偉，等.急診檢驗報告周轉時間的實時監(jiān)控及持續(xù)改進[J].重慶醫(yī)學,2016,45(8):1128-1131.

[2]倪軍,黃愛軍,張燕，等.急診血常規(guī)檢測結果回報時間分析[J].臨床檢驗雜志,2013,31(2):151-152.

[3]Lou AH, Elnenaei MO, Sadek I,etal. Evaluation of the impact of a total automation system in a large core laboratory on turnaround time[J]. Clin Biochem, 2016,49(16-17):1254-1258.

[4]Novis DA, Walsh M, Wilkinson D,etal. Laboratory productivity and the rate of manual peripheral blood smear review: a College of American Pathologists Q-Probes study of 95,141 complete blood count determinations performed in 263 institutions[J]. Arch Pathol Lab Med, 2006,130(5):596-601.

[5]Seo JY, Lee ST, Kim SH. Performance evaluation of the new haematology analyser Sysmex XN-series[J]. Int J Lab Haematol,2015,37(2):155-164.

[6]Kim H, Hur M, Choi SG,etal. Performance evaluation of Sysmex XN hematology analyzer in umbilical Cord blood: a comparison study with the XE-2100[J]. Clin Chem Lab Med, 2014,52(12):1771-1779.

[7]Zini G, Bain B, Bettelheim P,etal. A European consensus report on blood cell identification: terminology utilized and morphological diagnosis concordance among 28 experts from 17 countries within the European LeukemiaNet network WP10, on behalf of the ELN Morphology Faculty[J]. Br J Haematol, 2010,151(4):359-364.

[8]van der Meer W, van Gelder W, de Keijzer R. The divergent morphological classification of variant Lymphoyctes in blood films[J]. J Clin Pathol, 2007,60(7):838-839.

[9]Alférez S, Merino A, Mujica LE,etal. Automatic classification of atypical lymphoid B cells using digital blood image processing[J]. Int J Lab Hematol, 2014,36(4):472-480.

[10]Tan B, Nava A, George T. Evaluation of the Beckman Coulter UniCel DxH 800 and Abbott Diagnostics Cell-Dyn Sapphire Haematology Analysers on pediatric and neonatal specimens at a tertiary care hospital[J]. Am J Clin Pathol, 2011,135:929-938.

[11]Duchamp M, Sterlin D, Diabate A,etal. B-cell subpopulations in children: National reference values[J]. Immun Inflamm Dis, 2014,2(3):131-140.

(本文編輯：海燕)

Reliability evaluation of the blast/abnormal lymphocyte alarm tested through white precursor cell (WPC) channel on the Sysmex XN-9000 analyzer

HONGJun1,RAOYong-cai2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,People′sHospitalofWuhanUniversity,Wuhan430060,Hubei; 2.WuhanInstituteofBiologicalProducts,Wuhan430060,Hubei,China)

Objective To evaluate the reliability of the white precursor cell (WPC) channel on the Sysmex XN-9000 hematology analyzer (XN-9000) in giving the abnormal white blood cell (WBC) alarm. Methods A total of 520 blood samples with abnormal WBC alarm from the Sysmex XE-2100 (XE-2100) and XN-9000 were performed the manual peripheral blood smear review, and their results were analyzed. Results The specificity of the XN-9000 WPC channel in the blast alarm was significantly higher than that of XE-2100 (χ2=6.98,P<0.05), while the false positive rate of the XN-9000 (36%) significantly lower than that of XE-2100 (64%,χ2=6.18,P<0.05). The overall efficiency of the XN-9000 WPC channel in identifying blasts and abnormal lymphocytes (90.4% and 94.4%) was significantly higher than that of the XE-2100 (72.2% and 80.1%,χ2=5.6 and 6.33,P<0.05). Under the automatic reflex analysis mode of WPC channel, the specificity and overall efficiency of the WPC channel in identifying blasts and abnormal lymphocytes of all the detected samples were significantly higher than those of the WDF channel (χ2=6.15, 4.14, 6.02 and 4.88,P<0.05). The total review rate of the XN-9000 (WDF/WPC) was significantly lower than that of the XE-2100 (χ2=4.33,P<0.05). Similarly, the review rate of the XN-9000 for the blast/abnormal lymphocyte alarm (84/260, 32%) was significantly lower than that of the XE-2100 (107/260, 41%) (χ2=4.38,P<0.05). Conclusion Compared with the XE-2100, the XN-9000 WPC channel can improve the overall efficiency of the blast/abnormal lymphocyte alarm, reduce the false positive rate and the review rate, and then improve the efficiency of clinical laboratories.

hematology analyzer; white blood cell; white precursor cell channel

10.13602/j.cnki.jcls.2017.02.05

洪俊，1973年生，男，副主任技師，博士，主要從事臨床免疫及血液學研究。

R446

A

2016-12-26)