韓曉偉 周建堯 侯韜 趙建治 朱俊嶺 孫維棟

原發(fā)型干燥綜合征繼發(fā)間質性肺炎患者的血清IL-6 IL-10表達水平分析

韓曉偉 周建堯 侯韜 趙建治 朱俊嶺 孫維棟

目的 檢測原發(fā)型干燥綜合征（pSS）繼發(fā)間質性肺炎患者血清炎癥因子的表達水平，探討其與病程發(fā)生發(fā)展的關系。方法 選取2010年4月至2015年3月間61例pSS患者為觀察對象，按照其是否繼發(fā)間質性肺炎分為觀察組和對照組，收集28例健康體檢者為正常對照組。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定患者血清中IL-6及IL-10水平，并行IL-6與IL-10水平的相關性分析。結果 觀察組和對照組患者的血清IL-6水平顯著高于正常對照組，IL-10水平顯著低于正常對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；觀察組患者血清IL-6水平顯著低于對照組（P＜0.05），血清IL-10水平雖高于對照組，但組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。觀察組與對照組血清IL-6與IL-10表達水平呈負相關（r=-0.492，-0.623，P＜0.05）；正常對照組血清IL-6與IL-10表達水平無明顯相關性（r=0.191，P＞0.05）。結論 pSS繼發(fā)間質性肺炎患者血清中IL-6水平較對照組明顯上調，IL-10有所下降，提示二者均參與患者繼發(fā)間質性肺炎的病變病理過程，影響肺彌散功能，可以作為該病診斷和治療的輔助指標。

原發(fā)型干燥綜合征 間質性肺炎 炎癥因子

原發(fā)性干燥綜合征（Primary Sjogren's Syndrome，pSS）屬于女性多發(fā)的慢性系統(tǒng)性自身免疫疾病，破壞患者唾液腺、淚腺等外分泌腺體的腺上皮細胞，是具有高度淋巴細胞浸潤特征的上皮炎性疾病，臨床除以口、眼干燥作為主要表現(xiàn)外，還存在其它系統(tǒng)器官受累等諸多表現(xiàn)［1］。據相關調查統(tǒng)計我國人群中患病率已經接近0.8%，老年人群中的發(fā)病率約為5%左右，其中肺間質病變（ILD）是原發(fā)性干燥綜合征預后的重要臨床指標之一，間質性肺炎的發(fā)病率更是接近75%［2］，臨床致死率較高，應及早進行診斷治療。本資料意在探究IL-6、IL-10在原發(fā)性干燥綜合征繼發(fā)間質性肺炎患者血清中的表達差異，及與病程發(fā)生發(fā)展的關系，現(xiàn)將結果報道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選取2010年4月至2015年3月間于本院新確診且住院治療的61例pSS患者為觀察對象，其中男18例，女43例；年齡34～66歲。按照其是否繼發(fā)間質性肺炎分為觀察組（29例）和對照組（32例）。另納入28例健康體檢者為正常組，其中男13例，女15例，年齡35～62歲。所有患者符合2012年美國風濕病學會干燥綜合征分類（診斷）標準［3］，并符合2002年美國胸科協(xié)會/歐洲呼吸協(xié)會（ATS/ERS）提出的間質性肺疾?。↖LD）的診斷標準［4］，同時重疊有機化性肺炎的非特異性間質性肺炎按照間質性肺疾病分類［5］。主動排除有長期吸煙史，有嚴重肝腎疾病、各種內分泌代謝性疾病、其他呼吸道病史或自身免疫性疾病的患者。所有受試者在年齡、性別及其他相關因素方面差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），并均對本次研究知情且同意，簽訂知情同意書，本研究經醫(yī)院倫理委員會批準通過。

1.2 方法 血清IL-6與IL-10 ELISA檢測試劑盒貨號分別為E-EL-H0102c和E-EL-H0103c（美國 R&D公司），全自動生化分析儀（日本日立公司，766-020型），檢測與操作步驟嚴格按照說明書進行。所有患者均在接受藥物治療前，清晨空腹采集外周靜脈血4ml，室溫靜置2h或4℃過夜后于1000g離心20min，取血清分裝于EP管中，凍存于-80℃樣本庫保存。同時收集健康志愿者的外周血血清按上述步驟執(zhí)行。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件。計量資料以（x±s）的形式表示，組間差異比較采用獨立樣本t檢驗，相關性分析采用Pearson相關分析方法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 三組血清IL-6、IL-10表達水平 見表1。

表1 三組血清IL-6、IL-10表達水平比較［μg/L，（x±s）］

2.2 三組血清IL-6與IL-10相關性分析 觀察組與對照組血清IL-6與IL-10表達水平呈負相關（r=-0.492，-0.623，P＜0.05）；正常對照組血清IL-6與IL-10表達水平無明顯相關性（r=0.191，P＞0.05）。

3 討論

pSS屬于彌散性結締組織疾病中的一種，極易繼發(fā)肺臟受累，如何對pSS合并間質性肺病進行有效的診斷和治療仍是目前臨床中較為棘手的問題，探究相關細胞因子在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用，無疑是實現(xiàn)早期診斷和盡快治療的必然選擇。IL-6和IL-10是細胞因子中具有典型意義的促炎因子和抑炎因子，其中IL-6可以影響B(tài)細胞的增殖活化，是誘導其產生抗體的必需因子，對粒細胞的分化及殺傷細胞對腫瘤細胞的殺傷作用均有影響，又被稱為前炎癥細胞因子。IL-10則是通過誘導T 細胞由Th1向Th2轉化，抑制抗原提呈細胞的功能，抑制血管細胞粘附分子1的表達，減少單核細胞向內皮細胞粘附，阻止淋巴細胞進入處于炎癥狀態(tài)的因子［6］。

本資料結果顯示，相對于正常人群觀察組和對照組患者的血清IL-6水平顯著升高，且觀察組血清IL-6水平顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），由此可以看出，IL-6在pSS合并間質性肺炎病變中存在異常表達，且與疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關。分析原因應該與IL-6分化為炎癥性Th17 細胞，影響Th17 / Treg 的平衡密切相關。此外觀察組和對照組患者血清IL-10水平顯著低于正常對照組，且觀察組血清IL-10水平顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），提示其與疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關，這與劉健等［7］的研究結果相一致，分析原因應該與患者B細胞活化因子水平下降密切相關。

相關性分析顯示，觀察組與對照組血清IL-6與IL-10表達水平呈負相關（r=-0.492，-0.623，P＜0.05）；正常對照組血清IL-6與IL-10表達水平無明顯相關性（r=0.191，P＞0.05）。由此可以看出血清IL-6水平的上升和IL-10水平的下降是干燥綜合征繼發(fā)間質性肺炎患者出現(xiàn)進一步自身免疫紊亂的主要因素，且二者之間有著密切的相關性。當炎癥因子的水平出現(xiàn)變化時，患者的自身免疫耐受被打破，繼而出現(xiàn)小氣道及周圍支氣管上皮的淋巴細胞浸潤致肺組織損害，最終導致肺功能的降低［8］。

綜上所述，IL-6和IL-10參與了干燥綜合征繼發(fā)間質性肺炎的發(fā)生與發(fā)展，可以作為該病重要生物標志物，通過檢測其變化，達到協(xié)助臨床診斷和盡早治療的作用。值得注意的是，由于實驗條件的限制，目前對于這兩種炎癥因子發(fā)揮生物效應及具體的中間環(huán)節(jié)了解尚不清楚，未來應該加以深入的探究和案例分析。

［1］ 盧冬梅, 于碧磬, 楊曉紅. 原發(fā)型干燥綜合征并間質性肺疾病臨床分析. 新疆醫(yī)科大學學報, 2015, 38(8):984-990.

［2］ 于杰, 王曉東, 慈春增, 等. BAFF, IL-10在干燥綜合征患者血清中的表達及其意義. 濰坊醫(yī)學院學報, 2015, 37(3):217-219.

［3］ Ruffilli I. Sjogren's syndrome and chemokines. Clin Ter, 2014, 165(6) : e464-e469.

［4］ Zhang R, Sun T, Song L, et al. Increased levels of serum galectin-3 in patients with primary Sjogren's syndrome: associated with interstitial lung disease. Cytokine, 2014, 69(2):289-293.

［5］ 韓丹, 史麗璞, 劉志隊. IL-6和IL-17在干燥綜合征患者外周血中的表達及臨床意義. 中國傷殘學, 2014, 22(2):37-38.

［6］ 許滿秀,錢先.干燥綜合征相關性細胞因子.細胞與分子免疫學雜志, 2014, 30(2):206-208.

［7］ 劉健,萬磊,章平衡,等.干燥綜合征患者肺功能變化及其輔助性T細胞失衡的相關性.中國臨床保健雜志, 2015, 18(2):187-190.

［8］ 金莉, 厲小梅. 趨化因子及其受體在干燥綜合征中的作用. 中華臨床免疫和變態(tài)反應雜志, 2012, 6(2):131-134.

Objective To investigate the serum inflammatory cytokines expression level，and explore its relationship with the occurrence and development of course of the disease，in patients with the Primary Sjogren's Syndrome（pSS）secondary to the interstitial pneumonia. Methods 61 patientsbetween April 2010 to March 2015 were enrolled，with pSS as observation object，they were divided into control group and observation group according to whether they are secondary to the interstitial pneumonia，28 cases from health physical examination were collected for the normal control group. By using enzyme-linked immunosorbent（ELISA）in patients with serum level of IL-6 and IL-10，parallel IL-6 and IL-10 level of correlation analysis. Results The observation group and control group in patients with significantly higher than that of normal control group，serum levels of IL-6，IL-10 level was significantly lower than normal control group，the difference was statistically significant（P＜0.05）；Observation group of patients serum IL-6 were significantly lower than the control group（P＜0.05），serum IL-10 level is higher than the control group，but there was no statistically significant difference compare between groups（P＞0.05）.Observation group and control group of serum IL-6 and IL-10 expression levels showed a negative correlation（r=-0.492，-0.623，P＜0.05）；Normal control group of serum IL-6 and IL-10 expression level no obvious correlation（r=0.191，P＞ 0.05）. Conclusions The serum level of IL-6 rises obviously while IL-10 declines，in PSS secondary interstitial pneumonia patients，showing that both participate in patients with secondary lesions pathologic process of interstitial pneumonia andaffect pulmonary diffusion function，thus can be used as auxiliary indexes in diagnosis and treatment of the disease.

Primary Sjogren's Syndrome Interstitial pneumonia Inflammatory cytokines

312030 浙江省紹興市中心醫(yī)院風濕血液科