李卓澄 吳軍

骶管注射β-丙氨酸對(duì)腰椎間盤突出癥模型大鼠的行為學(xué)影響

李卓澄 吳軍

目的 觀察β-丙氨酸對(duì)腰椎間盤突出癥模型大鼠的行為學(xué)影響。方法 SD大鼠48只，隨機(jī)分為β-丙氨酸15 μg組（A組）、β-丙氨酸30 μg組（B組）、腰椎間盤突出癥組（C組），每組16只。各組建立腰椎間盤突出癥模型。A組和B組于術(shù)后第4～14 d分別經(jīng)骶管注射β-丙氨酸15 μg/（kg·d）、30 μg/（kg·d），C組不做其他處理。各組分別于術(shù)前1 d及術(shù)后2、5、7、14 d測(cè)量每組大鼠的機(jī)械性縮足反射閾值（MWT）和熱縮腿潛伏期（TWL）。結(jié)果 A組和B組在術(shù)后5～14 d時(shí)TWL和MWT高于C組。與A組相比，B組在術(shù)后5～14 d時(shí)TWL和MWT增大。結(jié)論 β-丙氨酸對(duì)腰椎間盤突出癥引起的神經(jīng)源性疼痛具有劑量依賴性的鎮(zhèn)痛作用。

β-丙氨酸；腰椎間盤突出癥模型；骶管注射；行為學(xué)

腰椎間盤突出癥（LIDH）為臨床常見病，易反復(fù)發(fā)作[1]。腰椎間盤突出癥所致的腰腿痛嚴(yán)重影響著人們的生活，因此緩解腰椎間盤突出患者的疼痛已經(jīng)成為臨床醫(yī)生迫在眉睫需要解決的問題。目前仍然認(rèn)為非手術(shù)療法是該病的首選療法，骶管注射療法因操作簡(jiǎn)單、療效確切等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于該病治療，但由于現(xiàn)存藥物的潛在副作用限制了該療法的普及和推廣[2-3]。近年來隨著國(guó)內(nèi)外專家的不斷探索和研究，人們對(duì)脊髓背角膠質(zhì)區(qū)的認(rèn)識(shí)也不斷深入。甘氨酸屬于抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，是脊髓抑制路徑的主要組成。在脊髓中甘氨酸受體高水平表達(dá)，甘氨酸受體介導(dǎo)的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)傳遞在中樞脊髓痛覺信號(hào)處理中具有重要作用[4]。近期研究表明β-丙氨酸作為甘氨酸的類似物也參與了傷害感受傳遞的調(diào)節(jié)。為此，本實(shí)驗(yàn)通過觀察β-丙氨酸對(duì)神經(jīng)損傷后大鼠熱痛覺和機(jī)械痛覺反應(yīng)的影響，進(jìn)而推測(cè)β-丙氨酸對(duì)傷害性刺激的影響。為以脊髓背角膠質(zhì)區(qū)作為靶點(diǎn)開辟神經(jīng)鎮(zhèn)痛藥物治療的新方法提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

SD大鼠，6～8周齡，雄性，體重180～200 g；β-丙氨酸，PE－0503導(dǎo)管、熱疼痛測(cè)試儀、Von Frey測(cè)試探針。

1.2 動(dòng)物模型分組

SD大鼠，6～8周齡，雄性，體重180～200 g，適應(yīng)環(huán)境1周后，隨機(jī)分為3組∶ β-丙氨酸15 μg組（A組）、β-丙氨酸30 μg組（B組）、腰椎間盤突出癥組（C組），每組16只。

1.3 模型制作及給藥

以10%水合氯醛腹腔注射麻醉（3.5 ml/kg）后，以L5棘突為中心取背部正中縱行切口，依次切開分離各組織層，并咬除L4、L5棘突及右側(cè)椎板、關(guān)節(jié)突和部分椎弓根等，顯露右側(cè)硬脊膜及右側(cè)神經(jīng)根神經(jīng)節(jié)，采用絲線環(huán)扎L4、L5神經(jīng)根，松緊度適宜。接著在鼠尾近根部縱行切開，分離顯露2個(gè)椎間隙，橫向切開纖維環(huán)取出髓核組織（約0.4 mg）移植到右側(cè)L4、L5神經(jīng)節(jié)周圍，每個(gè)神經(jīng)節(jié)周圍移植2個(gè)椎間盤的髓核組織。將PE－0503導(dǎo)管一端8 mm處打結(jié)，從L5半椎管切除處向頭側(cè)置入硬膜外腔約4 mm用絲線固定，另一端經(jīng)皮下隧道引到大鼠兩耳間，封管固定。造模大鼠于術(shù)后1～2 h清醒，未出現(xiàn)死亡，其創(chuàng)口在6～8 d愈合，未見感染征象。A組和B組分別于術(shù)后第4 d開始鞘內(nèi)注射β-丙氨酸15 μg/kg和β-丙氨酸30 μg/kg，直至第14 d；C組不做其他處理。

1.4 行為學(xué)指標(biāo)測(cè)定

分別于術(shù)前1 d 及術(shù)后2、5、7 、14 d每天12∶ 00—14∶ 00測(cè)定熱痛縮爪潛伏期和機(jī)械縮足反射閾值。熱縮足反射潛伏期（TWL）∶ 將大鼠放在儀器的透明隔斷箱里，隔斷底板為宜導(dǎo)熱良好的玻璃，動(dòng)物在隔斷上可以自由活動(dòng)，儀器熱源的強(qiáng)度為20%，測(cè)定時(shí)間上限為30 s，待動(dòng)物適應(yīng)環(huán)境安靜后，將熱源對(duì)準(zhǔn)大鼠損傷后肢底部的的玻璃，啟動(dòng)儀器加熱，大鼠因?yàn)樽茻峄蚩s足離開時(shí)，儀器自動(dòng)記錄自加熱至縮足的時(shí)間，即為熱痛閾。機(jī)械縮足反射的測(cè)定（MWT）∶ 大鼠置于透明有機(jī)玻璃箱內(nèi)適應(yīng)環(huán)境安靜后，儀器觸針對(duì)準(zhǔn)大鼠損傷后肢后跟或足部外側(cè)，啟動(dòng)儀器，儀器自動(dòng)記錄大鼠受刺激后縮足或離開觸針的刺激強(qiáng)度值，即為機(jī)械縮足反射閾值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 坐骨神經(jīng)結(jié)扎后大鼠熱縮足反射閾值的變化

結(jié)果顯示，各組間在術(shù)前1 d和術(shù)后2 d TWL差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。3組在術(shù)后 5～14 d TWL差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中A組與B組高于C組（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且與A組相比，B組在術(shù)后5～14 d TWL增大，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 坐骨神經(jīng)結(jié)扎后大鼠機(jī)械縮足反射閾值的變化

結(jié)果顯示，各組間在術(shù)前1 d和術(shù)后2 d MWT差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。3組在術(shù)后5～14 d MWT差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中A組與B組高于C組（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且與A組相比，B組在術(shù)后5～14 d MWT增大，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

疼痛是機(jī)體對(duì)外界傷害性刺激產(chǎn)生的應(yīng)答反應(yīng)，作為腰椎間盤突出癥的最常見癥狀，一直是困擾腰椎間盤突出患者的頑疾。因此，如何減輕疼痛、提高患者的生活質(zhì)量已經(jīng)成為臨床醫(yī)生迫切需要解決的問題。本研究取SD大鼠尾部椎間盤組織，移植到L5背根神經(jīng)節(jié)處，直接壓迫神經(jīng)根，能夠更理想的模擬腰間盤突出癥的病理發(fā)展過程[5]。骶管注射療法用于治療腰椎間盤突出癥已經(jīng)有相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)間并且其療效得到普遍認(rèn)可，但由于現(xiàn)在常用藥物的潛在副作用，臨床用藥的選擇已經(jīng)成為困擾臨床醫(yī)生的一大難點(diǎn)。

脊髓后角第二層膠狀質(zhì)細(xì)胞（Substantia gelatinosa，SG），是腦內(nèi)下行抑制系統(tǒng)的投射部位和調(diào)控外周傷害性信息的鎮(zhèn)痛局部環(huán)路所在[6]。脊髓背角是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)痛覺信息整合加工的重要部位，是感覺信息傳入的門戶和整合的初級(jí)中樞。因此，抑制這一特殊部位的痛覺信息傳遞是鎮(zhèn)痛的關(guān)鍵。甘氨酸是哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，其受體介導(dǎo)的抑制性神經(jīng)的遞質(zhì)在中樞脊髓痛覺信號(hào)處理中發(fā)揮著重要的作用。β-丙氨酸作為甘氨酸的結(jié)構(gòu)類似物，而甘氨酸又在疼痛的脊髓抑制通路中扮演重要角色。那么我們推測(cè)β-丙氨酸也可能會(huì)參與調(diào)節(jié)痛覺的傳輸。

機(jī)械痛閾及熱痛閾在因腰椎間盤突出癥引起的坐骨神經(jīng)痛中是一項(xiàng)可靠的檢測(cè)其穩(wěn)定性的持續(xù)指標(biāo)[7]。研究結(jié)果顯示，各組間在術(shù)前1 d和術(shù)后2 d TWL和MWL差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而在術(shù)后第4 d開始給藥后，于術(shù)后5～14 d開始測(cè)量TWL和MWL出現(xiàn)差異。與C組比較，A組和B組的TWL和MWL延長(zhǎng)，而與A組比較B組的TWL和MWL也出現(xiàn)延長(zhǎng)。由此證實(shí)了之前推測(cè)，β-丙氨酸可能是治療腰椎間盤突出癥引起的神經(jīng)性疼痛的一種有效藥物[8]，并且具有劑量依賴性的鎮(zhèn)痛作用。這一發(fā)現(xiàn)為臨床治療腰間盤突出癥尋找新的鎮(zhèn)痛藥物提供了理論基礎(chǔ)。

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綜述的格式和寫法

綜述一般都包括題名、著者、摘要、關(guān)鍵詞、正文、參考文獻(xiàn)幾部分。其中正文部分又由前言、主體和總結(jié)組成。前言用 200～300 字的篇幅，提出問題，包括寫作目的、意義和作用，綜述問題的歷史、資料來源、現(xiàn)狀和發(fā)展動(dòng)態(tài)，有關(guān)概念和定義，選擇這一專題的目的和動(dòng)機(jī)、應(yīng)用價(jià)值和實(shí)踐意義，如果屬于爭(zhēng)論性課題，要指明爭(zhēng)論的焦點(diǎn)所在。主體主要包括論據(jù)和論證。通過提出問題、分析問題和解決問題，比較各種觀點(diǎn)的異同點(diǎn)及其理論根據(jù)，從而反映作者的見解。為把問題說得明白透徹，可分為若干個(gè)小標(biāo)題分述。

Effect of β-alanine on the Model of Lumber Disc Herniation of Rats Behavior Inf l uence

LI Zhuocheng WU Jun Anesthesiology Department, Heilongjiang Provincial Hospital, Harbin Heilongjiang 150036, China

Objective To observe the effect of β-alanine on the behavior of rats with lumber disc herniation (LIDH). Methods 48 rats were randomly divided into 3 groups, β-alanine 15 μg group (A group),β-alanine 30μg group (B group), LIDH group (C group). Lumbar disc herniation model was established in each group, from 4 to 14 day after operation, A group and B group were injected respectively with β-alanine 15 μg/(kg?d)、30 μg/(kg?d) into sacral canal.T he C group had no treatment. Respectively in preoperative 1day and postoperative 2, 5, 7, 14 day measuring rats mechanical withdrawal threshold (MWT) and withdrawal latency (TWL). Results The TWL and MWT in A group and B group were significantly higher than those in C group after operation from 5 to 14 day, Compared with A group, the TWL and MWT of B group increased significantly from 5 to 14 day. Conclusion β-alanine has dosage dependence analgesic effect on neurogenic pain caused by lumbar disc herniation.

β-alanine; lumbar disc herniation model; sacral canal injection; behavior

R-33

A

1674-9316（2017）04-0136-03

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．04．085

黑龍江省醫(yī)院麻醉科，黑龍江 哈爾濱 150036

吳軍，E-mail: 983010815@qq．com