黑占財(cái) 楊繼元 王淑琴 董 偉 沈艷麗

(1.西寧市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,青海西寧 810000; 2.青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,青海西寧 810000)

豬多種疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射安全性試驗(yàn)

黑占財(cái)1楊繼元1王淑琴1董 偉1沈艷麗2

(1.西寧市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,青海西寧 810000; 2.青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,青海西寧 810000)

在生豬養(yǎng)殖實(shí)踐中，動(dòng)物防疫工作至關(guān)重要，是預(yù)防傳染病、健康生態(tài)養(yǎng)豬的前提保障。多種疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射，豬群獲得免疫效力如何?安全性如何?本試驗(yàn)選擇120頭40～60日齡仔豬，分四組同時(shí)注射3種疫苗后，檢測(cè)免疫抗體效價(jià)情況。試驗(yàn)結(jié)果表明：豬多種疫苗同時(shí)免疫注射的免疫試驗(yàn)安全，而且抗體效價(jià)是較高的。不僅減少多次接種的免疫應(yīng)激，同時(shí)能有效提升免疫質(zhì)量。

多種疫苗 豬 安全性試驗(yàn)

隨著生豬產(chǎn)業(yè)規(guī)模化、集約化、工廠化發(fā)展，高密度飼養(yǎng)使豬病危害性越來(lái)越大，直接影響?zhàn)B殖效益和食肉安全。而在科學(xué)預(yù)防生豬疫病的各項(xiàng)措施中，接種疫苗在預(yù)防動(dòng)物傳染病方面起著越來(lái)越重要的作用。免疫工作要求嚴(yán)格規(guī)范，技術(shù)精湛，劑量準(zhǔn)確，而且，接種后安全性要高。尤其，目前疫病種類增多，需要接種疫苗的種類也繁多。作為動(dòng)物防疫工作者，研究安全、高效的免疫接種法是勢(shì)在必行之事。

1 試驗(yàn)材料和方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)豬只來(lái)自西寧市湟中縣攔隆口鑫隆養(yǎng)殖場(chǎng)，試驗(yàn)豬只共120頭，40～60日齡，健康，未經(jīng)免疫的仔豬。

1.2 接種疫苗

口蹄疫O型滅活苗，生產(chǎn)批號(hào)1408006，系中農(nóng)威特生物科技股份有限公司生產(chǎn)；豬瘟活疫苗（脾淋組織苗），生產(chǎn)批號(hào)2014015，系中牧實(shí)業(yè)股份有限公司成都精華藥械廠生產(chǎn)；豬繁殖與呼吸綜合征滅活苗，生產(chǎn)批號(hào)20140211，系浙江杭州優(yōu)幫生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 免疫接種

（1）接種分組：將120頭仔豬，隨機(jī)分成4組，每組30頭。第一組30頭，注射O型口蹄疫滅活疫苗，第二組30頭，注射豬瘟活疫苗，第三組30頭，注射豬繁殖與呼吸綜合征滅活苗，第四組同時(shí)分點(diǎn)注射O型口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征三種疫苗。

（2）接種部位與劑量：?jiǎn)谓M疫苗免疫，注射部位為左右頸部。三種疫苗同時(shí)分點(diǎn)免疫，注射部位為左右頸部和腿部?jī)?nèi)側(cè)。免疫劑量：口蹄疫疫苗1 ml/頭，豬瘟疫苗1頭份/頭，豬繁殖與呼吸綜合征滅活苗2ml/頭。

1.3.2 免疫抗體檢測(cè)

分別于免疫后14d、21d、28d、43d、經(jīng)前腔靜脈采血，分離血清，用于抗體檢測(cè)。O型口蹄疫抗體檢測(cè)：采用液相阻斷ELISA（LpB-ELISA）方法，具體操作參照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。判定標(biāo)準(zhǔn)：豬血清抗體滴度≥1∶64，則判定被檢血清O型口蹄疫抗體合格；抗體滴度＜1∶64，則判定被檢血清O型口蹄疫抗體不合格。豬瘟抗體檢測(cè)：采用間接血凝方法檢測(cè)，具體操作參照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。判定標(biāo)準(zhǔn)：抗體效價(jià)≥1∶32，則判定被檢血清豬瘟抗體合格；抗體效價(jià)＜1∶32，則判定被檢血清豬瘟抗體不合格。豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測(cè)：采用ELISA方法，具體操作參照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。判定標(biāo)準(zhǔn)：S/P值≥0.4，判定被檢血清豬繁殖與呼吸綜合征抗體合格，S/P值＜0.4，則判定被檢血清豬繁殖與呼吸綜合征抗體不合格。

1.3.3 免疫抗體檢測(cè)試劑

O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA試劑盒，批號(hào)2014120901-3，購(gòu)自蘭州獸醫(yī)研究所；豬瘟正向間接血凝診斷液及陽(yáng)性血清，批號(hào)140401，購(gòu)自蘭州獸醫(yī)研究所；豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測(cè)試劑盒（ELISA），批號(hào)20140311，購(gòu)自深圳市康百得生物科技有限公司。

1.3.4 臨床不良反應(yīng)觀察

所有試驗(yàn)豬在免疫注射后臨床觀察7～10d，主要觀察豬只精神狀況是否良好，采食是否正常，體溫有無(wú)升高，是否有其他嚴(yán)重不良反應(yīng)等。

1.3.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

檢測(cè)數(shù)據(jù)按接種疫苗的種類進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)，豬口蹄疫和豬瘟抗體以Log10的對(duì)數(shù)進(jìn)行分析比較，豬繁殖與呼吸綜合征抗體以陽(yáng)性率表示。

2 結(jié)果

2.1 口蹄疫抗體產(chǎn)生情況（見表1和圖1）

表1 口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果（抗體滴度用log10表示）

圖1 口蹄疫抗體檢測(cè)曲線圖

從表1和圖1可以看出，第一組和第四組在14d和21d時(shí)，抗體水平達(dá)到最高值，但維持時(shí)間不長(zhǎng)，第28d時(shí)已開始下降，第四組抗體值高于第一組。

2.2 豬瘟抗體產(chǎn)生情況（見表2和圖2）

表2 豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果（抗體滴度用log10表示）