周競(jìng)奇

(濟(jì)源市人民醫(yī)院，河南 濟(jì)源 459000)

子宮內(nèi)膜癌中P53、Ki-67和CA125的表達(dá)

周競(jìng)奇

(濟(jì)源市人民醫(yī)院，河南 濟(jì)源 459000)

目的 探討子宮內(nèi)膜癌組織中P53、Ki-67和血清中CA125的表達(dá)及其臨床意義。方法 采用免疫組化染色檢測(cè)35例子宮內(nèi)膜癌(試驗(yàn)組)和30例子宮內(nèi)膜增生(對(duì)照組)組織中P53和Ki-67蛋白表達(dá)情況，并采用放射免疫法測(cè)定2組患者血清中CA125水平。結(jié)果 P53蛋白在試驗(yàn)組有22例呈陽(yáng)性表達(dá)，Ki-67蛋白有24例呈陽(yáng)性表達(dá)，且兩者在對(duì)照組均呈陰性表達(dá)(P<0.05)。血清CA125水平在試驗(yàn)組為(32.19±12.35) u·L-1，高于對(duì)照組的(8.23±2.58)u·L-1(P<0.05)。結(jié)論 P53、Ki-67和CA125在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展中起著重要的作用，三者聯(lián)合檢測(cè)不但可以指導(dǎo)臨床治療，同時(shí)也可用于觀察療效和判斷預(yù)后。

子宮內(nèi)膜癌；P53；CA125；Ki-67；免疫組化染色

子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率占女性惡性腫瘤的7%，是常見(jiàn)的婦科腫惡性腫瘤。近年來(lái)，全球子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率不斷上升，已超過(guò)了宮頸癌的發(fā)病率，位居?jì)D科惡性腫瘤的第2位，且呈現(xiàn)年輕化趨勢(shì)[1]。臨床上多數(shù)患者就診時(shí)其病變尚局限于子宮內(nèi)，所以預(yù)后尚可，5 a總體生存率較高，約84%，但疾病一旦進(jìn)展進(jìn)入晚期，則預(yù)后不良，特別是處于Ⅱ～Ⅲ期的患者，5 a生存率顯著下降，約為50%[2]。因子宮內(nèi)膜癌臨床治愈率改善不明顯，目前仍有約20%的患者復(fù)發(fā)且預(yù)后不良。如何高效選擇典型病例，準(zhǔn)確、全面判斷預(yù)后，從而盡早制定出有價(jià)值的治療方案一直是臨床專家們的研究熱點(diǎn)。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是多因素、多基因共同作用的復(fù)雜過(guò)程[3]。p53基因發(fā)生突變時(shí)，則會(huì)演變成為促癌基因，并與腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)[4]。Ki-67是一種與細(xì)胞增殖密切相關(guān)的細(xì)胞核抗原，可以反映腫瘤細(xì)胞增殖活性的指標(biāo)[5]。CA125被廣泛應(yīng)用于人類各種腫瘤的研究中，如子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌等。本研究采用免疫組化檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌患者組織中P53、Ki-67的表達(dá)情況，用放射免疫法檢測(cè)其血清CA125水平，探討三者檢測(cè)在子宮內(nèi)膜癌中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2014年10月至2015年4月在我院接受治療的子宮內(nèi)膜癌患者35例為試驗(yàn)組，年齡48～62歲，根據(jù)分段診刮病理檢查已確診為子宮內(nèi)膜癌。另選同期住院的子宮內(nèi)膜增生患者30例為對(duì)照組，年齡42～58歲，且已經(jīng)分段診刮病理檢查確診。2組患者間年齡、職業(yè)、學(xué)歷、生活習(xí)慣比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。所有患者肝、腎功能正常，無(wú)心腦血管疾病、無(wú)糖尿病、無(wú)煙酒史，且近4個(gè)月內(nèi)未服用過(guò)激素類藥物。

1.2 檢測(cè)方法 采用免疫組化染色的方法檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌組織和子宮內(nèi)膜增生組織中P53、Ki-67的表達(dá)情況。選取2組患者的空腹肘靜脈血3 mL，離心后置于-40 ℃冰箱保存?zhèn)溆?，采用放射免疫法測(cè)定患者血清CA125水平。

1.3 結(jié)果判定 P53、Ki-67陽(yáng)性染色為棕黃色顆粒，均定位于腫瘤細(xì)胞核。將染色強(qiáng)度分為5個(gè)等級(jí)，(-)：未見(jiàn)陽(yáng)性染色細(xì)胞；(+)：陽(yáng)性染色細(xì)胞<10%或有輕度核淡染；(++)：10%～<30%細(xì)胞染色陽(yáng)性；(+++)：30%～<70%細(xì)胞染色陽(yáng)性；(++++)：70%～100%細(xì)胞染色陽(yáng)性。

2 結(jié)果

2.1 2組P53表達(dá)比較 試驗(yàn)組患者P53的陽(yáng)性表達(dá)率為62.9%，共22例染色為陽(yáng)性，其中5例為(+)、10例為(++)、3例為(+++)、4例為(++++)；對(duì)照組陽(yáng)性表達(dá)率為0.0%，未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)病例，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 2組P53表達(dá)比較 n(%)

2.2 2組Ki-67表達(dá)比較 試驗(yàn)組患者Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)率為68.6%，共24例染色為陽(yáng)性，其中6例為(+)、12例為(++)、3例為(+++)、3例為(++++)；對(duì)照組陽(yáng)性表達(dá)率為0.0%，未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)病例，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 2組Ki-67表達(dá)比較 n(%)

2.3 2組CA125水平比較 血清CA125水平在試驗(yàn)組為(32.19±12.35)u·L-1，對(duì)照組為(8.23±2.58)u·L-1，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 2組CA125水平比較 u·L-1

3 討論

3.1 P53蛋白在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及其意義 1979年Linzer等[6]在研究DNA病毒SV40轉(zhuǎn)染的哺乳動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)了一種抑癌基因P53，其與SV40大T抗原結(jié)合。由于新發(fā)現(xiàn)的蛋白相對(duì)分子質(zhì)量為53 000，因此命名為P53。在人體內(nèi)P53基因全長(zhǎng)20 kb，包含10個(gè)內(nèi)含子和11個(gè)外顯子，位于17p13，可轉(zhuǎn)錄2.2～2.5 kb的mRNA[7]。P53分為野生和突變型，正常生理情況下，P53以野生型存在，是細(xì)胞生長(zhǎng)的“監(jiān)控器”，可以防止細(xì)胞發(fā)生癌變，維持低水平狀態(tài)，不發(fā)揮作用。多數(shù)情況下P53基因突變后會(huì)演變成為促癌基因，失去正常抑癌基因的生物學(xué)功能，喪失了抑癌活性，其突變發(fā)生部位為中央核心區(qū)域的突變熱點(diǎn)處[8]。研究發(fā)現(xiàn)在多數(shù)Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌中，P53出現(xiàn)過(guò)量表達(dá)，因此，可以將P53作為Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌的標(biāo)志物[9]。但在Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌中，也出現(xiàn)了P53的陽(yáng)性表達(dá)。有研究顯示，Ⅲ級(jí)Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌患者P53的陽(yáng)性表達(dá)率25%～69%，而低級(jí)別Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌患P53的陽(yáng)性表達(dá)率為14%～25%[10]。P53蛋白可以抑制惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，因此P53蛋白失活在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起著重要的作用。約50%的人類腫瘤中，存在有P53基因的突變，P53突變會(huì)造成嚴(yán)重的后果，引起細(xì)胞無(wú)限性增殖，當(dāng)細(xì)胞暴露于不利環(huán)境條件下時(shí)，包括DNA損傷，P53能通過(guò)2條途徑發(fā)揮腫瘤抑制作用：誘導(dǎo)細(xì)胞的衰老凋亡和導(dǎo)致細(xì)胞周期阻滯[11]。另外P53可調(diào)控細(xì)胞的黏著、細(xì)胞活動(dòng)性、失巢凋亡等有關(guān)的基因的轉(zhuǎn)錄，發(fā)揮其抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的作用，因此，P53在腫瘤的轉(zhuǎn)移中也發(fā)揮著關(guān)鍵性的作用[12]。在子宮內(nèi)膜癌患者中，P53基因的過(guò)度表達(dá)和突變是患者預(yù)后不良的最重要因素，且與患者的生存期長(zhǎng)短有直接關(guān)系[13]。本研究中，對(duì)照組中未檢測(cè)到P53蛋白，說(shuō)明良性增生組織中不存在P53基因突變，而試驗(yàn)組P53陽(yáng)性表達(dá)率為62.9%，其中7例強(qiáng)陽(yáng)性染色標(biāo)本中有5例為子宮內(nèi)膜癌Ⅲ期或以上，說(shuō)明P53蛋白的陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤預(yù)后有密切關(guān)系。

3.2 Ki-67蛋白在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及其意義 1983年Gerdes等[14]在研究霍奇金淋巴瘤細(xì)胞系L428細(xì)胞的粗核成分免疫鼠時(shí)，首次成功研制出該抗體，由并命名為Ki-67。Ki-67抗體屬IgG家族，是一種單克隆抗體。體內(nèi)Ki-67的過(guò)量表達(dá)與多種惡性腫瘤的生物學(xué)行為有著密切的相關(guān)性。目前關(guān)于子宮內(nèi)膜癌病理特征與Ki-67的相關(guān)性的研究較多，但是缺乏統(tǒng)一性，多數(shù)研究顯示Ki-67和子宮內(nèi)膜癌的分期、組織類型、分級(jí)及浸潤(rùn)程度、預(yù)后有關(guān)[15]。但也有部分研究顯示Ki-67與子宮內(nèi)膜癌的分期、浸潤(rùn)深度、轉(zhuǎn)移、組織分級(jí)及復(fù)發(fā)沒(méi)有確切的相關(guān)性[16]。在細(xì)胞周期中，Ki-67的表達(dá)不斷發(fā)生變化，因此，Ki-67的表達(dá)是一個(gè)復(fù)雜的調(diào)節(jié)過(guò)程。Ki-67只表達(dá)于增生細(xì)胞中，而在靜止細(xì)胞中是不表達(dá)的[17]。在G0和G1早期細(xì)胞不表達(dá)Ki-67，最早表達(dá)于G1中晚期，發(fā)展至S期和G2期時(shí)，逐漸增高。由于半衰期短，因此有絲分裂結(jié)束后Ki-67開始降解[18]。據(jù)報(bào)道，由于Ki-67與人體多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有著很大的相關(guān)性，因此，Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率的高低不僅可以用來(lái)鑒別腫瘤的良惡性，還可以用來(lái)判斷腫瘤的侵襲力強(qiáng)弱[19]。Ki-67因其半衰期短，且能夠準(zhǔn)確反映細(xì)胞的增殖活性，故目前被廣泛用于腫瘤的生物學(xué)行為研究中。Ki-67在分泌期子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜單純?cè)錾?、非典型增生、子宮內(nèi)膜癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢(shì)，分別為2.6%、17%、42%和60%[20]。目前，WHO已經(jīng)將Ki-67指數(shù)作為各種惡性腫瘤的輔助檢查手段，但是由于免疫組化中沒(méi)有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)Ki-67，因此，用免疫組化的方法檢測(cè)Ki-67來(lái)診斷不同子宮內(nèi)膜病變，雖然能夠有效提高診斷準(zhǔn)確率，但是，仍需后期的不斷實(shí)驗(yàn)性研究和臨床大樣本試驗(yàn)證實(shí)。本研究中，對(duì)照組中未檢測(cè)到Ki-67蛋白，說(shuō)明良性增生組織中不存在Ki-67蛋白，而試驗(yàn)組Ki-67蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為68.6%，說(shuō)明Ki-67蛋白的陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤預(yù)后有密切關(guān)系。

3.3 血清CA125水平在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及其意義 CA125分布廣泛，正常情況下，在子宮內(nèi)膜、輸卵管、腹膜及其良性病變和惡性腫瘤中均有微量表達(dá)，CA125含有N-乙酰氨基葡萄糖、半乳糖及N-乙酰氨基半乳糖鏈[21]。CA125是一組高分子糖蛋白，胚胎發(fā)育中主要存在于體腔上皮細(xì)胞中，成體其表達(dá)于體腔上皮分化而來(lái)的各種組織器官中，如子宮、腹膜及蛻膜組織等[22]。目前關(guān)于子宮內(nèi)膜癌組織中CA125的表達(dá)及其臨床意義研究報(bào)道甚少。曾有相關(guān)研究指出，子宮內(nèi)膜癌患者的血清CA125水平與其臨床分期、病理類型及其轉(zhuǎn)移有關(guān)，如果血清CA125水平<32 IU·mL-1，90%的患者可判定為臨床早期，此時(shí)可考慮手術(shù)治療；但是如血清CA125水平>100 IU·mL-1，則表明89%的患者已經(jīng)出現(xiàn)宮外轉(zhuǎn)移[23]。本研究中，血清CA125水平在對(duì)照組為(8.23±2.58)u·L-1，而試驗(yàn)組則顯著升高，為(32.19±12.35)u·L-1，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。因此，CA125與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、臨床分期等有密切相關(guān)性，對(duì)估計(jì)預(yù)后也有一定的臨床借鑒價(jià)值。

在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的早期，用免疫組化檢測(cè)P53蛋白有利于鑒別子宮內(nèi)膜癌類型，有助于判斷子宮內(nèi)膜的病變程度。Ki-67可以反映細(xì)胞的增殖能力及活性，其表達(dá)與子宮內(nèi)膜組織分化程度等相關(guān)。血清CA125水平可以有效判斷子宮內(nèi)膜癌的預(yù)后，在子宮內(nèi)膜癌病變?cè)缙冢?lián)合檢測(cè)組織P53、Ki-67及其血清CA125水平能夠判斷腫瘤的分化程度和腫瘤的侵襲力等生物學(xué)行為，同時(shí)為估計(jì)預(yù)后提供一定的借鑒價(jià)值。

[1]李小毛，王小韻.子宮內(nèi)膜癌的基因熱點(diǎn)研究[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2008，24(2):161-162.

[2]JEON YT,PARK IA,KIM YB,et al.Steroid receptor expressions in endometrial cancer:clinical significance and epidemiological implication[J].Cancer Lett,2006,239(2):198-204.

[3]王芳,黃冬梅.盆腹腔淋巴結(jié)切除對(duì)早期子宮內(nèi)膜癌復(fù)發(fā)的影響[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床,2015,28(2): 138-140.

[4]MCVEIGH G,SHAH V,LONGACRE TA,et al.Endometrial involvement in pseudomyxoma peritonei secondary to low-grade appendiceal mucinous neoplasm: report of 2 cases[J].Int J Gynecol Pathol,2015,34(3):232-238.

[5]WANG J,HASUI K,UTSUNOMIYA A,et al.Association of high proliferation in adult T-cell leukemia cells with apoptosis,and expression of p53 protein in acute type ATL[J].J Clin Exp Hematop,2008,48(1):1-10.

[6]LINZER DL,LEVINE AJ.Characterization of a 54K surviv cellular SV40 tumor antigen present in SV40-transformed cells and uninfected embryonal carcinoma cells[J]．Cell,1979,17(1): 43-45.

[7]NGUYEN TT,HACHISUGA T,URABE R,et al.Significance of p53 expression in background endometrium in endometrial carcinoma[J].Virchows Arch,2015,466(6):695-702.

[8]MEARA RS,CANGIARELLA J,SIMSIR A,et al.Prediction of aggressiveness of gastrointestinal stromal tumours based on immunostaining with bcl-2,Ki-67 and p53[J].Cytopathology,2007,18(5): 283．

[9]VOUSDEN,KH,LU X.Live or let die: the cell’s response to p53[J].Nat Rev Cancer,2002,2(8):594-604.

[10]MAIA H JR,MALTEZ A,ATHAYDE C,et al.p53 expression in spontaneous and estradiolinduced endometrial hyperplasia during menopause[J].Maturitas，2003,44(3):175-180.

[11]SAMARNTHAI N,HALL K,YEH IT.Molecular profiling of endometrial malignancies[J].Obstet Gynecol Int,2010，2010:16.

[12]JONGEN VH,BRIЁT JM,DE JONG RA,et al.Aromatase,cyclooxygenase 2,HER-2/neu,and p53 as prognostic factors in endometrioidendometrial cancer[J].Int J Gynecol Cancer,2009,19(4):670-676.

[13]SCOUMANNE A,CHEN X.Proteinmethylation: a newmechanism of p53 tumor suppressor regulation[J].Histol Histopathol,2008,23 (9):1143-1149.

[14]GERDES J,SCHWAB U,LEMKE H,et al.Production of a mouse monoclonal antibody reactive with a human nuclear antigen ass ociated with cell proliferation[J].Int J Cancer,1983,31:13-20.

[15]CASTELLVI J,GARCIA A,RUIZ-MARCELLAN C,et al.Cell signaling in endometrial carcinoma: phosphorylated 4E-binding protein-1 expression inendometrial cancer correlates with aggressive tumors and prognosis[J].Hum Pathol,2009,40(10):1418-1426.

[17]HEIDEBRECHT HJ,BUCK F,HAAS K,et al.Monoclonal antibodies Ki-S3 and Ki-S5 yield new data on the Ki-67 proteins[J].Cell Prolif,1996,29(7):413-425.

[18]BERESFORD MJ,WILSON GD,MAKRIS A.Measuring proliferation in breast cancer: practicalities and applications[J].Breast Cancer Res,2006,8(6):216.

[19]SONG SH,PARK HM,EOM DW,et al．The expression of pl6 (JNK4a)and Ki-67 in relation to high-risk human papilloma viral load and residual disease after conization with positive margins[J].Int J Gynecol Cancer,2007,17(4): 858-867．

[20]GURDA GT,BARAS AS,KURMAN RJ.Ki-67 index as an ancillary tool in the differential diagnosis of proliferative endometrial lesions with secretory change[J].Int J Gynecol Pathol,2014 ,33(2):114-119.

[21]NIKOLAOU M,KOUREA HP,TZELEPI V,et al.The prognostic role of preoperative serum CA125 levels in patients with endometrial carcinoma[J].J BUON,2014,19(1):198-202.

[22]PRESL J,NOVOTNY Z,TOPOLCAN O,et al.CA125 and HE4 levels in a Czech female population diagnosed with endometrial cancer in preoperative management[J].Anticancer Res,2014,34(1):327-331.

[23]李艷芳，李孟達(dá).子宮內(nèi)膜癌患者CA125及CA199水平與預(yù)后因素關(guān)系[J].中華婦產(chǎn)科雜志，1998,33(6)：376-377.

Expressions of P53,Ki-67 in the Tissues and CA125 in the Serum of Patients with Endometrial Carcinoma

ZHOU Jingqi

(JiyuanCityPeople’sHospital,Jiyuan459000,China)

Objective To investigate the expressions of P53,Ki-67 in the tissues and CA125 in the serum of patients with endometrial carcinoma and the clinical significance.Methods Immumohistochemical staining was used to detect P53 and Ki-67 protein in the 35 patients with endometrial cancer (the experimental group) and 30 patients with endometrial hyperplasia (the control group),the serum CA125 levels were detected by radioimmunoassay in the two groups.Results In the experimental group,P53 protein was positive of 22 patients,Ki-67 protein was positive of 24 patients,and both showed negative in the control group (P<0.05).Serum CA125 levels in the experimental group was (32.19±12.35) u·L-1,and was (8.23±2.58) u·L-1in the control group (P<0.05).Conclusion P53,Ki-67 and CA125 play an important role in the development of endometrial carcinoma,their combination detection not only guides the clinical comprehensive treatment,but also becomes the effective efficacy and prognostic indicator.

endometrial carcinoma;P53;CA125; Ki-67;immumohistochemical staining

周競(jìng)奇(1975-)，女，副主任醫(yī)師，主要從事病理診斷工作。E-mail:zjq8308@126.com

10.3969/j.issn.1673-5412.2017.01.006

R737.33；R730.23

A

1673-5412(2017)01-0023-04

2016-05-12)