許永立（梅州市環(huán)境監(jiān)測(cè)中心站,廣東 梅州 514071）

高效液相色譜法-紫外檢測(cè)器甲萘威的測(cè)定方法

許永立（梅州市環(huán)境監(jiān)測(cè)中心站,廣東 梅州 514071）

為建立檢測(cè)水體中甲萘威的高效液相色譜法，以甲醇∶水=3∶2為流動(dòng)相，流速1.0 m L·min-1，波長(zhǎng)設(shè)置為280nm，進(jìn)樣量為10μL，采用紫外檢測(cè)器（1260VWD）測(cè)定水體中阿特拉津含量。結(jié)果表明，線性相關(guān)系數(shù)r=0.99995；對(duì)含1.00μg· L-1甲萘威水質(zhì)樣品進(jìn)行測(cè)定，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1%-2%。

高效液相色譜法;甲萘威

1 項(xiàng)目監(jiān)測(cè)試驗(yàn)

1.1 根據(jù)高效液相色譜的相關(guān)規(guī)定對(duì)儀器進(jìn)行分析前檢查

（1）開機(jī)前，檢查電源、計(jì)算機(jī)及分析儀器是否連接好。(2)檢查流動(dòng)相是否裝好在對(duì)應(yīng)的瓶子里。

（3）檢查液相色譜儀檢測(cè)器（1260VWD）,柱溫箱（1260TCC），自動(dòng)進(jìn)樣器（1260ALS）,四元泵（1260Qaut PumpVL）是否正常運(yùn)行。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備

甲萘威標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液[ρ（C12H11NO2）=1mg/mL]。稱取0.0500g甲萘威用甲醇（HPLC）溶解，于50mL容量瓶稀釋至刻度，置于冰箱中保存。

甲萘威標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：吸取2.50 mL甲萘威標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，用甲醇（HPLC）定容至50mL，此溶液ρ（C12H11NO2）=50μg/mL。

液相色譜法中使用標(biāo)準(zhǔn)樣品的條件

標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)樣體積與試樣進(jìn)樣體積相同。

標(biāo)準(zhǔn)樣品與試樣盡可能同時(shí)進(jìn)樣分析。

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：吸取甲萘威標(biāo)準(zhǔn)使用溶液以甲醇（HPLC）稀釋，配成濃度為0，0.2，0.4，0.8，1.0，1.6，2.0，4.0,6.0 μg/mL的甲萘威標(biāo)準(zhǔn)系列。

2 創(chuàng)建分析方法（以Agilent HPLC 1260為例）

（1）打開聯(lián)機(jī)界面，然后從菜單欄中選擇新建方法。聯(lián)機(jī)→方法→ 新建方法→ 編輯完整方法。

（2）在編輯完整方法界面中，流動(dòng)相甲醇（B）設(shè)置60%，流速設(shè)置為1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置為280nm，TCC溫度設(shè)置為30℃組合，進(jìn)樣量設(shè)置為10μL。

（3）添加到新方法→ 確定→ 手動(dòng)積分事件→設(shè)定報(bào)告1260→確定→ 文件→保存。

（4）簡(jiǎn)易序列設(shè)置→方法信息→方法→甲萘威20161112→樣品數(shù)設(shè)置（9）→樣品名稱 →簡(jiǎn)易序列設(shè)置（第二個(gè)圖標(biāo)→）將簡(jiǎn)易序列設(shè)置另存為→簡(jiǎn)易序列→調(diào)用簡(jiǎn)易序列設(shè)置→ 否→ 甲萘威標(biāo)準(zhǔn)序列→打開→ 樣品列表（0μg/mL 6μg/mL）→將簡(jiǎn)易序列保存并添加到序列中（文件名：甲萘威序列）保存。（開始走標(biāo)準(zhǔn)序列的九個(gè)峰）

（5）數(shù)據(jù)分析→ 甲萘威序列→ 文件 →調(diào)用信號(hào)→文件夾甲萘威序列01→確定 →積分→自動(dòng)積分 →時(shí)間設(shè)置3min到10min完成自動(dòng)積分文件 →調(diào)用信號(hào)→

文件夾甲萘威序列02確定……09確定→ 校正→ 新建校正表→自動(dòng)設(shè)定→ 級(jí)別9（含量6μg/mL）→確定→ 刪除雜峰→文件→調(diào)用信號(hào)8→ 校正 →

添加級(jí)別→ 級(jí)別8（含量4μg/mL）確定 →……文件調(diào)用7→添加級(jí)別→……文件調(diào)用1

擇將樣品結(jié)果輸出為文件。

3 樣品分析

（1）接通室內(nèi)儀器主電源開關(guān)，打開儀器主機(jī)電源，先用100%的甲醇（B）流動(dòng)相進(jìn)行30min左右清洗。

（2）吸取標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，用甲醇（HOLC）溶液配制系列標(biāo)準(zhǔn)曲線，甲萘威濃度為0 μg/L、0.2 μg/L、0.4 μg/L、0.8μg/L、1.0μg/ L、1.6 μg/L、2.0 μg/L、4.0μg/L、6.0μg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列分別放在測(cè)試架的1號(hào)到9號(hào)。

（3）建立標(biāo)準(zhǔn)曲線后，測(cè)定3次甲萘威濃度為1.0 μg/L樣品溶液，進(jìn)行平行試驗(yàn)測(cè)定。

（4）分析完成后，使用100%的甲醇（B）流動(dòng)相對(duì)儀器進(jìn)樣清洗20min左右，然后取出進(jìn)樣管，排空廢液，最后關(guān)閉電源。

4 結(jié)果計(jì)算與表示

計(jì)算：根據(jù)樣品的峰高或峰面積從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出甲萘威的質(zhì)量濃度，按式（1)進(jìn)行計(jì)算。

式中：

ρ（C12H11NO2）——水樣中甲萘威的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L);

ρ1——從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出甲萘威的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升（μg/mL)

V1——萃取液濃縮后體積，單位為毫升(mL)。

V——水樣體積，單位為毫升(mL)。

5 方法適用性試驗(yàn)

筆者用《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法農(nóng)藥指標(biāo)》GB/T5750.9-2006（10）規(guī)定方法測(cè)定甲萘威標(biāo)樣濃度進(jìn)行人員比對(duì)，其結(jié)果如下表2。

方法選擇監(jiān)測(cè)結(jié)果（μg/L）平均值（μg/L）相對(duì)偏差（%）1.01 1∽2監(jiān)測(cè)人員 1 2 3《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法農(nóng)藥指標(biāo)》GB/T5750.9-2006（10）項(xiàng)目 甲萘威1.01 1.02 1.00

6 注意事項(xiàng)

水中甲萘威的測(cè)定及分析的質(zhì)量控制和質(zhì)量保證均做了具體的質(zhì)控要求主要體現(xiàn)在以下幾點(diǎn)：

（一）做好儀器日常維護(hù)定期維護(hù)，確保儀器運(yùn)轉(zhuǎn)正常。

（二）定期清洗管道、色譜柱等。

（三）注意保持儀器室溫度、濕度并盡量減少震動(dòng)。使用過程中，確保通風(fēng)效果良好。使用后，保持儀器表面清潔

許永立（1987-），男，湖南郴州人，碩士，環(huán)保工程師