商健

摘 要：采用高效液相色譜儀對(duì)糕點(diǎn)中四種人工合成著色劑（檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃）進(jìn)行測定。該方法科學(xué)、準(zhǔn)確，分離快速，可用于糕點(diǎn)中四種人工合成著色劑的檢測。

關(guān)鍵詞：糕點(diǎn)；檸檬黃；莧菜紅；胭脂紅；日落黃；液相色譜

中圖分類號(hào)： TS251 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A 文章編號(hào)： 1673-1069（2017）05-183-2

0 引言

糕點(diǎn)是目前市場上最為常見的一類小吃，因種類繁多，口味多元，而受到人們的廣泛喜愛。根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 20977-2007 《糕點(diǎn)通則》，糕點(diǎn)可按加工方式分為熱加工糕點(diǎn)和冷加工糕點(diǎn)兩大類，其中，熱加工糕點(diǎn)占主導(dǎo)，其因產(chǎn)品制作工藝和本身特色的不同又可分為五大類：烘烤糕點(diǎn)、油炸糕點(diǎn)、水蒸糕點(diǎn)、熟粉糕點(diǎn)和其他類。蛋糕、水晶餅、麻花等就是糕點(diǎn)大類中的一部分。然而，許多不法商家為了提升糕點(diǎn)的色澤，紛紛往糕點(diǎn)中違規(guī)添加合成著色劑，合成著色劑沒有營養(yǎng)價(jià)值，長期過量食用會(huì)對(duì)身體健康產(chǎn)生一定影響[1]。

食品中合成著色劑的測定方法目前已知的有：示波極譜法[2]、分光光度法[3]、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[4]、高效液相色譜法[5]等。其中，高效液相色譜法因定性定量準(zhǔn)確而應(yīng)用最為普遍，國家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.35-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中合成著色劑的測定》采用此法，但是標(biāo)準(zhǔn)適用范圍為：飲料、配制酒、硬糖、蜜餞、淀粉軟糖、巧克力豆及著色糖衣制品，糕點(diǎn)并未在其列。本文擬建立糕點(diǎn)中四種人工合成著色劑的液相色譜測定法。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

島津LC-20液相色譜儀（二元泵，柱溫箱，自動(dòng)進(jìn)樣器，二極管陣列檢測器SPD-M20A），分析天平（CPA224S，德國賽多利斯），純水器（AWL-1002-M，臺(tái)灣艾科浦）；組織搗碎勻漿機(jī)（JJ-2（2003-61），常州國華電器有限公司 ）；離心機(jī)（LD4-2A，北京醫(yī)用離心機(jī)廠）；超聲波清洗器（KQ-500E，昆山市超聲儀器有限公司）；漩渦混合器（VORTEX 3，德國IKA）。

1.2 試劑

超純水由艾科浦純水器制備（再經(jīng)0.45μm濾膜過濾），甲醇（色譜純，阿拉丁試劑）；乙酸銨（優(yōu)級(jí)純，國藥集團(tuán)）；石油醚（分析純，沸程30～60℃， 國藥集團(tuán)）；乙醚（分析純，國藥集團(tuán)）；氯化鈉（分析純，國藥集團(tuán)）；乙酸鋅（分析純，國藥集團(tuán)）；亞鐵氰化鉀（分析純，國藥集團(tuán)）；冰醋酸（分析純，國藥集團(tuán)）；檸檬黃標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：GBW（E）100158，莧菜紅標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：GBW（E）100160，胭脂紅標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：GBW（E）100161，日落黃標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：GBW（E）100159，均購于中國計(jì)量科學(xué)研究院。

2 方法與條件

2.1 工作溶液的配制

2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

用刻度移液管準(zhǔn)確吸取檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃標(biāo)準(zhǔn)溶液于棕色容量瓶中，分別加超純水稀釋定容配成0.5ug/mL，1ug/mL，2ug/mL， 5ug/mL，10ug/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。

2.1.2 其他工作溶液

亞鐵氰化鉀溶液：稱取10.6g亞鐵氰化鉀，用純水溶解并定容至100mL，此溶液的濃度為106g/L。乙酸鋅溶液：稱取110.0g乙酸鋅，加15mL冰醋酸溶解，再加水定容至100mL， 此溶液的濃度為220g/L。

2.2 色譜條件

色譜柱為Waters C18柱（4.6mm×250mm， 5μm）； 柱溫30℃； 流動(dòng)相為甲醇+0.02mol/L乙酸銨溶液；梯度洗脫：15%～35%，4%/min；35%～80%，4.5%/min；流速為1.000mL/min；進(jìn)樣量為20μL；測定波長：254nm。

2.3 樣品預(yù)處理

樣品經(jīng)組織搗碎勻漿機(jī)攪拌搗碎，精密稱取5g樣品于50mL離心管中，處理步驟如下：

①油脂高的糕點(diǎn)（如麻花）：加入30mL石油醚和乙醚（1：1）混合液，漩渦混合器混勻2min， 超聲提取20min，過濾，除去濾液，加入30mL飽和氯化鈉溶液，超聲提取15min。

②蛋白質(zhì)高的糕點(diǎn)（如蛋糕）：先后加入5mL亞鐵氰化鉀和5mL乙酸鋅溶液，漩渦混合器混勻2min， 超聲提取20min，靜置30min，然后加入30mL飽和氯化鈉溶液，超聲提取15min，再加入10mL甲醇。

③其他：加入30mL飽和氯化鈉溶液，超聲提取15min。再加入10mL甲醇，4000r/min離心5分鐘，取上清液經(jīng)0.45μm濾膜過濾后上機(jī)分析。

3 結(jié)果與討論

3.1 工作曲線和最低檢出限

按2.2色譜條件對(duì)合成著色劑進(jìn)行分析，色譜圖見圖1，這四種合成著色劑在2.2色譜條件下能快速分離（11min內(nèi)均已出峰），且峰形較好，分離效果明顯。以Y代表合成著色劑的濃度，單位為ug/mL，X表示色譜峰峰面積，得出回歸方程：檸檬黃：Y=2.36×10-5X-2.13×10-3，線性相關(guān)系數(shù)（r2）為0.9993；莧菜紅：Y=2.64×10-5X-1.21×10-3，r2為0.9994；胭脂紅：Y=2.86×10-5X-0.73×10-3，r2為0.9996；日落黃：Y=3.08×10-5X-0.95×10-3，r2為0.9997，檢出限以3倍基線噪聲計(jì)算，均為0.1ug/mL。由此得出：這四種合成著色劑在工作濃度范圍內(nèi)線性良好（r2均在0.999以上），靈敏度高，能滿足分析測定的需要。

3.2 加標(biāo)回收試驗(yàn)

以蛋糕為例，向蛋糕樣品中加入合成著色劑，前處理按照2.3中（2）進(jìn)行，考察回收率，見表1。

由表1可知，蛋糕中四種合成著色劑的加標(biāo)平均回收率在90.8%～93.1%之間，該方法準(zhǔn)確度良好，可用于糕點(diǎn)中合成著色劑的測定。

4 結(jié)論

本文建立了一種液相色譜測定糕點(diǎn)中四種人工合成著色劑（檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃）的方法，該方法準(zhǔn)確，可靠，可作為糕點(diǎn)中合成著色劑的測定方法。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 楊艷偉，朱英.化妝品中著色劑使用情況的調(diào)查[J].環(huán)境與健康雜志，2012，2（2）：170-172.

[2] 辛若竹，王靜，韓靜秋.示波極譜法測定食品中合成著色劑的抗干擾性的研究[J].中國釀造，2007（1）：65-66.

[3] 余孔捷，錢疆，黃杰，等.分光光度法測定食品添加劑偶氮玉紅中未磺化芳伯胺類[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2009，35（5）：157-159.