柴春維

[摘要] 目的 評估利福平耐藥實時熒光定量核酸擴增檢測技術(shù)（Xpert MTB/RIF）在腎結(jié)核的早期診斷及利福平耐藥檢測中的價值。 方法 選取該院79例（2014年1月—2015年9月）確診為腎結(jié)核患者的尿液標本，分別進行尿沉渣涂片抗酸染色、XpertMTB/RIF檢測、羅氏固體培養(yǎng)、傳統(tǒng)比例法藥敏試驗。分析XpertMTB/RIF檢測尿中的Mtb及利福平耐藥性的敏感度和特異度。 結(jié)果 以羅氏固體培養(yǎng)為金標準，XpertMTB/RIF檢測Mtb的敏感度和特異度為88.7%（47/53）和88.5%（23/26），以傳統(tǒng)比例法藥敏試驗為金標準，XpertMTB/RIF檢測利福平耐藥的敏感度和特異度為71.4%（5/7）和100.0%（40/40）。 結(jié)論 XpertMTB/RIF技術(shù)檢測尿液中的Mtb和RIF耐藥具有較高的敏感度和特異度，對腎結(jié)核早期診斷和利福平耐藥檢測有較高的應(yīng)用價值。

[關(guān)鍵詞] XpertMTB/RIF技術(shù)；腎結(jié)核；敏感度；特異度

[中圖分類號] R446.5 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2017）01（a）-0109-03

[Abstract] Objective To evaluate the value of XpertMTB/RIF test in early diagnosis and resistance to rifampin of renal tuberculosis. Methods The urine samples of 79 patients（from January 2014 to September 2015） with renal tuberculosis were collected to do smear， XpertMTB/RIF test ，solid culture， traditional proportion method drug susceptibility test. Analyze the sensitivity and specificity of XpertMTB/RIF test in detecting tuberculosis and resistance to rifampin. Results Take solid culture result as standard ，the sensitivity and specificity of XpertMTB/RIF test in detecting urine Mtb were 88.7%（47/53）and 88.5%（23/26）. Take the result of proportion method drug susceptibility as standard ， the sensitivity and specificity of XpertMTB/RIF test in detecting rifampin resistance were 71.4%（5/7）and 100.0%（40/40）. Conclusions The Xpert MTB/RIF test has very high sensitivity and specificity in detecting urine Mtb and rifampin resistance ，It has higher value for early diagnosis renal tuberculosis and resistance to rifampin.

[Key words] XpertMTB/RIF technology； Renal tuberculosis； Sensitivity； Specificity

據(jù)WHO估計，近年來結(jié)核病的發(fā)病率在全球范圍仍保持在較高的水平，同時肺外結(jié)核的發(fā)病率也呈現(xiàn)明顯增加的趨勢[1-2]。腎結(jié)核是最常見的肺外結(jié)核之一，約占所有肺外結(jié)核的20%[3]。該病起病及進展均較為隱蔽，如發(fā)現(xiàn)及治療延誤，尿液中的Mtb可蔓延破壞另一側(cè)腎，甚至引起整個泌尿生殖系統(tǒng)結(jié)核。不僅治療花費加大，而且對人體的身心健康危害巨大，生活質(zhì)量將會大大下降。目前腎結(jié)核診斷主要依靠影像學(xué)及病原學(xué)檢查。影像學(xué)檢查（ B超、IVU和CT）對早期腎結(jié)核的診斷意義不大，故而病原學(xué)檢查在腎結(jié)核的早期診斷中顯得至關(guān)重要[4-5]。XpertMTB/RIF檢測系統(tǒng)是一項將樣品準備、定量PCR擴增和熒光檢測集于一身的快速全自動的核酸擴增技術(shù)。目前國內(nèi)外多項研究表明，其在結(jié)核病檢測方面具有較高的敏感度和特異度，加之耗時短的優(yōu)點，已成為近年來結(jié)核病確診及利福平耐藥性檢測的重要手段[6-7]。該研究方便選取79例 （2014年1月—2015年9月）確診腎結(jié)核患者的尿液標本，以羅氏固體培養(yǎng)和比例法藥敏試驗為金標準，探討XpertMTB/RIF技術(shù)在腎結(jié)核的早期診斷及利福平耐藥性檢測中的價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院確診腎結(jié)核患者79例，年齡14～63歲，男性46例，女性33例。右腎結(jié)核48例，左腎結(jié)核28例，雙腎結(jié)核3例。同時合并其他部位結(jié)核57例。留取24 h尿沉渣及2杯中段晨尿送檢。所有患者均經(jīng)臨床表現(xiàn)、影像學(xué)、病原學(xué)、組織病理學(xué)以及經(jīng)驗性抗結(jié)核治療等最終確診為腎結(jié)核。

1.2 儀器與試劑及方法

XpertMTB/RIF檢測系統(tǒng)（Cepheid USA），羅氏固體培養(yǎng)基及藥敏培養(yǎng)基。所有尿液標本同時做24 h尿沉渣涂片抗酸染色、羅氏固體培養(yǎng)、比例法藥敏試驗和XpertMTB/RIF檢測。具體操作步驟嚴格參照說明書進行。

1.3 統(tǒng)計方法

運用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，對XpertMTB/RIF結(jié)果和金標準比較，同時進行一致性檢驗，Kappa值≥0.75認為兩者一致性較好。

2 結(jié)果

2.1 XpertMTB/RIF與羅氏培養(yǎng)法檢測Mtb的比較

以羅氏培養(yǎng)法為金標準：①尿沉渣涂片抗酸染色陽性47例中，羅氏培養(yǎng)陽性35例，XpertMTB/RIF陽性33例，靈敏度94.3%。羅氏培養(yǎng)陰性12例，XpertMTB/RIF陰性10例，特異度83.3%。②尿沉渣涂片抗酸染色陰性32例中，羅氏培養(yǎng)陽性18例，XpertMTB/RIF陽性14例，靈敏度77.8%。羅氏培養(yǎng)陰性14例，XpertMTB/RIF陰性13例，特異度為92.8%?？偯舾卸?8.7%（47/53），特異度88.5%（23/26）。對XpertMTB/RIF和羅氏培養(yǎng)法進行Kappa一致性檢驗，K=0.75，P<0.05，可認為兩者具有高度一致性，見表1。

2.2 XpertMTB/RIF與傳統(tǒng)比例藥敏法對利福平耐藥檢測的比較

以傳統(tǒng)比例法為金標準：①尿沉渣涂片抗酸染色陽性病例，傳統(tǒng)比例法檢測到5例耐藥中，Xpert檢測到4例，靈敏度80.0%。傳統(tǒng)比例法檢測到28例敏感中，Xpert檢測到28例，特異度100.0%。②尿沉渣涂片抗酸染色陰性病例，傳統(tǒng)比例法檢測到2例耐藥中，Xpert檢測到1例，靈敏度50.0%。傳統(tǒng)比例法檢測到12例敏感中，Xpert檢測到12例，特異度100.0%。全部病例總敏感度71.4%（5/7），特異度100.0%（40/40）。對Xpert MTB/RIF和傳統(tǒng)比例法進行Kappa一致性檢驗，K=0.807，P<0.05，可認為兩者具有高度一致性。

3 討論

羅氏培養(yǎng)法在腎結(jié)核病原學(xué)檢查中具有確診價值，但實驗本身需要時間長（2個月左右），作用受到一定限制[8]。尿沉渣涂片抗酸染色快速簡單，但特異性差、敏感度低，不能做為診斷依據(jù)。故耗時短，敏感度和特異度均高，誤差小的檢驗對腎結(jié)核診治及預(yù)后意義將十分重大。XpertMTB/RIF技術(shù)以人體體液為標本，以rpoB基因為靶基因，提取DNA后擴增rpoB基因進行檢測Mtb及RIF耐藥。2 h檢測出是否患結(jié)核病及是否對利福平耐藥。近年來成為結(jié)核病確診及利福平耐藥檢測的重要手段。

該研究采用XpertMTB/RIF檢測尿中Mtb，以羅氏培養(yǎng)法為金標準，對其敏感度和特異度進行效價檢驗。結(jié)果顯示，尿沉渣涂陽病例中，XpertMTB/RIF具有94.3%的高陽性率，而涂陰病例中，陽性率明顯下降至77.8%?？偯舾卸?8.7%，低于報道中檢測痰Mtb的敏感度96%[9]。這與尹青琴等人[10]關(guān)于XpertMTB/RIF對結(jié)核病診斷價值的meta分析一文中的結(jié)論一致，XpertMTB/RIF診斷涂陽病例的敏感度明顯高于涂陰病例（99.0% vs 74.0%），診斷肺外結(jié)核的敏感度低于肺結(jié)核（76.0% vs 96.0%）。在檢測RIF耐藥中，以傳統(tǒng)比例法為金標準，敏感度71.4%，特異度達100.0%。在張治國等人[11]關(guān)于XpertMTB/RIF檢測RIF耐藥研究中，其敏感度和特異度分別為89.1%和96.3%。與此結(jié)論相比，該研究中的特異度雖仍保持在較高水平，但100.0%又過于絕對，敏感度卻出現(xiàn)明顯下降。分析原因，可能與標本例數(shù)少引起比值差異大有關(guān)，比例法測利福平敏感的40例病例中， XpertMTB/RIF恰好完全符合，使得特異度達100.0%。而在僅有的7例耐藥中，XpertMTB/RIF測到5例，5/7的比值又使敏感度明顯降低，增加樣本的例數(shù)將使結(jié)論更加精確。

目前XpertMTB/RIF已廣泛用于肺結(jié)核及耐多藥結(jié)核的診治中，但在肺外結(jié)核中應(yīng)用較少。該研究結(jié)論顯示其在腎結(jié)核的早期診斷及RIF耐藥篩查方面具有很高的使用價值，可在臨床工作中廣泛開展。另外也要將該技術(shù)廣泛用于其他肺外結(jié)核的診治中，如結(jié)核性腦膜炎、骨關(guān)節(jié)結(jié)核等，使該技術(shù)在肺外結(jié)核的疫情控制中發(fā)揮更大的作用。

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（收稿日期：2016-10-08）