石文卉 陳維 荊瑋 聶文娟 周文強(qiáng) 初乃恵

·論著·

肺結(jié)核患者淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果與臨床特征的相關(guān)性探討

石文卉 陳維 荊瑋 聶文娟 周文強(qiáng) 初乃恵

目的 分析肺結(jié)核患者淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定的結(jié)果，探討其異常情況與患者臨床特征的關(guān)系。方法 選取2015年5月至2016年5月于首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京胸科醫(yī)院結(jié)核科住院的200例肺結(jié)核患者作為研究對(duì)象，收集其基本信息、入院期間的疾病狀態(tài)，以及淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果。分析研究對(duì)象淋巴細(xì)胞亞群變化情況與其臨床特征的相關(guān)性。結(jié)果 200例患者中CD4+T細(xì)胞百分比正常者164例(82.0%)、升高者5例(2.5%)、降低者31例(15.5%)；對(duì)藥物敏感患者中CD4+T細(xì)胞百分比降低者的構(gòu)成比[25%(19/76)]高于耐藥結(jié)核病患者[9.7% (12/124)](χ2=8.12，P=0.004)。CD8+T細(xì)胞百分比正常者171例(85.5%)、升高者23例(11.5%)、降低者6例(3%)；年齡≥60歲的患者和無空洞的患者中CD8+T細(xì)胞百分比升高者的構(gòu)成比[21.4%(12/56)、22.2%(12/54)]分別高于年齡<60歲者和并發(fā)空洞者[7.6%(11/144)、7.5%(11/146)](χ2值分別為8.12和8.56，P值分別為0.004和0.003)。自然殺傷細(xì)胞(natural killer cell，NK細(xì)胞)百分比正常者170例(85%)、升高者15例(7.5%)、降低者15例(7.5%)；對(duì)藥物敏感患者中NK細(xì)胞百分比升高者的構(gòu)成比[14.5%(11/76)]高于耐藥結(jié)核病患者[3.2%(4/124)] (χ2=9.06，P=0.003)。B細(xì)胞百分比正常者159例(79.5%)、升高者8例(4%)、降低者33例(16.5%)；女性患者中B細(xì)胞百分比升高者的構(gòu)成比[10.5%(6/57)]高于男性患者[1.4%(2/143)](χ2=6.99，P=0.008)；男性患者中B細(xì)胞百分比降低者的構(gòu)成比[32.1%(18/56)]高于女性患者[10.4%(15/144)](χ2=6.24，P=0.013)；無空洞患者B細(xì)胞百分比升高者的構(gòu)成比[11.1%(6/54)]高于并發(fā)空洞者[1.4%(2/146)](χ2=11.55，P=0.001)；年齡≥60歲患者中B細(xì)胞百分比降低者的構(gòu)成比[32.1%(18/56)]高于年齡<60歲者[10.4%(15/144)](χ2=13.76，P=0.001)。結(jié)論 肺結(jié)核患者對(duì)藥物敏感可能與NK細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞百分比的升高或降低有關(guān)；患者無空洞可能與CD8+T細(xì)胞和B細(xì)胞百分比的升高有關(guān)。

結(jié)核，肺； T淋巴細(xì)胞亞群； B淋巴細(xì)胞亞群； 數(shù)據(jù)說明, 統(tǒng)計(jì)； 評(píng)價(jià)研究

結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis，MTB)感染率高，但發(fā)病率卻較低，表明結(jié)核病發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸不僅與機(jī)體感染的細(xì)菌量及其毒力等因素相關(guān)，同時(shí)也與患者的免疫功能存在直接的關(guān)系[1]。結(jié)核病的免疫機(jī)制較為復(fù)雜，機(jī)體在受到MTB的入侵之后，會(huì)產(chǎn)生一系列的細(xì)胞免疫和體液免疫反應(yīng)[2-3]。外周血淋巴細(xì)胞亞群是檢測(cè)機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫功能的重要指標(biāo)，但這些指標(biāo)是否能反映患者的免疫狀況，值得進(jìn)一步研究。因此，筆者回顧分析了200例肺結(jié)核患者的臨床資料，收集其淋巴細(xì)胞亞群中CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(natural killer cell，NK細(xì)胞)和B細(xì)胞的檢測(cè)結(jié)果，分析淋巴細(xì)胞異常與其疾病狀態(tài)的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

對(duì)象和方法

1.研究對(duì)象：選取2015年5月至2016年5月于首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京胸科醫(yī)院結(jié)核科住院的200例肺結(jié)核患者作為研究對(duì)象。所有患者的確診標(biāo)準(zhǔn)參考《臨床診療指南：結(jié)核病分冊(cè)》[4]。

2.納入與排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)肺結(jié)核診斷均符合《臨床診療指南：結(jié)核病分冊(cè)》中的標(biāo)準(zhǔn)；(2)排除合并甲狀腺疾病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡者；(3)排除入院3個(gè)月前使用免疫調(diào)節(jié)劑者；(4)排除孕婦或者哺乳期婦女。

3.資料收集：查詢并綜合統(tǒng)計(jì)研究對(duì)象的基本信息(包括年齡、性別等)，入院期間的疾病狀態(tài)(包括臨床癥狀、診斷結(jié)果、初治或復(fù)治、耐藥與否、是否并發(fā)空洞、涂片及培養(yǎng)結(jié)果、是否并發(fā)糖尿病等)，以及相關(guān)指標(biāo)檢查結(jié)果[包括CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、NK細(xì)胞、B細(xì)胞的百分比]。對(duì)異常的檢查結(jié)果結(jié)合其疾病情況綜合分析兩者間的相關(guān)性。

4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：應(yīng)用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。對(duì)調(diào)查對(duì)象臨床信息進(jìn)行描述性分析，采用χ2檢驗(yàn)比較研究對(duì)象各類淋巴細(xì)胞亞群百分比正常、升高及降低在年齡、性別、臨床特征等方面分布的差異，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；對(duì)分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素進(jìn)一步進(jìn)行組內(nèi)兩兩比較，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α校正為0.025。

結(jié) 果

1.基本情況：200例患者中，男143例(71.5%)，女57例(28.5%)；年齡范圍為11～88歲，平均(42.35±10.24)歲；≥60歲者56例(28.0%)，<60歲者144例(72.0%)。研究對(duì)象中，146例(73.0%)患者肺內(nèi)有空洞，54例(27.0%)無空洞；124例(62.0%)患者存在耐藥，76例(38.0%)無耐藥；52例(26.0%)并發(fā)糖尿病。初治98例(49.0%)，復(fù)治102例(51.0%)。

2.淋巴細(xì)胞亞群變化與臨床特征的關(guān)系：200例患者中，CD3+T細(xì)胞百分比正常者166例(83.0%)、升高者23例(11.5%)、降低者11例(5.5%)，其分布情況與患者臨床特征未見相關(guān)性。CD4+T細(xì)胞百分比正常者164例(82.0%)、升高者5例(2.5%)、降低者31例(15.5%)，患者耐藥與否對(duì)CD4+T細(xì)胞百分比的變化有影響，進(jìn)一步比較發(fā)現(xiàn)藥物敏感患者中CD4+T細(xì)胞百分比降低者的構(gòu)成比更高(χ2=8.12，P=0.004)。CD8+T細(xì)胞百分比正常者171例(85.5%)、升高者23例(11.5%)、降低者6例(3.0%)，患者年齡和并發(fā)空洞與否對(duì)CD8+T細(xì)胞百分比的變化有影響，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)年齡≥60歲的患者(χ2=8.12，P=0.004)和無空洞的患者(χ2=8.56，P=0.003)中CD8+T細(xì)胞百分比升高者的構(gòu)成比更高。NK細(xì)胞百分比正常者170例(85.0%)、升高者15例(7.5%)、降低者15例(7.5%)，患者年齡和耐藥與否對(duì)NK細(xì)胞百分比變化有影響，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)藥物敏感患者中NK細(xì)胞百分比升高者構(gòu)成比更高(χ2=9.06，P=0.003)。B細(xì)胞百分比正常者159例(79.5%)、升高者8例(4.0%)、降低者33例(16.5%)，患者性別、年齡和并發(fā)空洞與否對(duì)B細(xì)胞百分比變化有影響，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)女性患者中B細(xì)胞百分比升高者的構(gòu)成比更高(χ2=6.99，P=0.008)；男性患者中B細(xì)胞百分比降低者的構(gòu)成比更高(χ2=6.24，P=0.013)；無空洞患者B細(xì)胞百分比升高者的構(gòu)成比更高(χ2=11.55，P=0.001)；年齡≥60歲患者中B細(xì)胞百分比降低者的構(gòu)成比更高(χ2=13.76，P=0.001)(表1)。

表1 肺結(jié)核患者淋巴細(xì)胞亞群變化與臨床特征的關(guān)系[例(構(gòu)成比，%)]

討 論

機(jī)體免疫系統(tǒng)中各淋巴細(xì)胞的亞群數(shù)量及功能出現(xiàn)異常，理論上會(huì)造成機(jī)體免疫功能紊亂，導(dǎo)致發(fā)病[5-6]。但在臨床中經(jīng)常可以看到，重癥及耐藥的結(jié)核病患者T淋巴細(xì)胞檢測(cè)顯示正常，而輕癥患者可能顯示異常，由此提示結(jié)核病的發(fā)生和發(fā)展過程中可能存在更復(fù)雜的機(jī)體免疫反應(yīng)。

CD3+T細(xì)胞不直接參與抗結(jié)核免疫中的抗原識(shí)別，但可通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用激活T淋巴細(xì)胞，啟動(dòng)細(xì)胞免疫[7]。筆者發(fā)現(xiàn)，肺結(jié)核患者CD3+T細(xì)胞百分比的升高或降低與患者性別、年齡、初復(fù)治、耐藥情況、有無空洞和是否并發(fā)糖尿病均無相關(guān)性，與既往研究一致[8-9]。有研究表明，耐藥與否與CD3+T細(xì)胞百分比升高或降低無明顯相關(guān)性[10]，但也有研究顯示，耐藥患者的CD3+T細(xì)胞百分比會(huì)降低[11]；此研究差異存在的原因可能是沒有對(duì)耐藥進(jìn)行獨(dú)立分析，或研究對(duì)象數(shù)量較少。另外也有研究表明，糖尿病并發(fā)結(jié)核病患者CD3+T細(xì)胞百分比降低[12]。由此推測(cè)，CD3+T淋巴細(xì)胞百分比的升高或降低可能難以反映機(jī)體的免疫狀況。

機(jī)體感染結(jié)核分枝桿菌后，一方面CD4+T細(xì)胞通過分泌細(xì)胞因子，如γ-干擾素(interferon-γ,IFN-γ)，誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞活化，從而抑制胞內(nèi)細(xì)菌的生長，這對(duì)機(jī)體有效防御結(jié)核分枝桿菌至關(guān)重要[13-14]；另一方面，CD4+T細(xì)胞能積極影響非淋巴組織中的CD8+T細(xì)胞(例如肺)，促進(jìn)CD8+T細(xì)胞分泌IFN-γ[15]，從而促進(jìn)疾病的治愈。理論上，輕癥及藥物敏感患者CD4+T淋巴細(xì)胞百分比應(yīng)該增高，但在本研究中CD4+T細(xì)胞百分比降低在對(duì)藥物敏感患者中更明顯，與相關(guān)研究不一致[11]。究其原因，可能由于本研究中CD4+T細(xì)胞百分比下降的19例對(duì)藥物敏感患者中有7例并發(fā)糖尿病，而12例耐藥結(jié)核病患者無并發(fā)糖尿病。CD4+T細(xì)胞百分比異常與患者年齡、性別、初復(fù)治等其他因素均未見相關(guān)性。

CD8+T淋巴細(xì)胞能夠識(shí)別結(jié)核分枝桿菌胞質(zhì)抗原進(jìn)而攻擊靶細(xì)胞，或通過細(xì)胞凋亡破壞結(jié)核分枝桿菌生長環(huán)境，從而發(fā)揮其獨(dú)特的抗結(jié)核作用。筆者研究發(fā)現(xiàn)，≥60歲患者CD8+T淋巴細(xì)胞百分比升高較明顯，與周曉映等[16]的研究一致。無空洞的患者升高也較明顯，與張少俊和肖和平[17]的研究結(jié)果有差別，可能與本研究中CD8+T淋巴細(xì)胞百分比升高的11例有空洞的患者中有7例為復(fù)治患者有關(guān)，因有研究表明，復(fù)治患者CD8+T淋巴細(xì)胞百分比升高較明顯[18]。

NK細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)中參與排斥反應(yīng)的細(xì)胞，具有變形殺傷和防止病原體感染的作用。NK細(xì)胞中含有顆粒溶素，在穿孔素的作用下，能夠到達(dá)細(xì)胞核部位，起到殺傷結(jié)核分枝桿菌的作用。故NK細(xì)胞在機(jī)體針對(duì)結(jié)核分枝桿菌感染產(chǎn)生的免疫反應(yīng)中也發(fā)揮關(guān)鍵作用[19-20]。本研究中對(duì)藥物敏感的患者NK細(xì)胞百分比升高較明顯，可能與本研究中NK細(xì)胞百分比異?；颊呃龜?shù)較少有關(guān)，仍需進(jìn)一步探討。NK細(xì)胞百分比異常與患者年齡、性別、初復(fù)治等因素均未見相關(guān)。

目前，關(guān)于B淋巴細(xì)胞抗結(jié)核作用的研究較少。因此，筆者對(duì)B淋巴細(xì)胞百分比異常與結(jié)核病患者臨床特征的相關(guān)性進(jìn)行了探討。研究發(fā)現(xiàn)，年齡≥60歲的患者B淋巴細(xì)胞百分比下降較明顯；無空洞患者B淋巴細(xì)胞百分比異常的比例較高。但本研究中B淋巴細(xì)胞百分比異?；颊呃龜?shù)較少，所得結(jié)論還需進(jìn)一步驗(yàn)證。

本次研究中包含52例肺結(jié)核并發(fā)糖尿病的患者，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，患者并發(fā)糖尿病與否對(duì)淋巴細(xì)胞亞群的變化未見影響。本次回顧性分析尚存在一定局限性，如研究只能呈現(xiàn)出一定的現(xiàn)象，難以考究其內(nèi)在的本質(zhì)；研究對(duì)象數(shù)量較少，還應(yīng)擴(kuò)大，以便獲得更可靠的數(shù)據(jù)；患者進(jìn)行的檢測(cè)均只進(jìn)行1次，可能會(huì)存在誤差；沒有對(duì)檢測(cè)指標(biāo)進(jìn)行治療前后的比較，以及沒能與健康人群進(jìn)行對(duì)比分析。綜上所述，肺結(jié)核患者CD3+T細(xì)胞百分比的改變可能與臨床特征無關(guān)；患者藥物敏感可能與NK細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞百分比的升高或降低有關(guān)；患者無空洞可能與CD8+T細(xì)胞和B細(xì)胞百分比的升高有關(guān)。

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(本文編輯：李敬文)

Correlation between lymphocyte subsets and disease status in patients with pulmonary tuberculosis

SHIWen-hui,CHENWei,JINGWei,NIEWen-juan,ZHOUWen-qiang,CHUNai-hui.

Departmentoftuberculosis,BeijingChestHospitalaffiliatedtoCapitalMedicalUniversity

CHUNai-hui,Email:dongchu1994@sina.com

Objective Analyzing the lymphocyte subsets of pulmonary tuberculosis (PTB) patients, so as to explore the relationship between its result and clinical characteristics. Methods A total of 200 PTB patients from May 2015 to May 2016 were chosen in Beijing Chest Hospital affiliated to Capital Medical University. Their clinical characteristics and lymphocyte subsets tests’ results were collected. The relationship between lymphocyte subsets and clinical characteristics was analyzed. Results Of all the 200 cases, 164 (82.0%) patients’ CD4+T cell proportion was normal, 5 (2.5%) higher, 31 (15.5%) lower. Drug-sensitive patients’ proportion (19/76, 25%) with low-level CD4+T cell was higher than drug-resistant patients (12/124, 9.7%) (χ2=8.12，P=0.004). 171 (85.5%) patients’ CD8+T cell proportion was normal, 23 (11.5%) higher, 6 (3%) lower. Patients ≥60 years old (21.4%, 12/56) and no-cavity patients’ (22.2%, 12/54) proportions with high-level CD8+T cell were higher than patients <60 years old (7.6%, 11/144) and cavity-positive patients (7.5%, 11/146) (χ2=8.12,P=0.004;χ2=8.56,P=0.003). 170 (85.0%) patients’ natural killer (NK) cell proportion was normal, 15 (7.5%) higher, 15 (7.5%) lower. Drug-sensitive patients’ proportion (14.5%, 11/76) with high-level NK cell was higher than drug-resistant patients (3.2%, 4/124) (χ2=9.06,P=0.003). 159 (79.5%) patients’ B cell proportion was normal, 8 (4.0%) higher, 33 (16.5%) lower. Female proportion (10.5%, 6/57) with high-level B cell was higher than male (1.4%, 2/143) (χ2=6.99,P=0.008). Male proportion (21.0%, 30/143) with low-level B cell was higher than female (5.3%, 3/57) (χ2=6.24,P=0.013). No-cavity patients’ (11.1%, 6/54) proportions with high-level B cell were higher than cavity-positive patients (1.4%, 2/146) (χ2=11.55,P=0.001). Patients ≥60 years old (32.1%, 18/56) proportions with low-level B cell were higher than patients <60 years old (10.4%, 15/144) (χ2=13.76,P=0.001). Conclusion Drug susceptibility may be of high relevance to CD4+T cell’s level. Patients with no-cavity may be of high relevance to high-level CD8+T cell and B cell.

Tuberculosis, pulmonary; T-lymphocyte subsets; B-lymphocyte subsets; Data interpretation, statistical; Evaluation studies

10.3969/j.issn.1000-6621.2017.02.007

“十二五”國家科技重大專項(xiàng)(2015ZX10003001-002)；北京市醫(yī)院管理局臨床醫(yī)學(xué)發(fā)展專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)資助(ZYLX201304)

101149 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京胸科醫(yī)院結(jié)核科

初乃惠，Email: dongchu1994@sina.com

2016-11-11)