熊 莉，周小英，何華慶，李國良

(江西省血液中心，江西南昌330077)

RhD陰性獻血者表型調(diào)查在臨床輸血安全中的作用分析

熊 莉，周小英，何華慶，李國良

(江西省血液中心，江西南昌330077)

目的了解南昌地區(qū)RhD陰性獻血者Rh表型的分布情況。方法對初篩為RhD陰性的252例無償獻血者標(biāo)本用間接抗人球蛋白試驗進行陰性確認，用單克隆抗-C、抗-E、抗-c、抗-e血清試劑對Rh表型進行檢測，并篩查其不規(guī)則抗體。結(jié)果252例初篩陰性的獻血者中，確認為RhD陰性者245例（97.22%）。表型分布以ccee(53.06%)居多，其余依次為Ccee (37.14%)、CCee(4.89%)、ccEe(3.27%)、CcEe(0.82%)、ccEE(0.82%)。245例陰性獻血者中有5例獻血者產(chǎn)生抗D。結(jié)論對本地區(qū)RhD陰性的無償獻血者Rh表型及不規(guī)則抗體進行調(diào)查，有助于建立豐富RhD陰性獻血者資料庫，為臨床輸血安全提供有效保障。

RhD陰性；表型；不規(guī)則抗體

Rh血型系統(tǒng)是目前發(fā)現(xiàn)的35個紅細胞血型系統(tǒng)中最具多態(tài)性的系統(tǒng)[1]，RhD陰性血型人在中國漢族人群中占0.2%~0.5%。Rh系統(tǒng)抗原抗體不匹配可引起溶血性輸血反應(yīng)、新生兒溶血病及自身免疫性溶血性貧血[2]。RhD陰性獻血者表型資料的調(diào)查有助于科學(xué)管理RhD陰性獻血者，建立及完善稀有血型檔案；對臨床上Rh系統(tǒng)相關(guān)的疑難配血做出迅速準(zhǔn)確的反應(yīng)，并及時提供相匹配的血液。為此，本室對南昌地區(qū)初篩為陰性的252例RhD陰性獻血者表型進行調(diào)查分析，結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗對象2012年9月至2014年7月本中心檢驗科送檢的初篩為RhD陰性的無償獻血者252例。

1.2 主要試劑單克隆抗-C、抗-E、抗-c、抗-e、抗體篩查試劑、抗人球蛋白試劑均購自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，抗-D（IgM）、抗-D（IgM+ IgG）、抗-D（IgG）試劑分別購自北京金豪、BIOSCOT和上海血液生物。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 RhD陰性血型確認對初篩陰性的血液標(biāo)本，用IgM抗-D血清試劑試管法復(fù)檢，復(fù)檢陰性者采用IgG和IgG+IgM抗-D血清試劑，用間接抗人球蛋白(IAT)試驗進行確認。IAT試驗陰性者確認為RhD陰性，陽性者為D變異型。

1.4 Rh血清學(xué)表現(xiàn)型鑒定采用單克隆抗-C、抗-E、抗-c、抗-e血清試管法進行篩選，判斷Rh血清學(xué)表型。

1.5 不規(guī)則抗體檢測對確認為RhD陰性血型的血樣進行不規(guī)則游離抗體篩查和抗體特異性鑒定。

1.6 統(tǒng)計分析使用直接計數(shù)法計算各血型。

2 結(jié)果

2.1 RhD陰性血型確認結(jié)果252例初篩陰性的獻血者中，確認為RhD陰性者245例（97.22%），D變異型7例（2.78%）。

2.2 Rh血清學(xué)表現(xiàn)型分布245例Rh陰性獻血者中共檢出6種表現(xiàn)型，分別為ccee130例(53.06%)、Ccee91例(37.14%)、CCee12例(4.89%)、ccEe8例(3.27%)、CcEe2例(0.82%)、ccEE2例(0.82%)。有5例獻血者產(chǎn)生抗D，占Rh陰性獻血者人數(shù)的2.04%，見表1；7例D變異型中檢出4種表現(xiàn)型，未檢出不規(guī)則抗體，見表2。

表1 245例RhD陰性表現(xiàn)型分布

表2 7例D變異型表現(xiàn)型分布

3 討論

本研究245例RhD陰性表現(xiàn)型以ccee居多，其余依次為Ccee、CCee、ccEe、CcEe、ccEE。Rh分型結(jié)果與之前文獻報道[3，4]相似。本室之前也做過相關(guān)調(diào)查[5]，只檢出5種Rh表型，估計和樣本的抽樣誤差及取樣量不足有關(guān)。本次表型分析中未發(fā)現(xiàn)CCdEE、CcdEE和CCdEe表型，符合Rh血型系統(tǒng)在血清學(xué)有復(fù)雜表現(xiàn)及表型頻率嚴重不平衡的特點[6]。

目前已發(fā)現(xiàn)50余種不同的Rh抗原，D抗原是Rh抗原中免疫原性最強的抗原。本研究中，有5例RhD陰性獻血者產(chǎn)生抗D，分別為ccdee3例和Ccdee2例，陽性率略高于其他研究室的調(diào)查結(jié)果[2，7]。除D抗原外，因C、c、E、e抗原配合不符引起的配血困難或輸血反應(yīng)的報道越來越多[8，9]，抗E、抗c產(chǎn)生的機會在中國人群中預(yù)期均要高于抗D。從表1可見，E抗原出現(xiàn)的頻率很低，也就意味著RhD陰性人群受免疫刺激產(chǎn)生抗E的機率也很大。本研究中雖未出現(xiàn)抗D以外的抗體，原因可能是實驗對象數(shù)量太少。但也提示我們，僅僅對D抗原做常規(guī)檢測是遠遠不夠的，同預(yù)防抗D一樣，輸血前應(yīng)對患者和獻血者的Rh血型抗原準(zhǔn)確分型，才能實現(xiàn)ABO、Rh血型系統(tǒng)的相容性輸注，從源頭上降低Rh抗體的發(fā)生率。

本研究252例初篩陰性獻血者中檢出7例D變異型，無一例產(chǎn)生抗D，這與D變異型的分子背景有關(guān)。D變異型分為弱D、部分D和DEL。其中在IAT確認為RhD陰性人群中，DEL所占的比例為10%~30%。國外已經(jīng)有較多的RhD陰性患者因輸入DEL血液而產(chǎn)生抗D或體內(nèi)抗D效價升高[10，11]，因此在RhD陰性血的檢測中不可忽視D變異型。

RhD陰性血是臨床稀缺的血源，如何提高稀有血型庫的利用率是目前研究的熱點。調(diào)查了解本地區(qū)RhD陰性獻血者的表型可以建立固定的RhD陰性無償獻血人群的資料庫，有利于最大限度的實現(xiàn)Rh同型輸注，提高輸血安全，同時對指導(dǎo)臨床在緊急輸血情況下，快速找到合適血源，保證臨床用血有重大意義。

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R193.3，R457.1+1

A

1674-1129(2017)01-0126-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.01.044

2016-07-08；

2016-08-12)