吳 瓊，王東凱，王 雷，曹滌非，李 瑤，黃國(guó)慶，薛佳瑩，孫 堯，趙金海

(黑龍江省科學(xué)院高技術(shù)研究院，哈爾濱 150020)

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熒光假單胞菌抗生性代謝產(chǎn)物的研究進(jìn)展

吳 瓊，王東凱，王 雷，曹滌非，李 瑤，黃國(guó)慶，薛佳瑩，孫 堯，趙金海

(黑龍江省科學(xué)院高技術(shù)研究院，哈爾濱 150020)

熒光假單胞菌定殖在植物根際，主要靠噬鐵素對(duì)Fe3+的競(jìng)爭(zhēng)和抗生素產(chǎn)生的拮抗作用抑制病原菌的生長(zhǎng)發(fā)育，保護(hù)植物體不受病菌危害。世界許多國(guó)家對(duì)熒光假單胞菌的抗病害能力及其菌株產(chǎn)生的多種活性物質(zhì)，對(duì)多種病害有抑制作用均有報(bào)道，由此論述了熒光假單胞菌抗生性代謝產(chǎn)物的研究進(jìn)展。

熒光假單胞菌；抗生性代謝產(chǎn)物；生物防治

在農(nóng)作物的種植過(guò)程中，土傳病害是一類(lèi)重要的病害，引起土傳病害的病原菌會(huì)侵染植物根部，從而造成重大的經(jīng)濟(jì)損失[1]。很多人會(huì)噴灑一些常規(guī)的化學(xué)農(nóng)藥來(lái)對(duì)抗農(nóng)作物土傳病害，取得了一定的效果，但會(huì)將殘留污染留存在農(nóng)作物中，傷害非靶標(biāo)生物的同時(shí)，引起病原菌的抗藥性。因此，科研人員十分關(guān)注生物防治的研究[2]。

一些土壤中的細(xì)菌滋生在植物根須周?chē)种撇『?，這種有利于植物生長(zhǎng)且對(duì)營(yíng)養(yǎng)吸收有促進(jìn)作用的細(xì)菌稱(chēng)為植物根際促生菌 (Plantgrowthpromotingrhizobacteria，PGPR)，它是存在于植物根際，對(duì)植物生長(zhǎng)有促進(jìn)和保護(hù)作用的生防菌，主要分為直接和間接作用。直接促生作用是指PGPR能直接合成某種供植物利用的化合物或幫助植物從環(huán)境中吸收某些營(yíng)養(yǎng)物；間接促生作用是指PGPR能減輕或避免某種或幾種病原微生物對(duì)植物的傷害[3-4]。

1 熒光假單胞菌中的抗生性代謝產(chǎn)物

能夠代謝出10多種抗生性次級(jí)代謝產(chǎn)物的熒光假單胞菌是一種非常重要的植物根際促生菌，在生物防菌劑的生物防治及開(kāi)發(fā)應(yīng)用方面擁有巨大的前景[5]。熒光假單胞菌用來(lái)抑制植物病害的重要指標(biāo)是代謝產(chǎn)生的抗生素。它們可以產(chǎn)生的抗生素有粘質(zhì)酰胺(Viscosinamide)、1-羧基吩嗪(1-PhenazinecarboxylicacidPCA)[6]、卵菌素A(OomycinA)、藤黃綠膿菌素(Pyoluteorin，PLT)、氰化氫(HydrogencyanideHCN)、2，4-二乙酰藤黃酚(2，4-Diacetylphloroglucinol，DAPG)、綠膿菌素(Pyocyanin)、硝吡咯菌素(Pyrrolnitrin，Pm)等。所產(chǎn)生的這些抗生素都有一定的特異性和專(zhuān)一性，能夠選擇有性針對(duì)性地抑制植物病害[7-11]。

其中，1-羧基吩嗪為吩嗪類(lèi)物質(zhì)，作為電子載體在細(xì)胞內(nèi)傳遞電子到定向細(xì)胞，使細(xì)胞內(nèi)超氧化物自由基增加，使靶向細(xì)胞中毒、衰亡。硝吡咯菌素是一種氨基糖甘類(lèi)的抗生性代謝產(chǎn)物，在濃度偏低時(shí)會(huì)破壞磷酸化的偶聯(lián)機(jī)制，相反，在濃度較高時(shí)隔斷黃素蛋白參與呼吸作用及阻礙細(xì)胞色素C中的電子遷移。藤黃綠膿菌素和2，4-二乙酰藤黃酚作為聚酮類(lèi)代謝產(chǎn)物，具有一定的抗菌活性，這樣的抗生素一般在較低的濃度下就可以阻止病原微生物的生長(zhǎng)。

2 熒光假單胞菌中抗生性代謝產(chǎn)物的研究

Guuterson等人1986年首次從P.fluorescensHV37a菌株中克隆得到抗生素基因，之后各種能合成抗生素基因的菌株得到確定。目前，國(guó)內(nèi)外研究主要體現(xiàn)在粘質(zhì)酰胺、1-羧基吩嗪、硝吡咯菌素、藤黃綠膿菌素、氰化氫和2，4-二乙酰藤黃酚這些代謝產(chǎn)物上。利用對(duì)M18的rsmA基因進(jìn)行突變，使熒光假單胞菌株P(guān)lt的產(chǎn)量比野生型熒光假單胞菌株提高了10倍。Bainton等將熒光假單胞菌F113中的Phl基因轉(zhuǎn)入熒光假單胞菌SBW25中，SBW25雖然自身沒(méi)有Phl生物防治活性，但熒光假單胞菌株在多種植物根部都顯示出很好的定殖能力，最終得到了一種工程菌株，不僅成功表達(dá)出Phl基因，且具有更好的定殖能力。王平[12]等報(bào)道了一株熒光假單胞菌，此菌能分泌鐵載體，從而抑制油菜核病菌。蔣繼志[13]等分離得到的熒光假單胞菌有防治致病疫霉菌的作用。周宇平[14]等利用基因技術(shù)使熒光假單胞菌2P24中phlF基因缺失突變，結(jié)果發(fā)現(xiàn)突變體的Phl表達(dá)量提高了492倍。Ramettel發(fā)現(xiàn)熒光假單胞菌能夠產(chǎn)生藤黃酚等次級(jí)代謝產(chǎn)物，該次級(jí)代謝產(chǎn)物能抑制煙草根黑腐病的發(fā)生。熒光假單胞菌抗病機(jī)理主要是通過(guò)產(chǎn)生抗生性次級(jí)代謝產(chǎn)物等生物活性物質(zhì)來(lái)抑制病原菌生長(zhǎng)。

3 次生抗性代謝物

熒光假單胞菌還產(chǎn)生許多與植物病原菌具有拮抗作用的其他具有抗性的次生代謝物。如熒光假單胞菌產(chǎn)生的氰化氫(HCN)能影響植物的病原菌。M. Nagara jkumar等發(fā)現(xiàn)熒光假單胞菌PfMDU2菌株中產(chǎn)生對(duì)植物病原菌產(chǎn)生的草酸具有解毒作用的乙二酸，能夠抗由水稻紋枯病菌(Rhizoctoniasolani)引起的水稻疾病[14]。Nielsen等發(fā)現(xiàn)對(duì)病原菌Rhizoctoniasolini有拮抗作用的熒光假單胞菌96.578產(chǎn)環(huán)形脂肽[15]；在沙質(zhì)土壤中甜菜的根際發(fā)現(xiàn)約60%的熒光假單胞菌產(chǎn)循環(huán)脂肽CLPs，這些CLPs具有極強(qiáng)的生物表面活性劑特性，表現(xiàn)出抗生素特性，能夠抗植物病原菌[16]。熒光假單胞菌還能產(chǎn)生木聚糖酶、溶菌酶和胞外殼聚糖酶及能夠分解真菌細(xì)胞壁的幾丁質(zhì)酶等。

當(dāng)今，科研人員普遍認(rèn)可利用生物技術(shù)對(duì)熒光假單胞菌進(jìn)行遺傳改造，從而進(jìn)行生物防治和生防菌劑開(kāi)發(fā)，前景美好，但這樣的前景需要建立在分離篩選具有生防作用的熒光假單胞菌等基礎(chǔ)工作上。

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Fluorescentpseudomonasantibiosis research progress of metabolites

WU Qiong, WANG Dong-kai, WANG Lei, CAO Di-fei, LI Yao,HUANG Guo-qing, XUE Jia-ying, SUN Yao, ZHAO Jin-hai

(Institute of Advanced Technology, Heilongjiang Academy of Sciences, Harbin 150020, China)

Fluorescentpseudomonadhas prevention and cure function to a variety of plant disease, the colonization offluorescentpseudomonasis in plant rhizosphere, mainly inhibits the growth of pathogenic bacteria by eating iron element of Fe3+antagonism between competition and antibiotics and protects plants from damage caused by germs. The disease-resistant ability offluorescentpseudomonadand its strain can produce many kinds of active substances were reported in many countries in the world.Fluorescentpseudomonadantibiosis research progress of metabolites was discussed in this paper.

Fluorescentpseudomonas; Metabolites; Biological control

2016-10-20

黑龍江省科學(xué)院青年基金項(xiàng)目

吳瓊(1985-)，女，助理研究員，碩士。

S476.1

A

1674-8646(2017)02-0058-02