韓 帥

（芮城縣人民醫(yī)院，山西 運城 044600）

尿液培養(yǎng)與自動化分析儀研究

韓 帥

（芮城縣人民醫(yī)院，山西 運城 044600）

泌尿系統(tǒng)包括腎臟、輸尿管、膀胱及尿道。尿液在腎臟中形成，經(jīng)輸尿管，膀胱暫存，最后由尿道排出。血液中代謝物由腎絲球過濾流入鮑氏囊，腎絲球過濾液經(jīng)近曲小管再吸收鹽類、葡萄糖及其他代謝產(chǎn)物，經(jīng)亨利氏環(huán)再吸收鈉、鉀及水分，經(jīng)遠曲小管進行最后的再吸收以維持水分及電解質(zhì)與體內(nèi)酸堿平衡。最后，腎絲球過濾液進入集尿小管進行尿液濃縮，由膀胱暫存，經(jīng)尿道排出。自動化尿液分析儀可大量篩檢，節(jié)省時間與勞力并具良好的再現(xiàn)性。大部分自動尿液化分析儀與實驗室信息系統(tǒng)聯(lián)機，增進報告處理效率。自動化生化尿液分析儀與自動化尿沉渣鏡檢分析儀。

自動化尿液分析儀；研究

1 自動化尿液生化分析儀

自動化生化分析儀使用分光亮度計檢測尿液試紙試劑區(qū)的光反射，依據(jù)光線反射強弱判定試劑區(qū)顏色強度。雖然各家儀器原理皆使用此反射比分光亮度測定法，但所使用的尿液試紙材料與儀器的內(nèi)部裝置各有所差異。生化分析儀，使用發(fā)光二極管透過濾光鏡產(chǎn)生特定波長的單色光源照射試劑區(qū)，透過反射亮度計測定，藉由測定反應波長與校正波長，以減少尿液顏色的干擾。比重經(jīng)由折射率確定，而澄清度經(jīng)由透射光與散射光的測量來偵測。自動化吸取檢體樣本，且自動清洗吸液管，樣本體積最少只需2 ml。Urinalysis2400則是藉由發(fā)光二極管射入的角度而產(chǎn)生不同的波長，反射光經(jīng)由光源檢測器偵測，且由類比/數(shù)位轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)換輸出，其反射光的強弱與反應結(jié)果顏色強度成正比。藉此偵測各項試驗區(qū)反應結(jié)果。尿液試紙上白色補償片，藉由470 nm、550 nm和610 nm，這三種波長的反射比值來測定尿液顏色。尿液生化分析儀（CA，USA），使用紅、綠、藍的三色發(fā)光二極管照射試驗區(qū)，接著于15秒內(nèi)捕捉八次的影像顏色變化，藉以判讀試驗區(qū)呈色反應。ClinitekAtlasPRO12尿液試紙卷增加肌酸酐與P/Cratio項目，由實驗結(jié)果顯示P/Cratio可以有效提升檢測為蛋白尿的敏感性與特異性。評估ClinitekAtlas與Urisys2400篩選泌尿道感染的執(zhí)行確效，自動化生化分析儀是否可以用以排除不必要的尿液培養(yǎng)，仍然是有待確認。相較于其他兩臺儀器，iChemVelocity為IRISdiagnostic新推出的儀器，可以與IRISiQ200Elite/Sprinturinalysissystem合并使用，減少上樣的時間，研究指出，iChemVelocity檢驗白血球酯酶與血紅素的敏感性需要改進，但其檢測尿蛋白與酸堿度相較于ClinitekAtlas是較精確的。

2 自動化尿液鏡檢分析儀

IRISiQ200使用自動流體影像系統(tǒng)，利用影像系統(tǒng)拍攝流經(jīng)的單顆微粒，接著運用自動微粒辨識軟件，鑒別13種微粒并定量結(jié)果。與人工鏡檢比較后，白血球、紅血球與上皮細胞的鑒別是可被信任的，酵母菌與球菌菌叢的辨認是不準確的，并且在畸形的紅血球與圓柱體的辨認，仍需經(jīng)專業(yè)人員確認，增加準確性）。

SysmexUF-1000i使用二極管雷射為主的熒光流式細胞儀系統(tǒng)，并用流體聚焦電導法，以阻抗檢測、光散射、表面及內(nèi)部復雜度與熒光染色去辨別流體中的微粒并計數(shù)。評估UF-1000i辨別尿液微粒的精確性，與人工鏡檢結(jié)果比較。其辨別白血球、紅血球、圓柱體、細菌與鱗狀上皮細胞的再現(xiàn)性是良好的，但病理性的圓柱體和酵母菌判別仍然需要改善。MenariniSediMAX為全自動尿沉渣鏡檢分析儀。尿液樣本注入比色皿中，藉由離心使尿液微粒單層排列于底部，藉由數(shù)字影像系統(tǒng)拍攝和APRTM軟件鑒別尿液中14種微粒。比較自動化尿沉渣影像系統(tǒng)與人工尿沉渣鏡分析或與UF-100使用未經(jīng)前處理尿液樣本之間的結(jié)果，顯示SediMAX辨認紅血球、白血球、鱗狀上皮細胞、酵母菌、細菌與草酸鈣，這些項目是可信任的。但是，病理性圓柱體與非鱗狀上皮細胞的辨認仍然需要改進。

總歸自動化尿液鏡檢分析系統(tǒng)，對于白血球、紅血球、上皮細胞與細菌的辨認是可被信任的，但病理性圓柱體與腎小管上皮細胞的辨認，于現(xiàn)今常規(guī)的檢測，仍需專業(yè)的人員進行確認，以改善診斷確效。

3 尿液培養(yǎng)

尿液培養(yǎng)為泌尿道感染診斷的標準方法，常合并抗生素藥敏試驗。尿液培養(yǎng)當單一病原菌高于103～105 CFU/ml將定義為泌尿道感染。美國疾病控制與預防中心（centersfo rdiseasecontrolandprevention）的診斷指標指示，當病患年齡小于65歲且有發(fā)燒（＞38℃）、頻尿、尿痛等癥狀時，尿液分析結(jié)果應為白血球酯酶與亞硝酸鹽陽性，膿尿與細菌尿發(fā)生，且尿液培養(yǎng)結(jié)果，需單一菌種菌落數(shù)為103～105 CFU/ml判斷為有癥狀的泌尿道感染（SymptomaticUTI）。而無癥狀時，尿液培養(yǎng)結(jié)果，需單一菌種菌落數(shù)大于105 CFU/ml，稱為泌尿道感染比較各家尿液試紙篩選泌尿道感染的敏感性與特異性，合并白血球酯酶與亞硝酸鹽結(jié)果，ClinitekAtlas為71.7%/99.1%，Urisys2400為70.8%/97.2%。使用UF-1000i使用白血球與細菌計數(shù)設(shè)置臨界值（cutoffvalue）用于篩選泌尿道感染，各篇研究所使用的臨界點各有不同，白血球臨界值從15/μl～150/μl，細菌的臨界值從30/μl～8000/μl。Shangetal，整合分析（meta-analysis）UF-1000i篩選泌尿道感染的敏感性、特異性與接受者操作特征曲線下的面積（areaunderreceiveroperatingcharacteristi ccurve，AUC）如下：白血球為87%/66%/0.92，細菌為92%/56%/0.93，使用UF-1000i用于泌尿道感染的篩選是可行的。尿液培養(yǎng)雖然為診斷泌尿道感染的標準方法，但歷時較久，且大部分常規(guī)檢驗尿液結(jié)果為陰性，因此常導致不必要的尿液培養(yǎng)與抗生素的使用，不僅耗費金錢也耗費人力。因此，使用尿液分析初步篩檢排除泌尿道感染陰性的檢體，一直是實驗室致力的目標。研究指出，尿液培養(yǎng)，105 CFU/ml為陽性情況下，UF-1000i，以230/μl細菌當作臨界值，其敏感性、特異性各為95%/80%，并且可以有效減少52%的尿液培養(yǎng)檢體，其中偽陰性檢體占3.7%（Table18），但用于常規(guī)尿液檢測，在大量的尿液檢體篩檢時，此法敏感性并非百分之百，是否適用臨床上排除的尿液培養(yǎng)仍然是需要考慮的。而由iQ200的結(jié)果則顯示，合并尿液試紙與iQ200結(jié)果，亞硝酸鹽、白血球與細菌皆陰性時，其敏感性、特異性分別為87.2%/77.2%，用于排除泌尿道感染（NLR=0.17），可減少73%尿液培養(yǎng)檢體（n=433），其中偽陰性檢體占1.1%（n=5）。

4 總 結(jié)

泌尿感染源于環(huán)境中病原微生物的感染。泌尿道的感染是時常發(fā)生的。無癥狀的尿道感染，可透過人體免疫力清除，但如未清除導致持續(xù)性的感染，則會向上蔓延導致膀胱炎與腎盂腎炎的發(fā)生。超過65歲的老人，易增加發(fā)生泌尿道感染的頻率，其他泌尿道感染的危險因素，包括婦女、腎臟衰竭、糖尿病和導尿的病患。意大利的診斷中心研究指出，常遇到的泌尿道感染菌叢，以E.coli占大宗（67.6%），其次為K.pneumoniae（8.8%），腸球菌（6.3%），奇異變形桿菌（Proteusmirabilis，P.mirablis）（2.5%），綠膿桿菌（Pseudomonasaeruginosa，P.aeruginosa）（2.5%）及S.saprophyticus（2.3%），這些菌叢就占感染的90%，并且革蘭氏陰性菌感染占總感染的90.8%。

[1] 尿液分析的質(zhì)量保證[A].楊國香.中華醫(yī)學會第七次全國檢驗醫(yī)學學術(shù)會議資料匯編[C].2008.

[2] 尿液分析的干擾因素及值得注意的若干問題[A].張守柱.中華醫(yī)學會第七次全國檢驗醫(yī)學學術(shù)會議資料匯編[C].2008.

R446.12

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ISSN.2095-8242.2017.24.4726.02