趙金香+李耀華+謝萍

摘要：目的 觀察黃葵膠囊對糖尿病腎病維持性血液透析患者微炎癥和氧化應(yīng)激狀態(tài)的治療作用。方法 選擇2014年甘肅省人民醫(yī)院透析時間>6個月的糖尿病腎病患者46例，隨機分為觀察組和治療組各23例，同時選取20名健康體檢者作為對照組。觀察組給予常規(guī)枸櫞酸碳酸氫鹽血液透析治療，每次4 h，每周3次；治療組在此基礎(chǔ)上加用黃葵膠囊，每次2.5 g，每日3次，口服。觀察組和治療組均治療8周，檢測治療前后血漿中炎癥指標高敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）、白細胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞（WBC）及氧化應(yīng)激指標丙二醛（MDA）、循環(huán)晚期氧化蛋白產(chǎn)物（AOPP）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）變化。結(jié)果 與對照組比較，觀察組和治療組治療前hs-CRP、IL-6、TNF-α、WBC、MDA和AOPP水平明顯升高（P<0.01），SOD和GSH-Px水平明顯降低（P<0.01）；觀察組和治療組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。治療后，觀察組IL-6、hs-CRP、MDA和AOPP水平明顯升高（P<0.05），GSH-Px和SOD水平明顯降低（P<0.05），TNF-α和WBC無顯著變化（P>0.05）；治療組IL-6、TNF-α、hs-CRP、WBC、MDA和AOPP水平明顯降低（P<0.01），SOD和GSH-Px水平均明顯升高（P<0.01）；治療后觀察組與治療組上述各指標比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。結(jié)論 糖尿病腎病維持性血液透析患者體內(nèi)普遍存在微炎癥和氧化應(yīng)激狀態(tài)，黃葵膠囊可改善患者微炎癥和氧化應(yīng)激狀態(tài)。

關(guān)鍵詞：黃葵膠囊；糖尿病腎病；維持性血液透析；微炎癥；氧化應(yīng)激

糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）是導(dǎo)致終末期腎病（end-stage renal disease，ESRD）的主要原因，也是糖尿病最常見的慢性微血管并發(fā)癥和死亡原因，30%的糖尿病患者最終發(fā)展為DN[1]。隨著經(jīng)濟的發(fā)展和人民生活水平不斷提高，2型糖尿病發(fā)病率逐年增高，國際糖尿病聯(lián)盟預(yù)計，到2030年全球?qū)⒂刑悄虿』颊?.52億[2]，DN數(shù)量將隨之增加。研究表明，DN患者普遍存在微炎癥與氧化應(yīng)激狀態(tài)，誘導(dǎo)了腎組織損傷，并導(dǎo)致多種透析相關(guān)并發(fā)癥發(fā)生[3]。因此，積極控制微炎性反應(yīng)和改善氧化應(yīng)激狀態(tài)，可能延緩DN進展，降低DN并發(fā)癥的發(fā)生，提高患者生存質(zhì)量。黃蜀葵最早記載于《嘉佑本草》，性味甘、寒，入心、腎、膀胱經(jīng)，有利水通淋、清熱解毒之功效；《中藥辭?！穂4]記載其微甘、涼，有清熱利濕、拔毒排膿之功效?，F(xiàn)代藥理研究表明，黃蜀葵主要化學(xué)成分為5種黃酮類化合物單體，具有抑菌、抗炎、抗凝、降脂、抗氧化、降低免疫反應(yīng)及炎癥復(fù)合物沉積、減輕腎小管損傷等作用[5]。本研究探討黃葵膠囊對DN維持性血液透析患者微炎癥和氧化應(yīng)激狀態(tài)的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2014年1-12月甘肅省人民醫(yī)院血液凈化中心透析時間>6個月的DN患者46例，按住院號隨機分為觀察組和治療組各23例，其中男24例，女22例，年齡43～69歲，平均年齡（56.1±8.3）歲。另設(shè)體檢中心健康體檢者20例作為對照組。觀察組和治療組在性別、平均年齡、平均透析時間、體質(zhì)量、血紅蛋白（Hb）、血清白蛋白（ALB）、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、空腹血糖（FBG）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）、24 h尿蛋白定量、利尿藥物使用比例和ACEI/ARB使用比例上差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性，見表1。本研究經(jīng)甘肅省人民醫(yī)院倫理委員會審批（審批號syll20140078

2 納入標準

①透析時間>6個月，病情穩(wěn)定；②近期無急性感染及炎癥反應(yīng)；③無活動性風(fēng)濕性疾?。虎軣o慢性消耗性疾病如腫瘤、結(jié)核等；⑤無嚴重的肝臟、血液系統(tǒng)疾??；⑥過去1個月內(nèi)未使用維生素C、維生素E、大黃、免疫抑制劑及其他抗氧化藥物；⑦簽署知情同意書。

1.3 排除標準

①病情進展需要緊急終止者；②出現(xiàn)嚴重不良反應(yīng)，如對黃葵膠囊過敏、難以治療的消化道癥狀等；③以任何理由要求退出本試驗者。

1.4 治療方法

觀察組和治療組均予血液透析[血液透析機，瑞典金寶公司AK 200 Ultra S型，高通量聚砜膜透析器（2.0 m2）]。采用枸櫞酸碳酸氫鹽透析液（含1.25～1.5 mmol/L鈣離子、2.0 mmol/L鉀離子、135～145 mmol/L鈉離子），透析液流量500 mL/min，血流量200～300 mL/min，每周3次，每次4 h。同時給予藥物控制血糖、血脂、血壓，糾正貧血、電解質(zhì)紊亂和補鈣等常規(guī)治療。治療組在透析和常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，加用黃葵膠囊（江蘇蘇中藥業(yè)集團股份有限公司，批號14083121，0.5 g/粒），每次5粒，每日3次，口服。2組均治療8周。

1.5 觀察指標

對照組于研究開始后、觀察組和治療組于治療前后分別檢測丙二醛（MDA）、循環(huán)晚期氧化蛋白產(chǎn)物（AOPP）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、高敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）、白細胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞（WBC）。血液標本采集前禁食8～10 h，次日晨起空腹采靜脈血5 mL，血清學(xué)檢測標本30 min內(nèi)分離血清，-80 ℃冰凍保存?zhèn)錂z；Hb和WBC用含EDTA血常規(guī)試管收集標本，采用深圳邁瑞B(yǎng)C-2600全自動血液細胞分析儀測定；ALB、FBG、HbA1c、TC、TG、BUN和SCr采用美國貝克曼CX7+型全自動生化儀檢測；血清AOPP、IL-6和TNF-α采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測，試劑盒由北京北方生物研究所提供；SOD、GSH-Px和MDA采用日本UV-2401PC紫外分光光度儀測定，試劑盒由南京建成科技有限公司提供；hs-CRP采用透射免疫比濁法檢測，試劑盒由德國德賽診斷公司提供。endprint

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行分析。計量資料以 —x±s表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以樣本數(shù)（%）表示，采用χ2檢驗。檢驗結(jié)果判定使用雙側(cè)檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組治療前后微炎癥指標比較

治療前與對照組比較，觀察組和治療組hs-CRP、IL-6、TNF-α和WBC水平均明顯升高（P<0.01），觀察組與治療組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。治療后，與本組治療前比較，觀察組hs-CRP、IL-6水平升高（P<0.05），TNF-α、WBC水平無明顯變化（P>0.05）；治療組hs-CRP、IL-6、TNF-α和WBC水平均明顯降低（P<0.01）。治療后，觀察組和治療組hs-CRP、IL-6、TNF-α、WBC比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。結(jié)果見表2。

2.2 2組治療前后氧化應(yīng)激指標比較

治療前與對照組比較，觀察組和治療組MDA、AOPP水平升高（P<0.01），SOD、GSH-Px水平降低（P<0.01）；觀察組與治療組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。治療后，與本組治療前比較，觀察組MDA、AOPP水平升高（P<0.05），SOD、GSH-Px水平降低（P<0.05）；治療組MDA、AOPP水平明顯降低（P<0.01），SOD、GSH-Px明顯升高（P<0.01）。治療后觀察組和治療組MDA、AOPP、SOD、GSH-Px比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。

3 討論

DN屬中醫(yī)學(xué)“消渴”合并“水腫”“尿濁”“關(guān)格”“腎萎”等范疇。病因病機主要為消渴患者飲食不節(jié)，嗜食肥甘厚味，濕熱內(nèi)蘊，邪毒入絡(luò)，最喜傷腎，腎失封藏，精微下泄或氣化失司，而致水液潴留[6]。黃葵膠囊具有清利濕熱、解毒消腫之功效，主治慢性腎炎濕熱證，癥見浮腫、腰痛、蛋白尿、血尿、舌苔黃膩等，與DN病機相吻合。研究表明，黃蜀葵中黃酮類通過抑制caspase-3和caspase-8的表達，減少ED1+和ED3+巨噬細胞浸潤，可清除氧自由基，降低脂質(zhì)過氧化酶水平，保護腎臟免受損害[7]。

近年來，越來越多的研究表明微炎癥和氧化應(yīng)激反應(yīng)在DN發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著極為重要的作用[3，8]。DN患者處于高血糖、脂代謝紊亂狀態(tài)，一方面可以協(xié)同刺激腎臟固有細胞產(chǎn)生大量炎性因子，如CRP、IL-6等，激活蛋白激酶C通路、絲裂原活化蛋白激酶等信號通路，促進下游的各種致纖維化細胞因子，如轉(zhuǎn)化生長因子-β、TNF-α等基因轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)表達，出現(xiàn)細胞凋亡、細胞外基質(zhì)過度沉積、系膜細胞增生、腎小球基底膜電荷屏障受損；另一方面產(chǎn)生過多的活性氧簇產(chǎn)物，如MDA、超氧陰離子、羥自由基等，這些氧化應(yīng)激產(chǎn)物不能迅速被腎組織內(nèi)抗氧化物質(zhì)如SOD、GSH-Px等清除，晚期糖基化終產(chǎn)物、AOPP增多，繼而激活多元醇通路，使葡萄糖大量轉(zhuǎn)化為山梨醇，通過滲透性作用對腎臟細胞產(chǎn)生損傷，微炎癥和氧化應(yīng)激相互作用最終引起DN[8-9]。由于DN維持性血液透析患者免疫功能紊亂、繼發(fā)感染、透析膜和透析液的生物不相容性，使其更易處于微炎癥和氧化應(yīng)激狀態(tài)[10]，目前認為微炎癥和氧化應(yīng)激狀態(tài)可作為判斷DN預(yù)后的可靠指標，改善微炎癥和氧化應(yīng)激是治療DN的新靶點[11]。

本研究結(jié)果顯示，與健康志愿者比較，治療前觀察組和治療組微炎癥因子hs-CRP、IL-6、TNF-α和WBC水平均升高，氧化應(yīng)激產(chǎn)物AOPP和MDA水平升高，抗氧化物SOD和GSH-Px水平下降，提示DN維持透析患者處于微炎癥和氧化應(yīng)激狀態(tài)，與Babaei M等[12]研究結(jié)果一致。治療8周后，觀察組炎癥因子hs-CRP和IL-6水平升高，氧化應(yīng)激產(chǎn)物MDA和AOPP水平升高，抗氧化物GSH-Px和SOD水平降低，表明血液透析加劇了微炎癥狀態(tài)和氧化應(yīng)激狀態(tài)；TNF-α和WBC治療前后無明顯變化，可能與患者免疫功能低下有關(guān)。治療組炎癥因子IL-6、TNF-α、hs-CRP、WBC水平均明顯降低，氧化應(yīng)激產(chǎn)物MDA、AOPP水平明顯下降，抗氧化物SOD、GSH-Px明顯升高，說明黃葵膠囊具有降低炎癥氧化應(yīng)激的作用。毛志敏等[13]研究發(fā)現(xiàn)，黃葵膠囊能抑制DN氧化應(yīng)激，改善腎纖維化，本研究也發(fā)現(xiàn)黃葵具有同樣作用。

本研究表明，DN維持性血液透析患者體內(nèi)存在微炎癥和氧化應(yīng)激狀態(tài)，黃葵膠囊改善了微炎癥和氧化應(yīng)激狀態(tài)，為DN治療提供了新的思路，其機制還有待進一步探討。同時，本研究樣本例數(shù)偏少，研究歷時也較短，需進行多中心隨機對照試驗，隨訪觀察長期療效，進行遠期生存分析。

參考文獻：

[1] AHN J H， YU J H， KO S H， et al. Prevalence and determinants of diabetic nephropathy in Korea： Korea national health and nutrition examination survey[J]. Diabetes Metab J，2014，38（2）：109-119.

[2] WHITING D R， GUARIGUATA L， WEIL C， et al. IDF diabetes atlas： global estimates of the prevalence of diabetes for 2011 and 2030[J]. Diabetes Res Clin Pract，2011，94（3）：311-321.

[3] MIMA A. Inflammation and oxidative stress in diabetic nephropathy：new insights on its inhibition as new therapeutic targets[J]. J Diabetes Res，2013，2013：248563.endprint