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        桂西地區(qū)骨關(guān)節(jié)結(jié)核患者治療前后血清IL-10和IL-18水平的變化及臨床意義*

        2017-03-01 02:48:37隆昕穎藍(lán)常貢唐毓金謝克恭廖林波
        重慶醫(yī)學(xué) 2017年5期
        關(guān)鍵詞:右江骨關(guān)節(jié)抗結(jié)核

        農(nóng) 峰,隆昕穎,藍(lán)常貢,唐毓金,謝克恭,廖林波

        (1.右江民族醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)院,廣西百色 533000;2.廣西壯族自治區(qū)百色市疾病預(yù)防控制中心 533000; 3.右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院脊柱骨病外科,廣西百色 533000)

        桂西地區(qū)骨關(guān)節(jié)結(jié)核患者治療前后血清IL-10和IL-18水平的變化及臨床意義*

        農(nóng) 峰1,隆昕穎2,藍(lán)常貢3△,唐毓金3,謝克恭3,廖林波1

        (1.右江民族醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)院,廣西百色 533000;2.廣西壯族自治區(qū)百色市疾病預(yù)防控制中心 533000; 3.右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院脊柱骨病外科,廣西百色 533000)

        目的 檢測骨關(guān)節(jié)結(jié)核患者治療前后血清白細(xì)胞介素-10(IL-10)和白細(xì)胞介素-18(IL-18)水平的變化,以研究其臨床意義。方法 選擇右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院2014年11月至2015年12月收治的39例骨關(guān)節(jié)結(jié)核患者作為觀察組,觀察組均采用正規(guī)抗結(jié)核藥物聯(lián)合外科手術(shù)的綜合治療,同期在體檢中心進(jìn)行健康體檢的48名健康者作為對照組,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測對照組,觀察組治療前及綜合治療2周后外周血血清IL-10和IL-18的水平。結(jié)果 與對照組比較,觀察組在治療前及綜合治療2周后血清IL-10和IL-18水平均顯著增高(P<0.05),而綜合治療2周后血清IL-10和IL-18水平明顯低于治療前(P<0.05)。結(jié)論 IL-10和IL-18可能參與骨關(guān)節(jié)結(jié)核的發(fā)生與發(fā)展,其檢測可預(yù)測正規(guī)抗結(jié)核藥物聯(lián)合外科手術(shù)治療骨關(guān)節(jié)結(jié)核的療效。

        結(jié)核,骨關(guān)節(jié);白細(xì)胞介素-10;白細(xì)胞介素-18;酶聯(lián)免疫吸附測定

        骨關(guān)節(jié)結(jié)核是一種由結(jié)核桿菌感染引起的最常見的肺外結(jié)核,好發(fā)于青壯年,該病具有起病隱匿,致殘率高及臨床藥物治療效果欠佳等特點(diǎn)。隨著結(jié)核病流行的加劇,骨關(guān)節(jié)結(jié)核的發(fā)病率亦明顯增加。骨關(guān)節(jié)結(jié)核在特殊部位(如脊柱關(guān)節(jié)結(jié)核)如不及時(shí)治療,常造成關(guān)節(jié)功能喪失或截癱等嚴(yán)重后果,影響患者的生活質(zhì)量及生命,給社會(huì)造成巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[1]。然而,骨關(guān)節(jié)結(jié)核的發(fā)病機(jī)制至今尚未明確。白細(xì)胞介素(IL)-10是一種具有抗炎特性的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子,研究表明,其參與了肺結(jié)核的免疫調(diào)節(jié)[2-3]。IL-18是一種促炎細(xì)胞因子,屬于細(xì)胞因子IL-1家族,其無活性的前體需經(jīng)過1b轉(zhuǎn)化酶的作用下才可形成有活性的細(xì)胞因子。近年來,IL-18參與肺結(jié)核發(fā)生與發(fā)展的研究已經(jīng)得到了證實(shí)[4-5]。然而,目前國內(nèi)外關(guān)于IL-10和IL-18在正規(guī)應(yīng)用抗結(jié)核藥物聯(lián)合外科手術(shù)治療骨關(guān)節(jié)結(jié)核的研究鮮見報(bào)道。本研究采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測39例桂西地區(qū)骨關(guān)節(jié)結(jié)核患者在治療前后及48名體檢健康者血清IL-10和IL-18的表達(dá)情況,結(jié)合C反應(yīng)蛋白(C reactive protein,CRP)和紅細(xì)胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)來分析相關(guān)性,以初步探討IL-10和IL-18在骨關(guān)節(jié)結(jié)核疾病中的作用。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選擇2014年11月至2015年12月在右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院住院治療的39例桂西地區(qū)骨關(guān)節(jié)結(jié)核患者作為觀察組,男19例,女20例,年齡15.00~59.00歲,平均(43.03±15.15)歲,病程4.00~23.00個(gè)月,平均(12.65±4.93)個(gè)月。其中脊柱結(jié)核23例(頸椎1例,胸椎10例,腰椎12例),臨床上主要表現(xiàn)為脊柱疼痛伴明顯的活動(dòng)障礙,脊髓神經(jīng)根受壓迫及寒性膿腫等;其他部位結(jié)核16例(髖關(guān)節(jié)結(jié)核11例,膝關(guān)節(jié)結(jié)核3例,其他關(guān)節(jié)結(jié)核2例),臨床上主要表現(xiàn)為關(guān)節(jié)疼痛、腫脹伴明顯活動(dòng)受限。觀察組均采用正規(guī)抗結(jié)核藥物聯(lián)合外科手術(shù)的綜合治療。選擇同期在右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院體檢中心進(jìn)行健康體檢的48名健康者作為對照組,其中男21名,女27名,年齡22~57歲,平均(41.06±13.40)歲;入選者近期無結(jié)核病接觸史,各項(xiàng)臨床檢查指標(biāo)及影像學(xué)未見異常。

        1.2 病例納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn):患者住院治療前未接受過抗結(jié)核藥物治療,術(shù)后病理診斷均符合骨關(guān)節(jié)結(jié)核,病原學(xué)檢查提示膿液分泌分離培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌陽性或抗酸染色陽性。受試者均為廣西籍貫,并且長期居住于桂西地區(qū)。排除標(biāo)準(zhǔn):曾患有或患有其他臟器的結(jié)核病(如肺結(jié)核)、系統(tǒng)性免疫缺陷疾病(如系統(tǒng)性紅斑狼瘡)、遺傳性疾病(如珠蛋白生成障礙性貧血),長期使用激素,合并影響免疫系統(tǒng)的疾病(如創(chuàng)傷)。本研究經(jīng)右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn),患者及其家屬均知情并簽署知情同意書。

        1.3 方法

        1.3.1 標(biāo)本收集 于清晨用促凝管從受試者肘正中靜脈取空腹靜脈血4 mL,室溫放置0.5 h,2 000 r/min離心15 min,收集血清后分裝放置-80 ℃冰箱保存待檢測。觀察組患者血液分別于治療前、綜合治療2周后各抽取1次。

        1.3.2 血清IL-10和IL-18水平檢測 IL-10和IL-18 ELISA試劑盒由杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份有限公司提供,操作步驟嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

        1.3.3 C反應(yīng)蛋白(CRP)及紅細(xì)胞沉降率(ESR)水平的檢測 CRP及ESR水平由分別使用日本7600全自動(dòng)生化分析儀和意大利Test1全自動(dòng)血沉分析儀進(jìn)行檢測。

        2 結(jié) 果

        2.1 對照組和觀察組治療前后IL-10、IL-18、ESR及CRP的表達(dá)水平 觀察組在治療前后IL-10、IL-18、ESR及CRP的含量均顯著高于對照組(P<0.01);觀察組治療后IL-10、IL-18、ESR及CRP的水平均明顯低于治療前(P<0.01),見表1。

        表1 對照組和觀察組治療前后IL-10、IL-18、ESR及CRP水平

        a:P<0.01,與對照組比較;b:P<0.01,與觀察組治療前比較。

        2.2 觀察組治療前后IL-10、IL-18水平分別與ESR及CRP水平的相關(guān)性 經(jīng)Pearson線性相關(guān)性分析,觀察組在治療前后血清IL-10水平與ESR及CRP水平均無明顯線性相關(guān)(前:r=-0.121,P=0.463和r=0.076,P=0.646;后:r=-0.153,P=0.351和r=-0.046,P=0.782);IL-18在治療前后與ESR及CRP水平亦無明顯線性相關(guān)(前:r=-0.285,P=0.078和r=-0.117,P=0.480;后:r=0.062,P=0.708和r=0.000,P=0.999)。

        2.3 血清IL-10和IL-18標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 隨著A值的增高,標(biāo)準(zhǔn)品IL-10和IL-18的水平也隨之升高,見圖1、2。

        圖1 IL-10的標(biāo)準(zhǔn)曲線

        圖2 IL-18的標(biāo)準(zhǔn)曲線

        3 討 論

        骨關(guān)節(jié)結(jié)核的發(fā)病取決于機(jī)體的自身免疫系統(tǒng)。在骨關(guān)節(jié)結(jié)核患者機(jī)體內(nèi),其免疫系統(tǒng)處于一種失平衡狀態(tài),導(dǎo)致多種細(xì)胞因子的異常表達(dá)。而IL-10和IL-18是免疫系統(tǒng)中的重要調(diào)節(jié)細(xì)胞因子,其異常表達(dá)可能參與骨關(guān)節(jié)結(jié)核的發(fā)病機(jī)制。

        目前,已有大量研究資料顯示,血清IL-10的表達(dá)水平與骨關(guān)節(jié)結(jié)核存在密切聯(lián)系。Suzukawa等[6]研究發(fā)現(xiàn),與健康者相比較,肺結(jié)核患者血清中IL-10水平顯著增高。然而,Trifunovic等[7]和章志華[8]在結(jié)核病相關(guān)的研究中發(fā)現(xiàn)IL-10的水平較健康者顯著降低??梢娊Y(jié)核病患者IL-10水平的研究存在不同的結(jié)果。本研究發(fā)現(xiàn)觀察組在治療前后血清IL-10水平顯著高于對照組(P<0.01),與Suzukawa等[6]的研究結(jié)果基本相符合,說明骨關(guān)節(jié)結(jié)核的發(fā)病過程與IL-10啟動(dòng)的細(xì)胞免疫密切相關(guān)。其升高的可能機(jī)制是:當(dāng)結(jié)核桿菌侵入人體后,刺激機(jī)體內(nèi)的免疫應(yīng)答,激活Th2細(xì)胞、單核-巨噬細(xì)胞和B細(xì)胞等免疫細(xì)胞,從而促進(jìn)IL-10等抑制炎癥細(xì)胞因子的大量分泌。經(jīng)正規(guī)抗結(jié)核藥物聯(lián)合外科手術(shù)的綜合治療2周后,血清IL-10水平較治療前顯著降低(P<0.01),提示血清IL-10水平可作為評(píng)估正規(guī)抗結(jié)核藥物聯(lián)合外科手術(shù)治療骨關(guān)節(jié)結(jié)核有效性的敏感指標(biāo)。

        IL-18是一種具有多項(xiàng)功能和生物活性的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子,在抗感染、遺傳性疾病及腫瘤免疫的發(fā)生與發(fā)展過程中發(fā)揮至關(guān)重要的作用[9]。本研究發(fā)現(xiàn)觀察組治療前后血清IL-18水平顯著高于對照組(P<0.01),這與文獻(xiàn)[10]在肺結(jié)核方面的研究結(jié)果大致相同。其升高的機(jī)制可能是:骨關(guān)節(jié)結(jié)核患者的相關(guān)免疫細(xì)胞受到抑制,導(dǎo)致部分免疫功能發(fā)生混亂,進(jìn)而刺激機(jī)體內(nèi)的免疫應(yīng)答,活化單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)或其他免疫調(diào)節(jié)通路等,從而引起炎癥性因子IL-18的大量釋放。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),經(jīng)綜合治療2周后,血清IL-18的水平較治療前顯著降低(P<0.01),提示IL-18水平的監(jiān)測亦可有效評(píng)估正規(guī)抗結(jié)核藥物聯(lián)合外科手術(shù)效治療骨關(guān)節(jié)結(jié)核的療效。

        同時(shí),本研究檢測對照組和觀察組治療前后的CRP及ESR水平,發(fā)現(xiàn)觀察組在治療前血清CRP及ESR水平均顯著高于對照組(P<0.01),提示骨關(guān)節(jié)結(jié)核病變的炎癥反應(yīng)呈活動(dòng)性;綜合治療2周后CRP及ESR水平明顯低于治療前(P<0.01),提示骨關(guān)節(jié)結(jié)核患者的炎癥反應(yīng)逐漸減弱。此外,本研究還對觀察組在治療前及綜合治療2周后血清IL-10、IL-18水平與ESR及CRP水平進(jìn)行了相關(guān)性分析,結(jié)果顯示均無明顯線性相關(guān)(P>0.05)。這可能是IL-10、IL-18的表達(dá)水平由多種因素綜合影響的結(jié)果,如免疫調(diào)節(jié)系統(tǒng)、遺傳因素和生活環(huán)境等。因此,IL-10、IL-18水平與CRP及ESR無顯著線性相關(guān),并不能否定IL-10和IL-18在骨關(guān)節(jié)結(jié)核免疫調(diào)節(jié)中的關(guān)鍵作用。

        綜上所述,IL-10和IL-18可能在骨關(guān)節(jié)結(jié)核中扮演至關(guān)重要的作用,但具體機(jī)制尚未明確,有待進(jìn)一步研究。相信,隨著對IL-10、IL-18以及結(jié)核病發(fā)病機(jī)制的深入研究,動(dòng)態(tài)檢測IL-10和IL-18水平的變化有望成為骨關(guān)節(jié)結(jié)核疾病診斷、治療和判斷療效及預(yù)后的重要參考指標(biāo)。

        [1]Pigrau-Serrallach C,Rodriguez-Pardo D.Bone and joint tuberculosis[J].Eur Spine J,2013,22 Suppl 4:556-566.

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        ?驗(yàn)交流·

        10.3969/j.issn.1671-8348.2017.05.028

        2015年國家自然科學(xué)基金應(yīng)急管理項(xiàng)目(81541136);2012年廣西衛(wèi)生廳重點(diǎn)課題(重2012083);2011年廣西教育廳課題[桂教科2011(14)];2010年廣西衛(wèi)生廳課題(衛(wèi)生廳科研[2010]22 號(hào))。 作者簡介:農(nóng)峰(1989-),在讀碩士,主要從事脊柱與骨關(guān)節(jié)疾病的研究?!?/p>

        ,E-mail:landlong120@sina.com。

        R529.2

        B

        1671-8348(2017)05-0668-03

        2016-07-12

        2016-09-10)

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