徐 麗

(吉林省柳河縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 135300)

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牛胎兒彎曲桿菌病的臨床和實(shí)驗(yàn)室診斷

徐 麗

(吉林省柳河縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 135300)

彎曲桿菌病是由彎曲桿菌屬細(xì)菌所引起的牛及其他動(dòng)物的不同疾病的總稱。與牛有關(guān)的主要有兩種病型：由胎兒彎曲桿菌引起的牛不育與流產(chǎn)和主要由空腸彎曲桿菌引起的牛及其他動(dòng)物的急性腸炎。牛胎兒彎曲桿菌病是由彎曲桿菌中的胎兒彎曲桿菌性病亞種和胎兒亞種引起的牛慢性不顯性生殖器官疾病。其感染部位公母牛都局限于生殖器官，通過(guò)交媾而相互傳播，引起牛的一時(shí)性不孕、流產(chǎn)或腹瀉。本病是1913年在英國(guó)的大群發(fā)生流產(chǎn)的病牛中發(fā)現(xiàn)的?，F(xiàn)在世界上大部分國(guó)家或地區(qū)都有發(fā)生此病的報(bào)道。我國(guó)部分地區(qū)也有散發(fā)，給養(yǎng)牛業(yè)帶來(lái)一定影響。

1 臨床癥狀

公牛感染本病，無(wú)明顯的臨床癥狀，精液也正常，但精液和包皮中可帶菌。母牛于交配感染后，病菌一般在10～14 d侵入子宮和輸卵管中，在其中繁殖，導(dǎo)致其發(fā)炎。陰道黏液常清澈，偶爾稍混濁。同時(shí)還發(fā)生子宮內(nèi)膜炎。有些懷孕母牛的胎兒死亡較遲，則發(fā)生流產(chǎn)，流產(chǎn)多在懷孕后的5～6個(gè)月，流產(chǎn)率在5%～20%。早期流產(chǎn)，胎膜常可隨之排出，如發(fā)生在懷孕的第5個(gè)月以后，往往有胎衣滯留現(xiàn)象。

2 實(shí)驗(yàn)室診斷

用于診斷胎兒彎曲桿菌病亞種(CFV)感染的方法包括以下步驟。

2.1 培養(yǎng)

胎兒彎曲桿菌不易在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，其微需氧、脆弱、對(duì)培養(yǎng)基要求嚴(yán)格，通常可在被其他細(xì)菌污染的環(huán)境中分離到該菌。因此，在對(duì)胎兒彎曲桿菌的培養(yǎng)結(jié)果是陽(yáng)性時(shí)可以診斷為感染，但是培養(yǎng)結(jié)果為陰性時(shí)需要謹(jǐn)慎下結(jié)論。

采集培養(yǎng)胎兒彎曲桿菌的樣品包括：第一，陰道內(nèi)采集。陰道沖洗樣品是可行的，但是除非患牛為近期感染，否則從母牛分離到細(xì)菌的概率非常小。妊娠奶牛不可能得到陽(yáng)性分離結(jié)果，未孕牛還有可能分離到細(xì)菌。第二，包皮內(nèi)采集。采集包皮垢或清洗包皮。使用拭子不如采集包皮垢或清洗包皮有效。公牛比母牛更有可能分離到細(xì)菌。第三，從流產(chǎn)材料中采集樣品。從母牛流產(chǎn)材料中可分離到CFV，主要從流產(chǎn)胎兒胃內(nèi)容物中分離細(xì)菌。盡管在丘陵地帶收集到流產(chǎn)的胎兒很困難，但對(duì)于流產(chǎn)胎兒具有重要的診斷價(jià)值，因此必須要在圍欄內(nèi)尋找這類(lèi)流產(chǎn)的胎兒。因?yàn)樘簭澢鷹U菌非常脆弱，在沖洗液中不能長(zhǎng)時(shí)間存活，因此，應(yīng)立即接種到培養(yǎng)基中，推薦使用蘭德氏培養(yǎng)基。如果這種方法不可行，樣品必須在6 h內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室。在微氧條件下用蘭德氏培養(yǎng)基培養(yǎng)3 d后，可在血液瓊脂培養(yǎng)基上再培養(yǎng)，并可在微氧條件下進(jìn)一步培養(yǎng)。

2.2 血清學(xué)診斷

基于體液抗體的血清學(xué)診斷幾乎沒(méi)有價(jià)值，因?yàn)闊o(wú)論是在母牛還是公牛體內(nèi)，性傳染彎曲桿菌病都不能產(chǎn)生明顯的血清抗體。

基于陰道IgA反應(yīng)的血清學(xué)診斷方法應(yīng)用較為廣泛，因?yàn)榧词箍贵w對(duì)清除CFV感染不是特別有效，但它仍是一種快速和持續(xù)的反應(yīng)。然而，血清學(xué)方法不能準(zhǔn)確區(qū)別的是CFV感染還是CFF感染。因此，在牛已經(jīng)暴露于CFF的情況下，基于監(jiān)測(cè)陰道黏液中IgA作為疾病診斷的可靠性較低。

基于陰道IgA的檢驗(yàn)包括如下試驗(yàn)。①陰道黏液凝集試驗(yàn)。許多學(xué)者認(rèn)為，盡管陰道黏液凝集試驗(yàn)對(duì)于個(gè)體牛的檢測(cè)結(jié)果可能誤差較大，但這種試驗(yàn)?zāi)芎芎玫貞?yīng)用于群體水平(能檢測(cè)出50%受感染的牛)。但由于該方法不能區(qū)分CFV感染和CFF感染，因此目前已基本被廢棄。②IgA ELISA。澳大利亞建立了一種間接ELISA試驗(yàn)方法，用于鑒別陰道黏液樣品中的免疫球蛋白A。對(duì)該方法進(jìn)行的現(xiàn)場(chǎng)評(píng)價(jià)表明，在牛群中鑒定CFV感染時(shí)特異性達(dá)98.5%。如果牛群可能發(fā)生CFF感染(例如牛和羊混合飼養(yǎng)的牧場(chǎng))，CFF和CFV的交叉反應(yīng)限制了該試驗(yàn)方法的應(yīng)用。雖然該方法的應(yīng)用性仍有局限，但是IgA ELISA依然被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)推薦為診斷CFV感染的方法。

免疫熒光單獨(dú)或者與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)合應(yīng)用，是有價(jià)值的診斷彎曲桿菌病的輔助方法。這是一種快速、方便、準(zhǔn)確的診斷公牛帶菌的方法；如果和細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)合使用，免疫熒光能成功地鑒別98%被感染公牛。Dufty(1967)曾建議，在連續(xù)4次熒光抗體試驗(yàn)檢測(cè)呈陰性的公牛，可宣布其未被感染。但是，Barr和Anderson(1993)認(rèn)為細(xì)菌培養(yǎng)比熒光抗體試驗(yàn)更有價(jià)值。

2.3 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)

應(yīng)用PCR法可避免CFF和CFV培養(yǎng)以及二者的交叉反應(yīng)等諸多問(wèn)題。在最近10多年來(lái)，PCR試驗(yàn)進(jìn)展速度很快，能在培養(yǎng)中區(qū)分CFF和CFV。最近已建立了一種適合現(xiàn)場(chǎng)使用的靈敏PCR，它不僅能夠區(qū)分CFF和CFV，而且能在嚴(yán)重污染的樣本(即包皮垢)中或不能培養(yǎng)的樣品中鑒定出CFV。這種方法在澳大利亞和新西蘭已廣泛使用，同時(shí)，也有人根據(jù)細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果對(duì)這種方法的靈敏度和特異性進(jìn)行了研究。

2017-05-03

徐麗(1975-)，女，中專(zhuān)，獸醫(yī)師。

S858.23

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1005-2739(2017)04-0040-02