劉培燕 喬顯森 韓斌 馮智慧

紅細(xì)胞多凝集現(xiàn)象1例*

劉培燕 喬顯森 韓斌 馮智慧

紅細(xì)胞多凝集 交叉配血

多凝集紅細(xì)胞是指紅細(xì)胞膜發(fā)生異常后，紅細(xì)胞除與自身血清、新生兒血清不發(fā)生凝集外，可與幾乎所有成年人的血清發(fā)生凝集反應(yīng)，在血型鑒定和交叉配血試驗(yàn)中常引起正反定型不符和次側(cè)凝集的現(xiàn)象[1]。近期在交叉配血過(guò)程中發(fā)現(xiàn)1例紅細(xì)胞多凝集現(xiàn)象，現(xiàn)報(bào)告如下。

材料與方法

1 病歷資料 患者，女，81歲，因患骨髓增生異常綜合征（MDS）進(jìn)入青島市中心醫(yī)院住院治療，術(shù)前備血時(shí)檢測(cè)血型為B型，RhD陽(yáng)性，抗體篩查陽(yáng)性，與B型紅細(xì)胞交叉配血不合，遂送本實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。

2 試劑與儀器 單克隆抗-A試劑（Sanquin，8000160478），單克隆抗-B試劑（Sanquin，8000169003），抗-D試劑（Millipore，BME1201E），ABO反定型試劑紅細(xì)胞（上海血液生物制品有限公司，20145333），多克隆抗人球蛋白（Sanquin，8000186886），人源抗-A、抗-B（成都協(xié)和生物技術(shù)公司，20140714），抗體鑒定譜細(xì)胞（Sanquin，8000208116），聚凝胺（珠海貝索生物技術(shù)有限公司，113052）。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。KUBO7A 2420細(xì)胞洗滌離心機(jī)，BM402電熱恒溫水浴箱。

3 血清學(xué)試驗(yàn)

3.1 ABO血型鑒定：按照文獻(xiàn)介紹的經(jīng)典試管法操作[2，3]，以單克隆抗-A、抗-B、抗-D定型試劑及ABO反定型試劑紅細(xì)胞進(jìn)行正反定型。

3.2 多凝集紅細(xì)胞的確認(rèn)：應(yīng)用人源抗-A，人源抗-B、正常AB型獻(xiàn)血者血清及B型新生兒血清檢測(cè)。將患者血清與抗體鑒定譜細(xì)胞按照1∶2混合，在鹽水及多克隆抗人球蛋白介質(zhì)檢測(cè)患者的不規(guī)則抗體。

3.3 交叉配血：取患者血樣與同型Rh（D）陽(yáng)性獻(xiàn)血者血樣，分別在鹽水介質(zhì)、聚凝胺介質(zhì)及抗人球介質(zhì)中進(jìn)行交叉配血。

結(jié) 果

1 血型與抗體鑒定試驗(yàn) 應(yīng)用單克隆抗-A、抗-B及ABO反定型試劑紅細(xì)胞鑒定患者血型為B型、RhD陽(yáng)性。抗體鑒定試驗(yàn)結(jié)果鹽水介質(zhì)為陰性，部分譜細(xì)胞抗人球介質(zhì)為陽(yáng)性，但不規(guī)則抗體的特異性不能確定；患者紅細(xì)胞直接抗人球試驗(yàn)結(jié)果為陰性。

2 交叉配血 患者血樣與8份B型RhD陽(yáng)性健康無(wú)償獻(xiàn)血者血液制品進(jìn)行交叉配血。主側(cè)配血患者血清與獻(xiàn)血者紅細(xì)胞在鹽水介質(zhì)均無(wú)凝集，抗人球介質(zhì)中2份出現(xiàn)弱凝集，其余6份無(wú)凝集；聚凝胺介質(zhì)均無(wú)凝集；次側(cè)在上述3種介質(zhì)中均發(fā)生凝集，自身反應(yīng)未見(jiàn)凝集。結(jié)果見(jiàn)表1。

3 確認(rèn)多凝集紅細(xì)胞 分析上述配血實(shí)驗(yàn)結(jié)果，患者患MDS后很可能產(chǎn)生Tn活化多凝集紅細(xì)胞[3]，因此進(jìn)行了多凝集紅細(xì)胞的確認(rèn)試驗(yàn)，結(jié)果分別為：①患者紅細(xì)胞與人源抗-A試劑反應(yīng)出現(xiàn)凝集，凝集強(qiáng)度為2+，與人源抗-B試劑反應(yīng)的凝集強(qiáng)度為4+，其與單克隆抗-A、抗-B試劑反應(yīng)格局不同；②患者紅細(xì)胞與正常人AB型血清反應(yīng)，凝集強(qiáng)度為2+；③與B型新生兒血清無(wú)反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)果見(jiàn)表2。

討 論

多凝集紅細(xì)胞是指紅細(xì)胞膜發(fā)生異常后，紅細(xì)胞除與自身血清、新生兒血清不發(fā)生凝集外，可與幾乎所有成年人的血清發(fā)生凝集反應(yīng)。該多凝集反應(yīng)是由于大多數(shù)人的血清中存在針對(duì)隱蔽抗原的IgM抗體引起[4]。根據(jù)形成原因的不同，多凝集紅細(xì)胞可分為3類：微生物性的多凝集（T、Tk、Th、Tx、獲得性B）；非微生物性的多凝集（持久穩(wěn)固型）（Tn，Co2cl NOR Th）；遺傳性的多凝集（Sd（a++）（Cad）、HEMPAS、NOR、Hyde Park）[5]。微生物性多凝集反應(yīng)與敗血病、腸道或呼吸道感染、傷口感染具有相關(guān)性，通常是由于細(xì)菌或病毒糖苷酶的催化作用使紅細(xì)胞表面的部分糖基被切除，暴露出一些中間底物，如T糖鏈（抗原），人體內(nèi)普遍存在抗-T，所以會(huì)出現(xiàn)患者紅細(xì)胞與人源血清（漿）發(fā)生凝集的現(xiàn)象。與微生物性多凝集不同，非微生物性的多凝集是由于體細(xì)胞突變導(dǎo)致寡糖生物合成受阻，使得某些抗原暴露，如Tn抗原，可與大多數(shù)成人血清（漿）中存在的抗-Tn反應(yīng)而發(fā)生多凝集現(xiàn)象[6]。遺傳性的多凝集反應(yīng)出現(xiàn)在稀有抗原的遺傳，如Sda抗原，在一些罕見(jiàn)的個(gè)體紅細(xì)胞上具有超強(qiáng)表達(dá)，可與大多數(shù)成年人的血清（漿）中普遍存在的針對(duì)這種稀有抗原的抗體發(fā)生多凝集反應(yīng)。

表1 各項(xiàng)質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果

表2 患者紅細(xì)胞與不同血清反應(yīng)結(jié)果

多凝集紅細(xì)胞在血型鑒定和交叉配血中常引起正反定型不符和次側(cè)凝集的現(xiàn)象。如本例中患者紅細(xì)胞在未致敏的情況下，與試劑單克隆抗體反應(yīng)的正反定型相符，為B型，但在應(yīng)用人源抗-A、抗-B時(shí)，患者紅細(xì)胞均發(fā)生凝集，且與ABO同型的健康獻(xiàn)血者血清及AB型健康獻(xiàn)血者的血清均發(fā)生凝集反應(yīng)。這是由于正常人血清中大多含有IgM類抗體，可與多凝集紅細(xì)胞上暴露的隱蔽抗原反應(yīng)。因此在血型鑒定過(guò)程中若使用單克隆抗體試劑，則能有效避免多凝集紅細(xì)胞引起的血型鑒定困難。

對(duì)于產(chǎn)生多凝集紅細(xì)胞的患者，在應(yīng)用人血清抗-A、抗-B血型試劑時(shí)，一定要注意試劑中可能含有的針對(duì)紅細(xì)胞上暴露的隱蔽抗原的抗體，其可能引起血型誤判；在臨床輸血中若輸入含相應(yīng)抗體的血制品時(shí)可發(fā)生溶血性輸血反應(yīng)，因此在輸血前交叉配血時(shí)一定要高度重視次側(cè)配血（供血者血清+受血者紅細(xì)胞），避免漏檢多凝集紅細(xì)胞，本例中我們選擇交叉配血主側(cè)相合的獻(xiàn)血者紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌后輸注給患者，可有效避免溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生。

1 張春燕，劉杰，趙素珍.Tn多凝集紅細(xì)胞致ABO疑難血型鑒定1例[J]. 臨床輸血與檢驗(yàn)，2009，11（2）：177-178.

2 劉達(dá)莊.免疫血液學(xué)[M].上海：科學(xué)技術(shù)出版社，2002：40.44.194-196. 219.220.222.

3 李勇，馬學(xué)嚴(yán).實(shí)用血液免疫學(xué)：血型理論和實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京：科學(xué)出版社，2006： 641-658.

4 Beck ML. Red blood cell polyagglutination：clinical aspects [J]. Semin Hematol，2000，37（2）：186.

5 杰夫·丹尼爾，主編. 朱自嚴(yán)，主譯.人類血型[M].北京：科學(xué)出版社，2007：632-637.

6 樊鳳艷，張松，劉曉莉. Tn多凝集致ABO血型鑒定疑難一例[J]. 臨床輸血與檢驗(yàn)，2012，14（1）：83-84.

R331.1+41 R457.1+1

B

1671-2587（2017）01-0091-02

2016-06-16）

（本文編輯：姚萍）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.01.027

*本課題受青島市南區(qū)科技發(fā)展資金項(xiàng)目（No.2013-13-013-YY）和青島市醫(yī)療衛(wèi)生優(yōu)秀人才培養(yǎng)項(xiàng)目資助

266071 山東省青島市中心血站輸血醫(yī)學(xué)研究所（劉培燕，韓斌，馮智慧）；青島市中心醫(yī)療集團(tuán)（喬顯森）

劉培燕（1985–），女，山東莒縣人，主管技師，博士，主要從事輸血醫(yī)學(xué)工作，（Tel）18669809529。

馮智慧，男，碩士，主要從事血液免疫學(xué)、HLA與造血干細(xì)胞移植工作，（E-mail）qd_hla@163.com。