（新鄉(xiāng)縣農(nóng)牧局，河南 新鄉(xiāng) 453003）

實驗室樣品采集的一般要求及注意事項

牛可可，楊繁

（新鄉(xiāng)縣農(nóng)牧局，河南 新鄉(xiāng) 453003）

檢測樣品是檢測工作的源頭，檢測樣品的質量決定著檢測工作的成敗。動物的體液、離體組織、排泄物等是疾病診斷的基本條件，檢測樣品采集不恰當會影響檢驗結果，導致誤診。正確采集樣品對疾病的確診、病情發(fā)展的預測及防預措施的制定有重要意義。

1 基本要求

具有與采集病原微生物樣本所需要的生物安全防護水平相適應的設備。

具有掌握相關專業(yè)知識和操作技能的工作人員，采集樣品應無菌操作，做好個人防護，穿戴個人無菌防護用品。

具有有效地防止病原微生物擴散和感染的措施，做好環(huán)境消毒和動物尸體處理工作，防止污染環(huán)境，防止疫病傳播。

具有保證病原微生物樣本質量的技術方法和手段。考慮動物福利做好動物保定，在減少動物應激的同時，避免動物對采樣人員造成傷害。

根據(jù)檢測目的的不同，采集相應的樣品，據(jù)病原不同分別采集相應的組織臟器、內容物、分泌物、排泄物。當不能初步判斷病因時，應進行全面采樣以備檢驗。

2 一般原則

2.1 剖檢原則

首先排除炭疽，先觀察是否有血液凝固不良現(xiàn)象，若有鼻孔流血等病死動物，應耳尖采血涂片，痘病、炭疽病死的動物嚴禁剖檢。

2.2 采樣

避免外源性的污染，順序是從胸腔到腹腔，先采實質器官最后采集污染的組織。

2.3 采取的病料必須有代表性

采取組織病變明顯部位，采取病料時應根據(jù)不同的疾病及檢驗目的，采其相應的病料，病因不明無法第一時間判斷的疾病應系統(tǒng)采集。病料的采取應在使用治療藥物前，用藥后會影響病料中微生物的檢出。死亡動物的內臟病料采取，最遲不超過死后6 h（尤其在夏季），否則尸體腐敗，難以采到合格的病料。血液樣品在采前一般禁食8 h，采集血樣時，應根據(jù)采樣對象、檢驗目的及所需量，確定采血方法與采血部位。

3 樣品采集記錄

送往實驗室的樣品必須認真填寫采樣單，一式兩份，一份隨樣品送實驗室，另一份留送備案。填寫內容應包括養(yǎng)殖場（戶）名稱及詳細地址，畜主姓名及聯(lián)系電話，動物品種、種類及數(shù)量，被采樣日齡。是否健康動物，若被感染動物，應填寫被采集動物種類、數(shù)量、發(fā)病日期、造成損失、感染動物在畜群中的分布情況、發(fā)病動物及死亡數(shù)量、臨床癥狀、病理變化、免疫及用藥情況。病料名稱、種類、保存方法，送檢單位名稱和送檢人姓名、聯(lián)系方式。

4 注意事項

4.1 無菌操作

所用的器械及容器要進行嚴格的消毒。刀剪鑷子等金屬用具可煮沸消毒30 min，使用前用酒精擦拭，并在火焰上燒一燒；器皿（玻制、陶制及琺瑯制等）在高壓滅菌器或干烤箱內滅菌；軟木塞和橡皮塞應高壓滅菌。采集最適病料或理想的病料，應是無菌采取的含病原微生物量多的血液器官組織或分泌物和排泄物。如無法估計是何種疾病時，應根據(jù)臨床癥狀和病理變化采集病料，或全面采取病料，取材時應注意病原微生物感染所致疫病的類型。

4.2 病料采集的時間

一般在疾病流行早期典型、急性期，此時病原微生物的檢出率高；后期由于體內免疫力的產(chǎn)生，病原微生物減少，檢測病原微生物比較困難，同時可能出現(xiàn)交叉感染，增加判斷的難度。

4.3 細菌學檢驗

病料應采自未經(jīng)抗菌藥物治療的患病動物并做涂片。供顯微鏡檢查的膿汁、血液、分泌物等樣品，應無菌操作，盡快進行涂片、固定。各種拭子處理時，將保存液中的拭子充分振蕩、刷洗后，取上清液。

4.4 樣品的保存和運輸

所采集的樣品要以最快最直接的途徑送往實驗室。如果樣品能在采集后24 h內抵達實驗室的應放在4℃容器中密封保存，派具備資格的專人運送。

4.5 其他

供做切片的樣品采取后必須立即投入固定液，采取一種病料，使用一套器械，或器械用酒精擦拭、火焰滅菌后再采取另一種病料；一種病料放入一種容器，不可混放。所有樣品容器應做好標注，以便復檢查驗和防止混淆。血液樣品采集后應避免震蕩，于室溫下靜置2 h待血清析出后分離血清，置4℃保存，如需長期保存應置于-20℃。避免反復凍融。

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