高 晴，王 皓，趙飛飛，多力坤·買買提玉素甫，彭紅莉，劉姣男，張 杰，王友信，吳立娟，郭秀花，宋曼殳*

·論著·

新疆哈薩克族人群高血壓與血漿免疫球蛋白GN-糖基組的關(guān)聯(lián)分析

高 晴1，2，王 皓1，2，趙飛飛1，2，多力坤·買買提玉素甫3，彭紅莉1，2，劉姣男1，2，張 杰1，2，王友信1，2，吳立娟1，2，郭秀花1，2，宋曼殳1，2*

目的 分析新疆哈薩克族人群高血壓與血漿免疫球蛋白G(IgG)N-糖基組的關(guān)聯(lián)，尋找高血壓疾病狀態(tài)的潛在分子標(biāo)志物。方法 采用簡(jiǎn)單隨機(jī)抽樣，選取2014年2—6月于新疆伊犁哈薩克自治州瓊博拉鄉(xiāng)衛(wèi)生院建立健康檔案的哈薩克族居民92例為研究對(duì)象，根據(jù)高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)，將研究對(duì)象分為血壓正常組(n=35)、正常高值組(n=27)和高血壓組(n=30)。采用液相色譜-電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)血漿IgG N-糖基組。結(jié)果 每例受試者的各IgG亞型均檢測(cè)到G0、G0F、G0FN、G0N、G1、G1F、G1FN、G1FNS、G1FS、G1N、G1NS、G1S、G2、G2F、G2FN、G2FNS、G2FS、G2N、G2NS、G2S等20種聚糖結(jié)構(gòu)。除G0外，不同IgG亞型各N-聚糖水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。高血壓組IgG1亞型G0F、G0FN、G1FS水平高于血壓正常組，G2、G2FS水平低于血壓正常組；正常高值組IgG1亞型G2F水平低于血壓正常組，高血壓組IgG1亞型G2F水平低于血壓正常組、正常高值組(P<0.05)。正常高值組IgG2/3亞型G0FN、G0N水平高于血壓正常組，G2、G2S水平低于血壓正常組；高血壓組IgG2/3亞型G0、G0F、G0FN、G0N水平高于血壓正常組，G2、G2F、G2FS、G2NS、G2S水平低于血壓正常組，G2FN、G2FNS水平低于血壓正常組、正常高值組(P<0.05)。高血壓組IgG4亞型G0FN水平高于血壓正常組、正常高值組(P<0.05)。正常高值組IgG1亞型半乳糖基化水平低于血壓正常組，高血壓組IgG1亞型半乳糖基化水平低于血壓正常組和正常高值組(P<0.05)。正常高值組、高血壓組IgG2/3亞型半乳糖基化、唾液酸化水平低于血壓正常組，高血壓組IgG2/3亞型半乳糖基化水平低于正常高值組(P<0.05)。結(jié)論 新疆哈薩克族人群不同血壓狀態(tài)與其血漿IgG N-糖基組譜型變化相關(guān)，IgG1亞型G2F水平及IgG1、IgG2/3亞型半乳糖基化水平的改變可能是該人群高血壓疾病狀態(tài)潛在的早期預(yù)警分子標(biāo)志物和治療新靶點(diǎn)。

高血壓；免疫球蛋白G；糖基化；生物學(xué)標(biāo)記

本研究創(chuàng)新點(diǎn)：

鑒于血漿N-糖基組的特定譜型可即時(shí)反映機(jī)體多種生理、病理改變，可作為高血壓疾病狀態(tài)的潛在分子標(biāo)志物。本研究首次分析高血壓患病率較高的新疆哈薩克族人群不同血壓狀態(tài)組之間血漿免疫球蛋白G(IgG)各亞型的N-糖基組變異，探究高血壓與血漿IgG N-糖基組的關(guān)聯(lián)，尋找人群特異性的高血壓疾病狀態(tài)的潛在N-糖基組分子標(biāo)志物。以往研究表明，血漿IgG總體水平的N-糖基組改變與收縮壓、舒張壓均相關(guān)，但關(guān)于特定人群血漿IgG各亞型的N-糖基組與血壓狀態(tài)的關(guān)聯(lián)分析，目前尚未見報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)，不同血壓狀態(tài)下，哈薩克族人群血漿IgG各亞型的多種N-聚糖水平及糖基化水平出現(xiàn)不同程度的改變；IgG1亞型G2F水平以及IgG1、IgG2/3亞型半乳糖基化水平的改變，可能作為新疆哈薩克族人群高血壓疾病狀態(tài)潛在的早期預(yù)警分子標(biāo)志物和治療新靶點(diǎn)，并有助于深入理解高血壓發(fā)生的分子機(jī)制及其臨床療效的個(gè)體差異。

糖基化是最普遍、最復(fù)雜的蛋白翻譯后修飾[1]。已有研究表明，免疫球蛋白G(IgG)亞型N-糖基化水平及糖鏈結(jié)構(gòu)的變化常伴隨多種炎性疾病的發(fā)生、發(fā)展[2-5]。炎性因子在高血壓的發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用[6]，提示高血壓病理過程中出現(xiàn)的血漿IgG N-糖基組的改變可能是高血壓疾病狀態(tài)的潛在分子標(biāo)志物，并可能提示高血壓發(fā)病的新機(jī)制和治療的新靶點(diǎn)。我國(guó)新疆哈薩克族隔離人群是探究原發(fā)性高血壓人群特異性病因的適宜人群[7]。本研究旨在通過分析新疆哈薩克族人群不同血壓狀態(tài)組間的血漿IgG N-糖基組差異，探究該人群特異性的高血壓疾病狀態(tài)的潛在IgG亞型N-糖基組分子標(biāo)志物，為高血壓的病因及治療提供依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 采用簡(jiǎn)單隨機(jī)抽樣，選取2014年2—6月于新疆伊犁哈薩克自治州察布查爾錫伯自治縣瓊博拉鄉(xiāng)衛(wèi)生院建立健康檔案的哈薩克族居民92例為研究對(duì)象，其中男38例，女54例；平均年齡(45.1±12.8)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)至少3代以內(nèi)無異族通婚史；(2)年齡≥18歲；(3)過去兩周內(nèi)未服用藥物；(4)同意參與本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：患有繼發(fā)性高血壓、嚴(yán)重心腦血管、肝臟、腎臟、代謝性疾病及腫瘤等重大疾病。研究對(duì)象均簽署知情同意書，本研究獲得首都醫(yī)科大學(xué)倫理委員會(huì)授權(quán)。

依據(jù)2010年頒布的中國(guó)高血壓防治指南[8]，研究對(duì)象分為血壓正常組〔平均收縮壓<120 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)和舒張壓<80 mm Hg，35例〕、正常高值組(平均收縮壓為120～139 mm Hg和/或舒張壓為80～89 mm Hg，27例)、高血壓組(平均收縮壓≥140 mm Hg和/或舒張壓≥90 mm Hg，30例)。血壓正常組男15例，女20例；平均年齡(41.1±11.5)歲。正常高值組男12例，女15例；平均年齡(47.2±14.0)歲。高血壓組男11例，女19例；平均年齡(48.0±12.4)歲。各組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.411，P=0.814；F=2.943，P=0.058)。

1.2 方法

1.2.1 體格檢查 由經(jīng)過統(tǒng)一培訓(xùn)的護(hù)士采用統(tǒng)一的水銀柱血壓計(jì)測(cè)量血壓兩次，取平均值。受試者休息至少10 min，取坐位、測(cè)量右臂血壓，兩次測(cè)量間隔不少于30 s。

1.2.2 樣品采集與處理 受試者晨起空腹，采用真空抗凝采血管采集肘部外周靜脈血液樣本5 ml，立即置于冰盒中保存運(yùn)送。血液樣本在低溫離心機(jī)中以3 000 r/min離心10 min(離心半徑18 cm)，迅速吸取上層血漿，置于1.5 ml離心管，-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 血漿IgG N-糖基組檢測(cè)方法

1.2.3.1 血漿IgG提取 采用96孔蛋白G提取板(斯洛文尼亞BIA分離公司)提取血漿IgG。首先用2 ml超純水清洗蛋白G提取板，然后用2 ml 1×磷酸鹽緩沖液(PBS，pH=7.4)進(jìn)行平衡。50 μl血漿樣本用結(jié)合緩沖液進(jìn)行稀釋(1∶10)，加入到96孔蛋白G提取板中，使用1 ml結(jié)合緩沖液清洗5次，以去除未結(jié)合的蛋白。1 ml甲酸溶液(1 mol/L)將IgG洗脫，用96孔板進(jìn)行收集。該步驟均在真空裝置下進(jìn)行。

1.2.3.2 IgG胰蛋白酶水解 吸取50 μl IgG洗脫液到新的96孔板中。用20 mmol/L冰醋酸將胰蛋白酶溶解至濃度為0.4 μg/μl，用涼超純水進(jìn)一步稀釋為0.02 μg/μl。每個(gè)樣本加入20 μl胰蛋白酶溶液，并在37 ℃下孵育過夜。

1.2.3.3 IgG N-糖肽純化 利用反向固相萃取技術(shù)對(duì)糖肽進(jìn)行純化。采用孔徑為10 μm的96孔過濾板，每孔加入5 mg的C18磁珠(德國(guó)Macherey-Nagel公司)。固定相采用3×200 μl 80%乙腈溶液〔含1%三氟乙酸(TFA)〕進(jìn)行活化，然后用3×200 μl 0.1% TFA進(jìn)行清洗。IgG消化產(chǎn)物使用0.1% TFA溶液稀釋10倍后加入到C18磁珠上，然后利用200 μl 0.1% TFA溶液清洗3次。以上操作均在真空裝置下進(jìn)行。之后在C18磁珠上加入90 μl 18%乙腈溶液(含0.1% TFA)，500 r/min離心10 min(離心半徑18 cm)，收集洗脫液。洗脫液進(jìn)行揮干后用20 μl超純水再次溶解，-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3.4 IgG N-糖基組分析 采用液相色譜-電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行血漿IgG N-糖基組檢測(cè)。純化后的IgG N-糖肽利用Ultimate 3000高效液相系統(tǒng)(美國(guó)Dionex公司)進(jìn)行分離。分離后的樣本進(jìn)入安裝有電噴霧裝置的時(shí)間飛行質(zhì)譜(美國(guó)micrOTOF-Q公司)進(jìn)行分析。質(zhì)譜峰掃描質(zhì)荷比(m/z)為300～2 000，每個(gè)樣本分析時(shí)間為16 min，分析軟件為Chromeleon Client Version 6.8 和micrOTOF Control Version 2.3。每個(gè)樣本數(shù)據(jù)均利用已知的糖肽進(jìn)行內(nèi)部校準(zhǔn),使用Xtractor2D(www.ms-utils.org/Xtractor2D)進(jìn)行轉(zhuǎn)化，并與數(shù)據(jù)庫(kù)(http://glycobase.nibrt.ie)進(jìn)行比對(duì)。由于IgG亞型IgG2和IgG3的糖鏈在技術(shù)上難以分離，本研究將血漿IgG糖鏈分離為IgG1、IgG2/3和IgG4。

1.2.3.5 IgG的各種N-糖基化水平計(jì)算 依據(jù)檢測(cè)到的聚糖結(jié)構(gòu)的相對(duì)水平，計(jì)算半乳糖基化、唾液酸化、平分型N-乙酰葡萄糖胺和巖藻糖基化4種類型的糖基化水平，計(jì)算公式參照文獻(xiàn)[9]，半乳糖基化水平=(G1F+G1FN+G1FS+G1FNS+G1+G1N+G1S)×0.5+G2F+G2FN+G2FS+G2FNS+G2+G2N+G2S，唾液酸化水平=G1FS+G2FS+G1FNS+G2FNS+G1S+G2S，平分型N-乙酰葡萄糖胺水平=G0FN+G1FN+G2FN+G1FNS+G2FNS+G0N+G1N+G2N，巖藻糖基化水平=G0F+G1F+G2F+G0FN+G1FN+G2FN+G1FS+G2FS。

2 結(jié)果

2.1 不同IgG亞型的各N-聚糖水平分析 每例受試者的各IgG亞型均檢測(cè)到G0、G0F、G0FN、G0N、G1、G1F、G1FN、G1FNS、G1FS、G1N、G1NS、G1S、G2、G2F、G2FN、G2FNS、G2FS、G2N、G2NS、G2S等20種N-聚糖結(jié)構(gòu)。不同IgG亞型的G0水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；不同IgG亞型的其余N-聚糖水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,見表1，各N-聚糖結(jié)構(gòu)詳見本刊官網(wǎng)www.chinagp.net電子期刊相應(yīng)文章附件)。

2.2 不同血壓組各IgG亞型的各種N-聚糖水平分析 各組IgG1亞型G0F、G0FN、G1FS、G2、G2F、G2FS水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其中，高血壓組G0F、G0FN、G1FS水平高于血壓正常組，G2、G2FS水平低于血壓正常組；正常高值組G2F水平低于血壓正常組，高血壓組G2F水平低于血壓正常組、正常高值組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見表2)。

各組IgG2/3亞型G0、G0F、G0FN、G0N、G2、G2F、G2FN、G2FNS、G2FS、G2NS、G2S水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其中，正常高值組G0FN、G0N水平高于血壓正常組，G2、G2S水平低于血壓正常組；高血壓組G0、G0F、G0FN、G0N水平高于血壓正常組，G2、G2F、G2FS、G2NS、G2S水平低于血壓正常組，G2FN、G2FNS水平低于血壓正常組、正常高值組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見表3)。

各組IgG4亞型G0FN水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其中高血壓組G0FN水平高于血壓正常組、正常高值組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見表4)。

2.3 不同血壓組各IgG亞型的各類型N-糖基化水平比較 各組IgG1亞型半乳糖基化水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其中正常高值組IgG1亞型半乳糖基化水平低于血壓正常組，高血壓組IgG1亞型半乳糖基化水平低于血壓正常組和正常高值組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各組IgG2/3亞型半乳糖基化、唾液酸化水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其中正常高值組、高血壓組IgG2/3亞型半乳糖基化、唾液酸化水平低于血壓正常組，高血壓組IgG2/3亞型半乳糖基化水平低于正常高值組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各組IgG4亞型各類型N-糖基化水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,見表5)。

Table 1 Comparison of levels of the N-glycans among different IgG subtypes

序號(hào)N-聚糖IgG1IgG2/3IgG4F值P值1G01.60±1.311.59±0.581.41±0.602.1770.1152G0F26.40±6.8133.03±7.3825.17±10.3226.023<0.0013G0FN5.80±1.605.57±1.563.85±1.9625.221<0.0014G0N0.42±0.290.14±0.100.17±0.1263.591<0.0015G13.82±1.471.55±0.614.49±2.4082.450<0.0016G1F28.27±3.0927.61±3.1321.04±7.5563.983<0.0017G1FN5.70±1.323.45±0.842.36±1.08228.154<0.0018G1FNS0.31±0.100.25±0.180.21±0.1012.563<0.0019G1FS1.56±0.463.45±0.6619.30±0.8979.614<0.00110G1N0.60±0.350.13±0.110.53±0.3970.097<0.00111G1NS0.09±0.060.09±0.060.16±0.1413.640<0.00112G1S0.28±0.090.25±0.120.20±0.1119.367<0.00113G21.99±1.020.62±0.3512.20±8.04183.990<0.00114G2F13.12±3.8113.08±3.818.76±4.3731.912<0.00115G2FN1.04±0.371.08±0.380.87±0.376.7260.00116G2FNS0.35±0.150.18±0.080.18±0.0960.441<0.00117G2FS7.38±2.687.22±2.774.96±3.3316.618<0.00118G2N0.11±0.060.05±0.040.44±0.3972.603<0.00119G2NS0.07±0.050.17±0.080.17±0.0917.572<0.00120G2S0.78±0.450.25±0.189.83±7.07178.112<0.001

注：G0、G1、G2分別表示糖鏈結(jié)構(gòu)中含有0、1、2個(gè)半乳糖，F(xiàn)為巖藻糖，N為平分型N-乙酰葡萄糖胺，S為唾液酸化糖苷

表2 不同血壓組IgG1亞型的各種N-聚糖水平比較

注：與血壓正常組比較，aP<0.05；與正常高值組比較，bP<0.05

表3 不同血壓組IgG2/3亞型的各種N-聚糖水平比較

注：與血壓正常組比較，aP<0.05；與正常高值組比較，bP<0.05

表4 不同血壓組IgG4亞型的各種N-聚糖水平比較

注：與血壓正常組比較，aP<0.05；與正常高值組比較，bP<0.05

Table 5 Comparison of levels of the N-glycosylation of each IgG subtype among different blood pressure groups

組別例數(shù)IgG1半乳糖基化 唾液酸化 平分型N-乙酰葡萄胺 巖藻糖基化血壓正常組3547.16±7.9911.30±3.2313.93±3.1390.10±3.31正常高值組2743.60±6.81a10.48±2.8515.22±1.9689.76±4.58高血壓組3039.96±6.31ab10.20±3.5415.35±2.6290.05±2.88F值8.2441.0252.8190.076P值0.0010.3630.0650.927組別IgG2/3半乳糖基化 唾液酸化 平分型N-乙酰葡萄胺 巖藻糖基化血壓正常組43.44±7.5212.87±3.6410.61±2.1694.93±1.83正常高值組38.59±6.10a10.79±2.44a11.86±1.8794.73±1.77高血壓組36.02±7.84ab10.74±2.98a11.17±2.1595.04±1.98F值8.8354.9472.7250.194P值<0.0010.0090.0710.824組別IgG4半乳糖基化 唾液酸化 平分型N-乙酰葡萄胺 巖藻糖基化血壓正常組53.70±11.1417.75±6.218.74±2.7669.84±15.26正常高值組53.23±13.7218.10±8.199.06±2.1867.12±21.45高血壓組48.20±9.9316.95±5.4710.12±2.9672.12±14.97F值2.1200.2312.2620.600P值0.1260.7940.1100.551

注：與血壓正常組比較，aP<0.05；與正常高值組比較，bP<0.05

3 討論

高血壓是遺傳與環(huán)境因素相互作用導(dǎo)致的復(fù)雜疾病，其致病機(jī)制尚未完全闡明。血漿IgG N-糖基組的特定譜型是反映機(jī)體各種細(xì)胞功能，乃至各種疾病過程的一組重要的中間表型，可作為反映機(jī)體遺傳和環(huán)境因素相互作用的即時(shí)指標(biāo)[10]。因此，某一特定糖型的改變將會(huì)對(duì)高血壓的早期監(jiān)測(cè)有更高的特異度和靈敏度，可作為潛在的高血壓疾病狀態(tài)分子標(biāo)志物。

IgG的Fc-或Fab-片段糖基化修飾在前炎性反應(yīng)或抗炎信號(hào)通路中具有增強(qiáng)或阻滯作用[11]。IgG1的高半乳糖基修飾決定其對(duì)FcγRIIB或C-type lectin-like receptor dectin-1的結(jié)合力，以此調(diào)節(jié)抗炎活性[12-13]。而不同程度的唾液酸化修飾則可以控制內(nèi)在抗炎活性從穩(wěn)態(tài)向炎癥作用的轉(zhuǎn)變[14]。本研究也表明，不同血壓狀態(tài)下血漿IgG N-糖基化結(jié)構(gòu)與水平出現(xiàn)了不同程度的改變，提示在高血壓發(fā)生的病理過程中，IgG N-糖基化修飾發(fā)生改變,引發(fā)炎性反應(yīng)從而導(dǎo)致高血壓的發(fā)生。

遺傳變異是造成個(gè)體疾病易患性及其療效差異性的重要原因。由于不同民族間存在人群特異性的疾病和藥物代謝相關(guān)的遺傳易患基因[15]，推測(cè)高血壓相關(guān)的血漿IgG N-糖基組譜型(各聚糖的結(jié)構(gòu)與水平)也存在民族差異。近年來的流行病學(xué)研究表明，世代聚居的新疆哈薩克族是高血壓患病率較高的民族之一，患病率高達(dá)36.7%[16]；該人群具有獨(dú)特的遺傳背景和生活習(xí)慣，是探究高血壓發(fā)病特點(diǎn)及疾病變異譜的適宜人群[7]。基于中國(guó)漢族人群和克羅地亞人群的研究結(jié)果顯示，血漿IgG總體水平的半乳糖基化、核心巖藻糖基化和唾液酸化水平與收縮壓、舒張壓均存在相關(guān)性[17]。

本研究分析了新疆哈薩克族不同血壓組人群血漿IgG各亞型的N-糖基組改變，結(jié)果顯示，不同血壓狀態(tài)下，機(jī)體血漿IgG各亞型的各種N-聚糖水平及糖基化水平出現(xiàn)不同程度的改變，與WANG等[18]基于中國(guó)漢族人群、克羅地亞人群和蘇格蘭人群關(guān)于血漿IgG總體水平與血壓的關(guān)聯(lián)研究結(jié)果一致。本研究還發(fā)現(xiàn)，隨著血壓水平的升高，IgG1亞型G2F水平，及IgG1、IgG2/3亞型半乳糖基化水平呈下降趨勢(shì)，提示這些糖基組特定譜型的改變可能是新疆哈薩克族人群高血壓發(fā)生的早期事件，可能是該人群高血壓疾病狀態(tài)潛在的分子標(biāo)志物，也可為該人群高血壓的早期篩檢和尋找治療新靶點(diǎn)提供參考。

由于本研究選取的研究對(duì)象為居住在交通不便的西北偏遠(yuǎn)山區(qū)的新疆哈薩克族人群，樣本的獲得及運(yùn)輸相對(duì)困難，因而本研究樣本量較小，有待進(jìn)一步的大樣本隊(duì)列研究對(duì)本研究結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。

作者貢獻(xiàn)：高晴進(jìn)行課題設(shè)計(jì)與實(shí)施、資料收集整理、撰寫論文、成文并對(duì)文章負(fù)責(zé)；王皓、趙飛飛、彭紅莉、劉姣男進(jìn)行課題實(shí)施、評(píng)估、資料收集；多力坤·買買提玉素甫、張杰、王友信、吳立娟、郭秀花進(jìn)行課題設(shè)計(jì)、實(shí)施，論文撰寫的指導(dǎo)；宋曼殳進(jìn)行課題設(shè)計(jì)與實(shí)施，論文撰寫的全程質(zhì)量控制及審校。

本文無利益沖突。

[1]HIRABAYASHI J,ARATA Y,KASAI K,et al.Glycome project:concept,strategy and preliminary application to caenorhabditis elegans[J].Proteomics,2001,1(2):295-303.

[2]連高焱,俞飚.蛋白質(zhì)的化學(xué)糖基化研究進(jìn)展[J].中國(guó)科學(xué)：化學(xué),2012,42(12):1746-1759. LIAN G Y，YU B.Research progress of chemical glycosylation of protein[J].Scientia Sinica(Chimica),2012,42(12):1746-1759.

[3]VARKI A P,BAUM L G,BELLIS S L,et al.Working group report:the roles of glycans in hemostasis,inflammation and vascular biology[J].Glycobiology,2008,18(10):747-749.

[4]NOVOKMET M,LUKIC E,VUCKOVIC F,et al.Changes in IgG and total plasma protein glycomes in acute systemic inflammation[J].Sci Rep,2014(4):43-47.

[5]THEODORATOU E,CAMPBELL H,VENTHAM N T,et al.The role of glycosylation in IBD[J].Nat Rev Gastroenterol Hepatol,2014,11(10):588-600.

[6]王勝利,劉應(yīng)才.慢性炎癥:高血壓的一種發(fā)病機(jī)制[J].醫(yī)學(xué)綜述,2008,14(22):3447-3450. WANG S L,LIU Y C.Hypertension and chronic inflammation[J].Medical Recapitulate,2008,14(22):3447-3450.

[7]劉芬,馬依彤,楊毅寧,等.新疆不同民族高血壓現(xiàn)況的流行病學(xué)調(diào)查[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2010,90(46):3259-3263. LIU F,MA Y T，YANG Y N，et al.Current status of primary hypertension in Xinjiang:an epidemiological study of Han,Uygur and Hazakh populations[J].National Medical Journal of China,2010,90(46):3259-3263.

[8]中國(guó)高血壓防治指南修訂委員會(huì).中國(guó)高血壓防治指南2010[J].中華高血壓雜志,2011,19(8):701-743. Writing Group of 2010 Chinese Guidelines for the Management of Hypertension.2010 Chinese guidelines for the management of hypertension[J].Chinese Journal of Hypertension,2011,19(8):701-743.

[9]HUFFMAN J E,PUCIC-BAKOVIC M,KLARIC L，et al.Comparative performance of four methods for high-throughput glycosylation analysis of immunoglobulin G in genetic and epidemiological research[J].Mol Cell Proteomics,2014,13(6):1598-1610.

[10]VARKI A,CUMMINGS R,ESKO J,et al.Essentials of glycobiology[M].2nd ed.New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press,1999:387-402.

[11]WRIGHT A,MORRISON S L.Effect of glycosylation on antibody function:implications for genetic engineering [J].Trends Biotechnol,1997,15(1):26-32.

[12]KARSTEN C M,PANDEY M K,FIGGE J,et al.Anti-inflammatory activity of IgG1 mediated by Fc galactosylation and association of FcγRⅡB and dectin-1[J].Nat Med,2012,18(9):1401-1406.

[13]VUCKOVIC F,KRITIC J,GUDELJ I,et al.Association of systemic lupus erythematosus with decreased immunosuppressive potential of the IgG glycome [J].Arthritis Rheumatol,2015,67(11):2978-2989.

[14]KANEKO Y,NIMMERJAHN F,RAVETCH J V.Anti-inflammatory activity of immunoglobulin G resulting from Fc sialylation [J].Science,2006,313(5787):670-673.

[15]LI J Z,ABSHER D M,TANG H,et al.Worldwide human relationships inferred from genome-wide patterns of variation[J].Science,2008,319(5866):1100-1104.

[16]馬曉佳,張眉,郭淑霞,等.新疆農(nóng)村地區(qū)維吾爾族、哈薩克族與漢族人群高血壓患病率[J].中華高血壓雜志,2013,21(12):1164-1168. MA X J,ZHANG M,GUO S X,et al.Prevalence of hypertension in Uygur and Kazak and Han population in rural area of Xinjiang[J].Chinese Journal of Hypertension,2013,21(12):1164-1168.

[17]LU J P,KNE?EVIC A,WANG Y X,et al.Screening novel biomarkers for metabolic syndrome by profiling human plasma N-glycans in Chinese Han and Croatian populations [J].J Proteome Res,2011,10(11):4959-4969.

[18]WANG Y X,KLARIC L,YU X,et al.The association between glycosylation of immunoglobulin G and hypertension :a multiple ethnic cross-sectional study[J].Medicine(Baltimore),2016,95(17):e3379.

(本文編輯：吳立波)

Association between Hypertension and IgG N-glycome in Xinjiang Kazakh Population

GAOQing1，2,WANGHao1，2,ZHAOFei-fei1，2,DUOLIKUN·Maimaitiyusufu3,PENGHong-li1，2,LIUJiao-nan1，2,ZHANGJie1，2,WANGYou-xin1，2,WULi-juan1，2,GUOXiu-hua1，2,SONGMan-shu1，2*

1.SchoolofPublicHealth,CapitalMedicalUniversity,Beijing100069,China

2.BeijingMunicipalKeyLaboratoryofClinicalEpidemiology,Beijing100069,China

3.CollegeofLifeScienceandTechnology，XinjiangUniversity,Urumqi830046,China

Objective To analyze the association between hypertension and IgG N-glycome in Xinjiang Kazakh population,and to explore the potential biomarkers of the state of hypertension disease.Methods Ninety-two Kazakh participants who had established health records in health center of Qapqal County,Xinjiang Yili Kazakh Autonomous Prefecture from February to June 2014 were recruited as research objects by simple random sampling method.According to the diagnostic criteria of hypertension,the subjects were divided into normal blood pressure group (n=35),normal high-value group (n=27) and hypertension group (n=30).The plasma IgG N-glycome was detected by liquid chromatography-electrospray ionization mass spectrometry.Results Twenty glycans (G0,G0F,G0FN,G0N,G1,G1F,G1FN,G1FNS,G1FS,G1N,G1NS,G1S,G2,G2F,G2FN,G2FNS,G2FS,G2N,G2NS,G2S) were all detected in various IgG subtypes of each subject.Except for G0,there were significant differences in each N-glycome levels of different IgG subtypes (P<0.05).The level of G0F,G0FN and G1FS of IgG1 subtypes in hypertension group was higher than that in normal blood pressure group,while the levels of G2 and G2FS was lower;the level of G2F of IgG1 subtypes in normal high-value group was lower than that in normal blood pressure group,the level of G2F of IgG1 subtypes in hypertension group was lower than that in normal blood pressure group and normal high-value group (P<0.05).In normal high-value group,the level of G0FN and G0N of IgG2/3 subtypes was higher than that in normal blood pressure group,and the level of G2 and G2S was lower;in hypertension group,the level of G0,G0F,G0FN and G0N of IgG2/3 subtypes was higher and the level of G2,G2F,G2FS,G2NS and G2S was lower than that in normal blood pressure group,and the level of G2FN and G2FNS was lower than that in normal blood pressure group and normal high-value group(P<0.05).The levels of G0FN of IgG4 subtypes in hypertension group was higher than that in normal blood pressure group and normal high-value group(P<0.05).The level of galacosylation of IgG1 subtypes in normal high-value group was significantly lower than that in normal blood pressure group,and the level of galacosylation of IgG1 subtypes in hypertension group was significantly lower than that in normal blood pressure group and normal high-value group (P<0.05).The levels of galacosylation and sialylation of IgG2/3 subtypes in normal high-value group and hypertension group were significantly lower than those in normal blood pressure group,and the level of galacosylation of IgG2/3 subtypes in hypertension group was significantly lower than that in normal high-value group (P<0.05).Conclusion The different states of blood pressure is associated with its plasma IgG N-glycome changes of Xinjiang Kazakh population,the changes in the levels of G2F of IgG1 subtypes and galactosylated levels of IgG1 and IgG2/3 subtypes may be the potential biomarkers and novel therapeutic targets for hypertension status among this population.

Hypertension；Immunoglobulin G；Glycosylation；Biological markers

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81573215)；北京市屬高等學(xué)校青年拔尖人才培育計(jì)劃項(xiàng)目(CIT&TCD201404185)

R 544.1

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2017.05.012

2016-07-31；

2016-12-07)

1.100069北京市，首都醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院

2.100069北京市，臨床流行病學(xué)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

3.830046新疆烏魯木齊市，新疆大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院

*通信作者：宋曼殳，副教授；E-mail:songms@ccmu.edu.cn

高晴，王皓，趙飛飛，等.新疆哈薩克族人群高血壓與血漿免疫球蛋白G N-糖基組的關(guān)聯(lián)分析[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2017，20(5)：563-568.[www.chinagp.net]

GAO Q, WANG H, ZHAO F F, et al.Association between hypertension and IgG N-glycome in xinjiang kazakh population[J].Chinese General Practice，2017，20(5)：563-568.

*Correspondingauthor:SONGMan-shu,Associateprofessor;E-mail:songms@ccmu.edu.cn