蔣向輝+苑靜

摘要：以魚的常規(guī)飼料和四棱豆作添加劑的飼料為對照，探討了金銀花作添加劑的魚飼料對青、草、鳙、鯉4種家魚生長情況的影響。結(jié)果表明：金銀花飼料對4種魚體質(zhì)量的影響都是呈前期減少，后期增加的趨勢；而四棱豆飼料飼養(yǎng)的魚一直表現(xiàn)體質(zhì)量增加的趨勢；金銀花飼料飼養(yǎng)的魚在前期的排泄物明顯增多，后期則慢慢減少；金銀花飼料對魚的成活率也有顯著影響，金銀花飼料喂養(yǎng)的草魚成活率最低，且金銀花與飼料的比例為1 ∶[KG-3]1時(shí)，4種魚成活率都最低，隨著金銀花比例降低，成活率增高，當(dāng)且金銀花與飼料的比例為1 ∶[KG-3]4時(shí)，4種魚的成活率都比常規(guī)飼料喂養(yǎng)時(shí)要高。研究認(rèn)為，金銀花飼料對不同的魚有不同的影響，金銀花飼料對鳙魚、草魚體質(zhì)量的增加是有利的，且效果好于四棱豆，而對鯉魚、青魚的效果則不及四棱豆飼料。金銀花飼料能有效增強(qiáng)魚類肝臟總超氧化物歧化酶與谷胱甘肽過氧化物酶活性，減少丙二醛含量，且這種作用在鯉魚表現(xiàn)較為明顯，而青魚中相對較弱。

關(guān)鍵詞：金銀花；草魚；青魚；鯉魚；鳙魚；飼料；生長

中圖分類號： S963文獻(xiàn)標(biāo)志碼：

文章編號：1002-Q949.921302（2016）07-0309-04

金銀花（Lonicera japonica Thunb.）系忍冬科忍冬屬多年生常綠藤本植物，別稱金花、銀花和忍冬花。其藥用價(jià)值較高，具有廣譜抗菌和散風(fēng)消腫的功效。常用于清熱解毒、治療癰腫疔瘡、丹毒和血痢等病癥[1]，近年來被逐漸推廣到飼料添加劑領(lǐng)域。大量的研究表明[2-5]，金銀花的主要成分中有木犀草素、異綠草酸、綠原酸、肌醇等多種藥效成分，對多種致病菌和病毒均有一定的抑制作用。金銀花中還含多種氨基酸、糖類和維生素以及大量生物體需要的微量元素，將金銀花開發(fā)為一種魚飼料添加劑將有很好的發(fā)展前景。

在家魚喂養(yǎng)的過程中，飼料的種類與數(shù)量是決定養(yǎng)魚經(jīng)濟(jì)效益的最主要因素。因此，必須綜合考慮魚類生長所需的營養(yǎng)、抗病抑菌能力、對飼料的有效利用等多方面的因素，對飼料進(jìn)行科學(xué)配制、合理投放，才能既保證魚類健康生長，又能增加魚肉的質(zhì)量與品質(zhì)，充分發(fā)揮魚飼料的最佳效能，獲得最佳的經(jīng)濟(jì)效益。目前，許多學(xué)者對不同種中草藥對鯉、鯽的生長和免疫的影響進(jìn)行了相關(guān)研究[6-8]。四棱豆系藥食兩用植物，其種子、塊根、嫩莢、嫩葉均含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素和礦物質(zhì)[9]，這些營養(yǎng)物質(zhì)均能被魚所利用，四棱豆中含有的黃酮類化合物是其主要的抗氧化、抑菌、消炎成分[10]。金銀花中含有豐富的有機(jī)酸類、黃酮類、三萜皂苷類、微量元素類等有效成分，具有抑菌、抗病毒、增強(qiáng)免疫力、抗氧化等生物活性[11]。四棱豆與金銀花都含有豐富的黃酮類化合物而表現(xiàn)出良好的抗氧化和抑菌活性，而兩者由于活性成分種類及含量的差異在作為飼料添加劑時(shí)又表現(xiàn)了不同的效能，四棱豆作為一種增加蛋白質(zhì)含量的飼料添加劑逐步得到了推廣和應(yīng)用，而金銀花作為飼料添加劑在增強(qiáng)魚類免疫力方面有良好的發(fā)展前景。因此，本研究以魚的常規(guī)飼料和四棱豆作添加劑的飼料為對照，探討藥用金銀花作添加劑的魚飼料對青、草、鳙、鯉4種家魚生長情況的影響，為研制出既能保證魚類生長所需要的營養(yǎng)成分又能增強(qiáng)魚類免疫力的金銀花魚飼料提供參考。

1材料與方法

1.1材料

青、草、鳙、鯉4種家魚苗各5 000尾，金銀花與四棱豆干樣，魚飼料（青干草粉40%、棉籽餅粉30%、豆餅粉10%、菜籽餅粉5%、蠶蛹粉5%、魚粉5%、大麥粉5%），F(xiàn)W177系列中草藥粉碎機(jī)、1.5 m×1.5 m×1.5 m玻璃缸、萬分之一電子分析天平、制氧機(jī)等。

1.2方法

1.2.1飼料的制備

將金銀花和四棱豆分別用小型粉碎機(jī)粉碎，過60目網(wǎng)篩，再把飼料粉碎成細(xì)末，根據(jù)前期預(yù)備試驗(yàn)顯示，當(dāng)采用魚飼料和金銀花質(zhì)量比為1 ∶[KG-3]2喂養(yǎng)魚時(shí)，魚的成活率不足50%；而當(dāng)魚飼料和金銀花質(zhì)量比為4 ∶[KG-3]5時(shí)，魚成活率在90%以上；當(dāng)采用魚飼料和四棱豆質(zhì)量比為1 ∶[KG-3]1、2 ∶[KG-3]1、4 ∶[KG-3]1喂養(yǎng)魚時(shí)，魚的成活率均在90%以上；本研究將飼料和金銀花分別按質(zhì)量比為1 ∶[KG-3]1、2 ∶[KG-3]1、3 ∶[KG-3]1、4 ∶[KG-3]1的比例進(jìn)行混合，飼料和四棱豆按質(zhì)量比為4 ∶[KG-3]1的比例進(jìn)行混合，都以蒸餾水?dāng)嚢杌靹颍瞥?.0 mm顆粒烘干后干燥備用。

1.2.2喂養(yǎng)

用于喂養(yǎng)常規(guī)飼料的玻璃缸3個(gè)、用于喂養(yǎng)金銀花飼料的玻璃缸12個(gè)、用于喂養(yǎng)四棱豆飼料的玻璃缸3個(gè)，并貼上標(biāo)簽，放入半缸水。將青、鳙、鯉、草魚各選150尾分別放入不同玻璃缸。在缸內(nèi)裝好制氧機(jī)，隔天定期喂養(yǎng) 15 g 混合飼料。

1.2.3稱質(zhì)量與觀察

把魚分裝好后第1次稱體質(zhì)量，數(shù)據(jù)精確到小數(shù)點(diǎn)后2位。每隔15 d稱1次，且每隔2 d換1次水，換水后同樣向3個(gè)缸加入等量的對應(yīng)的飼料顆粒，每天進(jìn)行觀察。

1.2.4消化酶活性測定

胃、腸蛋白酶活性測定參照周惠等的方法[12]。

1.2.5金銀花飼料對魚脾臟相對質(zhì)量的影響

分別切取金銀花飼料與常規(guī)飼料喂養(yǎng)的不同種類魚的脾臟稱質(zhì)量，參照王吉橋等等的方法[13]計(jì)算脾臟與魚體質(zhì)量的相對比，即脾臟體質(zhì)量/魚總體質(zhì)量×100%。

1.2.6血清和肝臟抗氧化指標(biāo)測定

參照魏炳棟等的方法[14]，采用紫外可見光分光光度計(jì)測定魚肝臟總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性以及丙二醛（MDA）含量。

1.2.7數(shù)據(jù)處理[JP3]

根據(jù)不同種類魚的生長情況，最后計(jì)算魚的相對生長率與成活率。借助 SPSS 16.0 軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。在 ANOVA 過程中先對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，若有顯著差異，再作LSD多重比較。相關(guān)計(jì)算公式：成活率=（試驗(yàn)?zāi)┗铘~總數(shù)/試驗(yàn)初投入魚的總數(shù)）×100%；相對生長率=（魚的最終體質(zhì)量-最初體質(zhì)量）/最初體質(zhì)量×100%。

2結(jié)果與分析

2.1不同配比金銀花飼料對魚成活率的影響

金銀花飼料缸中，可能由于金銀花中有部分藥用成分對魚的生長有一定的毒害作用，隨著金銀花比例的增高，魚的成活率逐漸降低，但由于鯉魚生性好動，生活力強(qiáng)，在常規(guī)飼料 ∶[KG-3]金銀花比為1 ∶[KG-3]1的缸中，其成活率在60%以上，其他魚種成活率均在50%以下（表1）。隨著金銀花比例的減少，在常規(guī)飼料 ∶[KG-3]金銀花比為4 ∶[KG-3]1的缸中各種魚的成活率在90%以上，其中鯉魚、鳙魚的成活率最高，青魚次之，草魚最低。

2.2金銀花飼料對魚體質(zhì)量生長的影響

由圖1可知，僅以常規(guī)飼料喂養(yǎng)的鯉魚的體質(zhì)量變化不明顯，表明鯉魚在用常規(guī)飼料喂養(yǎng)時(shí)，很快就能適應(yīng)新的環(huán)境，但前2個(gè)月增長不明顯。以常規(guī)飼料加四棱豆喂養(yǎng)的鯉魚體質(zhì)量在2個(gè)月內(nèi)逐漸增加，表明四棱豆對魚的生長沒有產(chǎn)生不良影響，反而促進(jìn)了魚的生長，可能是由于四棱豆種子含有豐富的蛋白質(zhì)，給鯉魚提供了較豐富的氨基酸營養(yǎng)，有效地促進(jìn)了鯉魚的生長。而以常規(guī)飼料加金銀花（4 ∶[KG-3]1）喂養(yǎng)的鯉魚在第2次稱量時(shí)，有體質(zhì)量減小的現(xiàn)象，可能是由于環(huán)境和飼料的變化，對鯉魚的生長影響較大，而第3次、第4次稱量時(shí)則呈鯉魚質(zhì)量緩慢增加，表明鯉魚對金銀花飼料已經(jīng)能慢慢接受，由于體質(zhì)的某些變化能將金銀花中的營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為自己所需要的營養(yǎng)，從而促進(jìn)其生長。結(jié)果表明，金銀花飼料也有利于鯉魚的生長，但其對鯉魚體質(zhì)量增長的效果不如四棱豆明顯。

魚類對新飼料和環(huán)境的變化的選擇能力由魚類對飼料生物的喜好性和飼料對魚類的易得性決定。青魚的生活習(xí)性不太活潑，主要棲息在水層的中下部，成魚好以螺螄、蚌、蛤等軟體動物為食；而在幼魚階段，好以浮游動物和微生物為食。由圖2可知，僅以常規(guī)飼料喂養(yǎng)的青魚體質(zhì)量一直呈減少的趨勢，說明青魚的生長對環(huán)境條件的改變較為敏感，但后來體質(zhì)量減輕的速度越來越小，表明青魚已逐漸適應(yīng)環(huán)境條件的改變。以常規(guī)飼料加四棱豆喂養(yǎng)的青魚體質(zhì)量一直在逐漸增加，青魚能夠消化四棱豆中的蛋白質(zhì)，從而得到了所需要的氨基酸類營養(yǎng)物質(zhì)，但越到后面增加的幅度越小，可能是由于青魚喜肉食，飼料條件影響其體質(zhì)量的增加。以常規(guī)飼料加金銀花（4 ∶[KG-3]1）喂養(yǎng)的青魚第2次稱質(zhì)量時(shí)體質(zhì)量有所減小，可能是由于短期內(nèi)青魚不能適應(yīng)金銀花飼料喂養(yǎng)的環(huán)境。而第3次、第4次稱量時(shí)，體質(zhì)量有所增加，但差異不顯著。金銀花飼料對青魚體質(zhì)量的增加效果不明顯。結(jié)果表明，對青魚而言，金銀花飼料沒有四棱豆飼料的效果好。

鳙魚通常生活在水層的中上部，其運(yùn)動較為緩慢，且不喜歡跳躍，好以浮游生物和藻類為食，鳙魚的抗低氧能力最弱，對環(huán)境的改變適應(yīng)能力較弱。由圖3可知，以常規(guī)飼料、四棱豆飼料喂養(yǎng)的魚體質(zhì)量一直減少，直到后期體質(zhì)量才有略微增加，說明鳙魚不能很快適應(yīng)新的環(huán)境，且不能利用四棱豆中的高蛋白，而常規(guī)飼料加金銀花（4 ∶[KG-3]1）飼料喂養(yǎng)的魚體質(zhì)量一直增長，前期增長較小，可能是由于鳙魚適應(yīng)新環(huán)境時(shí)產(chǎn)生的應(yīng)激引起的，而第3次、第4次稱量時(shí)，體質(zhì)量都有明顯的增加，且增幅越來越大，說明鳙魚能利用金銀花中的有效物質(zhì)。所以四棱豆飼料不利于鳙魚的生長，而金銀花飼料則對鳙魚的生長有促進(jìn)作用。

草魚生性活潑，以草為食，也可以輔助人工飼料。由圖4可知，以常規(guī)飼料和四棱豆飼料喂養(yǎng)的草魚體質(zhì)量一直呈下降趨勢，可能是由于青飼料補(bǔ)充不夠，草魚得不到所需的營養(yǎng)，只有用常規(guī)飼料加金銀花（4 ∶[KG-3]1）飼料喂養(yǎng)的草魚的體質(zhì)量有稍上升的趨勢，表明金銀花飼料對草魚的生長有利。

綜上所述，金銀花飼料對鳙魚、草魚體質(zhì)量的增加是有利的，且效果好于四棱豆，而對鯉魚、青魚的效果則不及四棱豆飼料。

2.3金銀花對魚生理反應(yīng)的影響

每次換水時(shí)，將排泄物進(jìn)行收集，由于魚在前期不能完全吸收金銀花及四棱豆中的部分成分，在水缸中時(shí)，金銀花飼料

缸里的排泄物呈細(xì)小的圓筒狀，四棱豆飼料缸里則成細(xì)小的粉末狀，收集后發(fā)現(xiàn)金銀花飼料缸里的排泄物是棕灰色的，很黏稠，且氣味很濃，而四棱豆飼料缸中的排泄物，收集出來后呈灰白色，沒有明顯的氣味。常規(guī)魚飼料喂養(yǎng)的缸中由于魚生長代謝正常，收不到明顯的排泄物。

2.4金銀花飼料對魚脾臟相對質(zhì)量變化的影響

攝食金銀花飼料的青、草、鳙、鯉4種家魚脾臟相對質(zhì)量都比對照組（常規(guī)飼料喂養(yǎng)）高，分別高13.10%、9.27%、1531%、7.86%，差異達(dá)到顯著水平（P<0.05），結(jié)果（表2）顯示鯉魚脾臟相對質(zhì)量最小，鳙魚脾臟相對質(zhì)量最大，這可能與不同魚類對金銀花副作用的緩解能力不同有關(guān)。魚的胸腺、腎臟和脾臟是其主要的免疫器官，大量的研究表明，魚類免疫器官的質(zhì)量與其免疫能力的強(qiáng)弱有密切的關(guān)系[15]。對金銀花飼料飼養(yǎng)的魚肝臟、脾臟顏色、成分等各方面的變化還有待進(jìn)一步的研究。

2.6金銀花飼料對魚肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

總超氧化物歧化酶與谷胱甘肽過氧化物酶是動物體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)中的重要酶系，丙二醛是細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物，其含量可間接反映細(xì)胞的損傷程度。由表4可知，不同飼料添加劑對肝臟抗氧化酶及丙二醛含量有明顯影響。金銀花飼料喂養(yǎng)的魚中，除青魚外，其他魚類肝臟總超氧化物歧化酶與谷胱甘肽過氧化物酶活性極顯著高于四棱豆飼料喂養(yǎng)的魚（P<0.01），MDA含量在2種飼料喂養(yǎng)的魚之間有顯著的差異（P<0.05）；青魚無論是用金銀花飼料喂養(yǎng)還是用四棱豆飼料喂養(yǎng)，肝臟中總超氧化物歧化酶與谷胱甘肽過氧化物酶活性都較低，丙二醛含量也相應(yīng)較高；而鯉魚則恰好相反，這可能與2種魚的抗氧化能力有關(guān)，鯉魚抗氧化能力較強(qiáng)，表現(xiàn)為與抗氧化能力相關(guān)的酶的活性較高。

3討論

本研究發(fā)現(xiàn)用金銀花飼料喂魚時(shí)，在幼魚生長的前期，魚的生長受到一定的抑制，其體質(zhì)量表現(xiàn)都有輕微的減小現(xiàn)象，但隨著時(shí)間的增加，魚的體質(zhì)量逐漸增加。在成活率方面，前期，草魚最容易死亡，可能是由于草魚是一種草食性魚類，且食量大，在缸里飼養(yǎng)不能滿足其對青飼料的需求，導(dǎo)致其容易

死亡；中期，鳙魚陸續(xù)死亡，可能是由于鳙魚抗低氧能力較差且以浮游生物、菌落為食。金銀花飼料喂養(yǎng)的鳙魚成活率最高，且體質(zhì)量一直增長，后期表現(xiàn)更為明顯，但常規(guī)飼料和四棱豆飼料喂養(yǎng)的鳙魚體質(zhì)量一直呈減小的趨勢，直到后期體質(zhì)量才有略微增加，可能是由于鳙魚好以浮游生物、菌落為食，而金銀花飼料對進(jìn)入體內(nèi)的不良菌落有一定的抑制作用。趙銀麗等研究金銀花內(nèi)生真菌對鯉魚腸道菌群的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，在魚飼料中添加一定量的金銀花可以抑制部分致病菌的生長，且可以增加某些有益菌的種類和數(shù)量，對改善腸道微生態(tài)系統(tǒng)有很好的效果[16]。

金銀花飼料喂養(yǎng)的魚前期的排泄物明顯增多，排泄物呈棕灰色黏稠狀，且味較濃，用其他2種飼料喂養(yǎng)的魚缸里沒有明顯的條狀排泄物。影響魚排泄物的因素有攝食量、食物的組成、體質(zhì)量和溫度等多方面的原因。蛋白質(zhì)作為能源在魚體內(nèi)分解，其能量不能全部被魚所利用，部分能量物質(zhì)會被排泄到體外，魚類氮排泄物的來源除了飼料蛋白之外，還有由于魚體正常新陳代謝與適應(yīng)環(huán)境中引起組織蛋白的分解。周洪琪等研究表明，魚類排泄的氮以氨態(tài)氮和尿素為主[17]，本研究中發(fā)現(xiàn)，不同飼料喂養(yǎng)的魚排泄物氣味不同可能與排泄物中氮的形態(tài)不同有關(guān)，對魚排泄物的成分還需進(jìn)行下一步研究和探討。

魚類生活在水中，由于水溫相對恒定且有一定的浮力，魚類為維持體溫和維持身體平衡消耗的能量少，魚類的代謝產(chǎn)物是氨和氮，它們的生活、生長、繁殖所需的能量主要是由體內(nèi)的蛋白質(zhì)提供。因此，魚類所需要的蛋白質(zhì)比其他動物要高，魚類對氨基酸的需求也不少于10種，尤其對蛋氨酸、賴氨酸的需求最高[18]。研究結(jié)果表明，用四棱豆加常規(guī)飼料喂養(yǎng)時(shí)，對鯉魚與青魚的生長都有明顯的促進(jìn)作用，這與四棱豆種子含有豐富的蛋白質(zhì)有關(guān)，能為魚類提供豐富的氨基酸，對于生長健康、環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)的魚類四棱豆是一種很好的魚飼料添加劑。

大量研究表明，中草藥中由于有生物堿、多糖、皂苷、蒽類、揮發(fā)油和有機(jī)酸等多種有效成分，這些都與動物的免疫能力緊密相關(guān)[19]。本研究表明金銀花作為魚飼料添加劑用于家魚養(yǎng)殖，在促生長、增強(qiáng)代謝和提高飼料轉(zhuǎn)化上均能取得良好的效果，進(jìn)一步改良金銀花與常規(guī)魚飼料的配比，開發(fā)金銀花魚飼料添加劑將有很好的發(fā)展前景。

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