孫祺琳 陳 軍

(上海交通大學(xué)附屬第九人民醫(yī)院皮膚科，上海 20011)

皮膚鱗狀細(xì)胞癌及基底細(xì)胞癌中環(huán)氧化酶-2與血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)

孫祺琳 陳 軍

(上海交通大學(xué)附屬第九人民醫(yī)院皮膚科，上海 20011)

目的 探討環(huán)氧化酶(COX)-2與血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在皮膚鱗狀細(xì)胞癌(SCC)及基底細(xì)胞癌(BCC)中的表達(dá)及其相關(guān)性。方法 采用免疫組化檢測40例SCC、108例BCC及30例正常皮膚組織中COX-2及VEGF的表達(dá)，并分析二者之間的關(guān)系。結(jié)果 與正常皮膚比較，SCC及BCC中COX-2與VEGF陽性表達(dá)率皆顯著升高(P<0.05)；與BCC比較，SCC中COX-2與VEGF陽性表達(dá)率皆顯著提高(P<0.05)。且SCC中COX-2及VEGF表達(dá)與病理分級無關(guān)。COX-2與VEGF在BCC及SCC中的表達(dá)正相關(guān)(r=0.438，P=0.024)。結(jié)論 COX-2與VEGF在SCC及BCC中異常表達(dá)，并起促進(jìn)作用，二者的表達(dá)可為SCC及BCC的診斷提供依據(jù)。

環(huán)氧化酶(COX)-2；血管內(nèi)皮生長因子；皮膚鱗狀細(xì)胞癌；基底細(xì)胞癌

皮膚鱗狀細(xì)胞癌(SCC)和基底細(xì)胞癌(BCC)是最常見的兩種皮膚腫瘤，分別是發(fā)生在表皮或附屬角質(zhì)細(xì)胞及基底細(xì)胞或皮膚附件的腫瘤，因發(fā)展速度較為緩慢，常未得到重視，但近些年來發(fā)生率呈上升趨勢〔1～3〕。目前這兩種常見皮膚腫瘤主要以手術(shù)、激光治療為主，但因?yàn)槟[瘤暴露在皮膚表面，采取此類治療常常影響病變部分外觀，并且腫瘤切除后愈合較為困難，所以考慮腫瘤治療的輔助方法對減少手術(shù)損傷是十分必要的。皮膚腫瘤和其他腫瘤一樣，都涉及腫瘤細(xì)胞惡性生增殖、誘導(dǎo)抑制、血管生成、細(xì)胞黏附、侵襲轉(zhuǎn)移等復(fù)雜過程。其中四烯酸代謝系統(tǒng)過程限速酶環(huán)氧化酶(COX)-2在SCC、BCC中異常表達(dá)，并與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，不僅通過各種信號途徑影響腫瘤細(xì)胞的增殖凋亡，還能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的血管生成，而COX-2抑制劑能降低腫瘤的發(fā)生率〔4～6〕。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是最常見的血管生成促進(jìn)因子，在包括SCC、BCC等腫瘤中過表達(dá)，使得缺氧條件下腫瘤細(xì)胞血管生成從而獲得營養(yǎng)物質(zhì)，進(jìn)一步進(jìn)行惡性增殖及轉(zhuǎn)移〔7,8〕。但COX-2與VEGF在SCC及BCC中的關(guān)系尚未見報道，本研究檢測COX-2與VEGF在SCC及BCC中的表達(dá)并分析其相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2014年1月至2015年9月我院皮膚科，病理確診為BCC或SCC標(biāo)本共148例，其中BCC 108例，男63例，女45例，平均年齡63.9歲。SCC 40例，其中男26例，女14例，平均年齡69.4歲。SCC分級：Ⅰ級26例，Ⅱ級8例，Ⅲ級6例，Ⅳ級0例。30例正常皮膚組織作為對照，取材部位來自美容就醫(yī)者或者非癌癥需要植皮患者的面部、腹部、上臂等，均為全厚皮片。

1.2 免疫組織化學(xué)染色法(SP) 測定皮膚組織中COX-2和VEGF表達(dá)，10%甲醛溶液固定組織，石蠟包埋，切片，抗原修復(fù)，室溫冷卻，磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗，一抗室溫孵育，PBS沖洗，二抗37℃孵育，PBS洗滌，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)溶液顯色后沖洗、復(fù)染、脫水、透明、樹膠封片。以PBS液代替一抗作為陰性對照。

1.3 結(jié)果判斷 COX-2及VEGF染色結(jié)果以細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒為陽性，采用半定量計(jì)分法判定，高倍鏡下隨機(jī)選擇10個視野，分別計(jì)算500個細(xì)胞。切片中陽性細(xì)胞 <5%為0分，6%～30% 1分，31%～60% 2分，≥61% 3分；染色深度以基本無染色為0分，淡黃色1分，棕色2分，棕黃色或棕褐色3分，免疫反應(yīng)的總得分為陽性細(xì)胞百分率與免疫染色強(qiáng)度總得分的乘積。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)，Spearman相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 COX-2及VEGF在SCC、BCC及正常皮膚組織中的表達(dá) SCC及BCC中COX-2、VEGF陽性表達(dá)率顯著高于正常皮膚組織，且SCC中顯著高于BCC(P<0.05)。見表1。

2.2 COX-2及VEGF與SCC分化程度的關(guān)系 Ⅱ～Ⅲ級SCC中COX-2、VEGF陽性表達(dá)率高于Ⅰ級，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

2.3 SCC及BCC中COX-2與VEGF表達(dá)的關(guān)系 SCC及BCC中COX-2與VEGF呈正相關(guān)(P=0.024)。見表3。

表1 COX-2、VEGF在SCC、BCC及正常皮膚組織中陽性表達(dá)〔n(%)〕

與正常皮膚組織比較：1)P<0.05；與BCC比較:2)P<0.05

表2 COX-2、VEGF陽性表達(dá)與SCC病理分級的關(guān)系〔n(%)〕

表3 SCC及BCC中COX-2與VEGF表達(dá)的關(guān)系(n)

3 討 論

COX是前列腺素合成過程中限速酶，有COX-1和COX-2兩種亞型。其中COX-1屬于結(jié)構(gòu)性酶，存在于多數(shù)正常組織，在病理狀態(tài)下含量幾乎不變。而COX-2屬于誘導(dǎo)型酶，在正常生理狀態(tài)下絕大多數(shù)組織不表達(dá)，但在受到炎癥因子、生長因子、癌基因產(chǎn)物等各種外界刺激后，在細(xì)胞中被迅速誘導(dǎo)產(chǎn)生。目前已有眾多研究證實(shí)，COX-2的產(chǎn)生不僅使得機(jī)體產(chǎn)生炎癥、疼痛等，也能導(dǎo)致細(xì)胞過度增生，而細(xì)胞凋亡被抑制，血管新生得到刺激等生物學(xué)過程。已報道COX-2在包括皮膚腫瘤等大多數(shù)腫瘤中高表達(dá)，如黃萌等〔4〕證實(shí)SCC及BCC中COX-2表達(dá)量顯著高于正常皮膚。Muller-Decker等〔5〕通過Western印跡及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)等手段檢測了50例正常皮膚，癌前病變及皮膚腫瘤中COX表達(dá)情況，結(jié)果表明正常皮膚、日光性角化病、SCC中COX-2表達(dá)量遞增。Pentland等〔6〕用紫外線(UV)A340燈照射無毛小鼠以誘發(fā)皮膚腫瘤，結(jié)果有95%的小鼠形成了鱗癌，免疫組化結(jié)果顯示腫瘤組織中COX-2表達(dá)量增加，而用COX-2特異性抑制劑塞來昔布(西樂葆)能顯著縮小小鼠腫瘤體積。上述報道充分說明COX-2在SC及BCC等皮膚腫瘤中過表達(dá)，并通過抑制COX-2表達(dá)能顯著的抑制腫瘤的發(fā)生率。本研究結(jié)果表明SCC及BCC中COX-2陽性表達(dá)率顯著高于正常皮膚，與黃萌等〔4〕，Muller-Decker等〔5〕研究結(jié)果一致，同時也發(fā)現(xiàn)SCC中COX-2陽性表達(dá)率高于BCC，并與SCC組織病理分級無關(guān)，與臧家兵等〔9〕研究結(jié)果一致，并結(jié)合張紅等〔10〕研究結(jié)果推測可能是BCC惡性程度較低，生長較為緩慢，不易形成新生血管，從而使得SCC中COX-2高于BCC。

已證實(shí)VEGF在包括皮膚腫瘤等大多數(shù)腫瘤中高表達(dá)，如Bowden等〔7〕證實(shí)SCC中VEGF陽性表達(dá)高于癌旁皮膚組織。Maiolino等〔8〕通過免疫組化證實(shí)SCC中VEGF全部陽性表達(dá)，而部分BCC陽性表達(dá)。上述報道充分證實(shí)VEGF在SCC及BCC中異常表達(dá)，本研究結(jié)果表明SCC及BCC中VEGF陽性表達(dá)率顯著高于正常皮膚，與Bowden等〔7〕，Maiolino等〔8〕觀點(diǎn)一致。同時本研究結(jié)果還表明SCC中VEGF陽性表達(dá)高于BCC，且與SCC病理分級無關(guān)，與黃琨等〔11〕研究結(jié)果一致：SCC及BCC中VEGF陽性表達(dá)率顯著高于正常皮膚組織，且SCC中VEGF陽性表達(dá)率顯著高于BCC，并與SCC病理分級無關(guān)。結(jié)合相關(guān)參考文獻(xiàn)推測〔12〕，可能是由于SCC和BCC生物學(xué)行為不同，其產(chǎn)生新生血管能力不同，其中BCC中新生血管數(shù)目不如SCC，從而使得腫瘤細(xì)胞獲得營養(yǎng)物質(zhì)較少，惡性增殖程度較低，最終使得BCC中VEGF陽性表達(dá)率較SCC中降低。

本研究結(jié)果還證實(shí)SCC及BCC中COX-2與VEGF陽性表達(dá)率正相關(guān)，且Tsujii〔13〕研究表明，過度表達(dá)COX-2的結(jié)腸癌細(xì)胞能促進(jìn)VEGF、前列腺素、血小板衍生因子(PDGF)-β等血管生成因子從而刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移及小管形成。并且COX-2反義寡核苷酸能顯著抑制SCC細(xì)胞株Colo-16的生長及克隆形成，并下調(diào)VEGF表達(dá)〔14〕。本文提示COX-2能通過上調(diào)VEGF，從而促進(jìn)SCC及VCC惡性增殖與血管生成。同時也有研究證實(shí)VEGF也可上調(diào)COX-2表達(dá)，如Tamura等〔15〕證實(shí)VEGF能促使血管內(nèi)皮細(xì)胞中COX-2表達(dá)量顯著提高，并伴有前列腺素合成的增加；而應(yīng)用VEGF抑制劑能阻斷這一過程。從而說明COX-2與VEGF能形成一個正反饋調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，協(xié)同刺激SCC、BCC等腫瘤細(xì)胞過度增殖及血管生成。

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〔2015-03-13修回〕

(編輯 苑云杰)

陳 軍(1983-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事自身免疫病研究。

孫祺琳(1985-)，女，碩士，住院醫(yī)師，主要從事皮膚腫瘤研究。

R269

A

1005-9202(2017)02-0403-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.02.064