汪 旭 董 科 俞小炯 趙小龍 張 杰 張 浩

(四川省人民醫(yī)院肝膽外二科，四川 成都 610072)

肝癌組織中白細(xì)胞分化抗原90和趨化因子受體4的表達(dá)與術(shù)后早期復(fù)發(fā)的關(guān)系

汪 旭 董 科 俞小炯 趙小龍 張 杰 張 浩

(四川省人民醫(yī)院肝膽外二科，四川 成都 610072)

目的 探討肝癌組織中白細(xì)胞分化抗原(CD)90和趨化因子受體(CXCR)4的表達(dá)及其與術(shù)后早期復(fù)發(fā)的關(guān)系。方法 選取2013年7月至2014年7月在該院行手術(shù)切除的肝癌患者組織標(biāo)本82例，采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)CD90和CXCR4的表達(dá)情況，并記錄患者術(shù)后1年復(fù)發(fā)情況，分析肝癌組織中CD90和CXCR4的表達(dá)與臨床病理及術(shù)后早期復(fù)發(fā)的關(guān)系。結(jié)果 82例肝癌組織中，CD90陽(yáng)性表達(dá)65例(79.27%)，CXCR4高表達(dá)49例(59.76%)。肝癌組織中CD90與CXCR4的表達(dá)均與患者是否攜帶乙肝病毒、腫瘤直徑大小、結(jié)節(jié)數(shù)、血管侵犯情況、腫瘤分化情況及TNM分期有關(guān)，且CXCR4表達(dá)與包膜情況有關(guān)(均P<0.05)。肝癌組織中CD90、CXCR4的表達(dá)與患者術(shù)后1年復(fù)發(fā)有關(guān)(均P<0.05)。結(jié)論 CD90與CXCR4在肝癌組織中均呈高表達(dá)，且臨床檢測(cè)CD90和CXCR4有助于及時(shí)了解肝癌患者術(shù)后早期復(fù)發(fā)情況，為改善患者預(yù)后提供參考。

肝癌；組織；白細(xì)胞分化抗原90；趨化因子受體4；早期復(fù)發(fā)

研究證實(shí)，白細(xì)胞分化抗原(CD)90、趨化因子受體(CXCR)4與肝癌生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移有關(guān)〔1〕，而目前關(guān)于二者與肝癌患者的預(yù)后關(guān)系研究尚少。本研究旨在探討CD90、CXCR4在肝癌組織中的表達(dá)情況及其與患者術(shù)后早期復(fù)發(fā)的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年7月至2014年7月在我院行手術(shù)切除的肝癌患者組織標(biāo)本82例。其中男52例，女30例，年齡46～75〔平均(56.2±6.6)〕歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理、影像學(xué)等方法檢查符合肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)〔2〕，TNM分期Ⅰ～Ⅱ期，且患者均符合手術(shù)指征；②術(shù)后有完整的隨訪資料，手術(shù)成功實(shí)施，并完整切除病灶者；③出現(xiàn)轉(zhuǎn)移后未經(jīng)任何抗腫瘤藥物治療者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①并發(fā)其他惡性腫瘤者；②術(shù)前服用過(guò)抗腫瘤藥物者；③術(shù)前經(jīng)證實(shí)已經(jīng)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移者。

1.2 CD90與CXCR4檢測(cè)方法 兔抗人CD90及CXCR4抗體均購(gòu)自ProteinTech Group公司。二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色試劑盒、免疫組織染色試劑盒均購(gòu)自上海欣裕生物科技有限公司。參照試劑盒說(shuō)明書(shū)，具體染色步驟：①標(biāo)本脫蠟。所有組織標(biāo)本行4 μm連續(xù)切片，在恒溫箱中烤30 min，使用脫二甲苯梯度溶液進(jìn)行脫蠟處理，之后放入蒸餾水中做水化處理；②抗原修復(fù)。將切片放入過(guò)氧化氫溶液中進(jìn)行抗原修復(fù)；③加入對(duì)應(yīng)的抗體試劑。每例標(biāo)本隨機(jī)選取5個(gè)高倍視野(×400)，觀察細(xì)胞染色情況。CD90陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：顯微鏡下行二次計(jì)分法〔3〕，根據(jù)著色強(qiáng)度及著色范圍積分之和進(jìn)行評(píng)價(jià)。著色范圍：無(wú)色為0分，0～5%為1分，6%～11%為2分，12%及以上為3分。②著色強(qiáng)度：棕黃色為3分，黃色為2分，淡黃色為1分。若積分和<3分為陰性，≥3分為陽(yáng)性。CXCR4以細(xì)胞質(zhì)膜出現(xiàn)黃色及棕黃色為陽(yáng)性，且陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞數(shù)<腫瘤細(xì)胞總數(shù)20%為低表達(dá)，≥20%為高表達(dá)〔4〕。

1.3 觀察指標(biāo) 收集并統(tǒng)計(jì)所有患者的臨床資料，術(shù)后囑咐患者每隔2～3個(gè)月到醫(yī)院進(jìn)行體檢，并記錄其1年復(fù)發(fā)情況，分析不同病理特征患者組織中CD90和CXCR4的表達(dá)情況及其與術(shù)后復(fù)發(fā)的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0軟件行χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 肝癌組織中CD90與CXCR4的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系 82例肝癌組織中，CD90陽(yáng)性表達(dá)65例(79.27%)，CXCR4高表達(dá)49例(59.76%)。肝癌組織中CD90與CXCR4的表達(dá)均與患者是否攜帶乙肝病毒、腫瘤直徑大小、結(jié)節(jié)數(shù)、血管侵犯情況、腫瘤分化情況及TNM分期有關(guān)，且CXCR4表達(dá)與包膜情況有關(guān)(均P<0.05)，而兩者均與患者性別、年齡、甲胎蛋白(AFP)、肝硬化情況無(wú)關(guān)(均P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 肝癌組織中CD90與CXCR4的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系〔n(%)〕

2.2 肝癌組織中CD90、CXCR4的表達(dá)與術(shù)后1年復(fù)發(fā)的關(guān)系 1年隨訪調(diào)查發(fā)現(xiàn)有26例(31.71%)復(fù)發(fā)。CD90陽(yáng)性表達(dá)及CXCR4高表達(dá)的患者1年內(nèi)復(fù)發(fā)率〔35.38%(23/65);40.82%(20/49)〕分別高于CD90陰性表達(dá)〔17.65%(3/17)〕及CXCR4低表達(dá)〔18.18%(6/23)〕者(χ2=8.077,12.323;P=0.004,0.000)。

3 結(jié) 論

我國(guó)肝癌患者預(yù)后較差，這與肝癌細(xì)胞具有較強(qiáng)的侵襲轉(zhuǎn)移特性密切相關(guān)。腫瘤干細(xì)胞理論的提出為治愈惡性腫瘤提供了理論基礎(chǔ)。CD90是一種免疫球蛋白，其主要功能是參與細(xì)胞與基質(zhì)之間的物質(zhì)交換。在胸腺細(xì)胞、T細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等多種細(xì)胞中均有表達(dá)。近期研究顯示，CD90為腫瘤標(biāo)志物之一，在食管癌、肺癌、胃癌中均有表達(dá)〔5〕。CXCR4在人體多種細(xì)胞和組織中均有表達(dá)，對(duì)人體的炎癥修復(fù)、心臟系統(tǒng)的發(fā)育、神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、免疫體統(tǒng)的穩(wěn)定均具有重要作用。同時(shí)也有研究證實(shí)，CXCR4對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移及惡化具有重要影響〔6〕。因此腫瘤轉(zhuǎn)移可能與原發(fā)灶器官及靶器官的中趨化因子有關(guān)。

本研究說(shuō)明CD90與CXCR4在肝癌組織中均有較高表達(dá)。此外，本研究結(jié)果提示，CD90及CXCR4可能在腫瘤的生長(zhǎng)、分化及轉(zhuǎn)移中均有促進(jìn)作用。其中CD90標(biāo)記細(xì)胞具有較高的轉(zhuǎn)移能力，同時(shí)對(duì)血管的生成具有促進(jìn)作用，而腫瘤血管的生成是形成腫瘤的必要因素〔7〕。經(jīng)過(guò)1年隨訪調(diào)查提示CD90及CXCR4對(duì)肝癌復(fù)發(fā)具有促進(jìn)作用。相關(guān)報(bào)道發(fā)現(xiàn)〔8〕，肝癌組織中分選的CD90+亞群比CD90-亞群具有更強(qiáng)的成瘤能力，可促進(jìn)細(xì)胞增殖并抑制細(xì)胞凋亡，但其具體致癌機(jī)制尚不清楚，需進(jìn)一步研究。研究顯示〔9〕，CXCR4可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞進(jìn)入骨髓細(xì)胞龕，有利于腫瘤細(xì)胞躲避機(jī)體免疫系統(tǒng)的攻擊，并且CXCR4能作用于內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)而促進(jìn)腫瘤血管的生成。說(shuō)明CXCR4是肝癌組織浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因子，這為研究肝癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移提供了新的思路。

綜上所述，CD90與CXCR4在肝癌組織中均呈高表達(dá)，與肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化及病情的嚴(yán)重程度有關(guān)，而且臨床檢測(cè)CD90和CXCR4有助于及時(shí)了解肝癌患者術(shù)后早期復(fù)發(fā)情況，為改善患者預(yù)后提供參考。

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〔2016-10-22修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)

張 浩(1976-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事肝臟及胰腺腫瘤研究。

汪 旭(1978-)，男，主治醫(yī)師，主要從事肝臟及膽道腫瘤研究。

R735.7

A

1005-9202(2017)02-0399-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.02.062