譚曉霞，黃珍珍，徐曉紅

(麗水市婦幼保健院檢驗(yàn)科，浙江 麗水 323000)

肥胖癥兒童肝纖維化指標(biāo)與血清GPDA活性變化的研究

譚曉霞，黃珍珍，徐曉紅

(麗水市婦幼保健院檢驗(yàn)科，浙江 麗水 323000)

目的 探討肥胖癥兒童肝纖維化指標(biāo)透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、血清Ⅲ型前膠原肽(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(CⅣ)與血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)活性的變化及其在臨床上的應(yīng)用價(jià)值。方法 對(duì)2015年6月至2016年2月在麗水市婦幼保健院兒科門診診斷為肥胖癥的159例6～15歲肥胖癥兒童(肥胖癥組)和42例9～14歲正常健康兒童(正常對(duì)照組)進(jìn)行肝纖維化指標(biāo)與血清GPDA活性的比較，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果 與正常對(duì)照組相比，肥胖癥組HA、PCⅢ水平均明顯升高(t值分別為7.403、5.405，均P<0.05)，以PCⅢ升高明顯；肥胖癥組GPDA活性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=8.965，P<0.01)。肥胖癥患兒治療前后GPDA活性、HA及PCⅢ指標(biāo)比較，各檢測(cè)項(xiàng)目均出現(xiàn)降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值分別為6.452、5.684、4.369，均P<0.05)。PCⅢ與GPDA呈正相關(guān)(r=0.602，P<0.05)。結(jié)論 肥胖癥兒童GPDA活性與PCⅢ水平的改變是其肝臟病變的早期敏感指標(biāo)，兩者的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，對(duì)于診斷、療效觀察有一定的臨床意義。

肥胖癥；透明質(zhì)酸；層粘連蛋白；Ⅲ型前膠原肽；膠原；甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶

肥胖癥兒童發(fā)病率逐年增加是造成青少年無(wú)癥狀轉(zhuǎn)氨酶增高的主要原因，部分可以轉(zhuǎn)化為肝纖維化和肝硬化，甚至終末期肝病[1],肝纖維化為病程發(fā)展的重要環(huán)節(jié)。甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(glycylproline dipeptidyl aminopeptidase,GPDA)是一種二肽氨基肽酶，它廣泛存在于肝、腎、唾液腺、結(jié)締組織和血清中。國(guó)內(nèi)外有關(guān)研究表明，肝膽疾病患者血清GPDA顯著上升[2]。近年來(lái)對(duì)GPDA的研究報(bào)道，以消化系統(tǒng)腫瘤患者GPDA的變化多見，本文對(duì)肥胖癥患兒肝纖維化指標(biāo)及GPDA的變化進(jìn)行研究，對(duì)其在臨床上的意義進(jìn)行探討和分析。

1材料和方法

1.1研究對(duì)象

選取2015年6月至2016年2月在麗水市婦幼保健院兒科門診診斷為肥胖癥的兒童共159例為肥胖癥組，其中男性97例，女性62例；年齡6～15歲，平均(10.67±2.59)歲；體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為(28.26±4.31)kg/m2，其位于2000年全國(guó)學(xué)生體質(zhì)調(diào)研同年齡同性別第95百分位以上，符合肥胖兒童的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。同時(shí)選取愿意在本院進(jìn)行治療的肥胖癥患兒43例，進(jìn)行治療前后對(duì)比。取同期在本院體檢中心接受體檢的部分健康兒童為正常對(duì)照組，按序隨機(jī)入組，經(jīng)常規(guī)檢查排除心、肝、腎、肺等疾病，共42例，其中男性29例，女性13例；年齡9～14歲，平均(11.06±1.29)歲；BMI為(16.97±1.23)kg/m2，其位于2000年全國(guó)學(xué)生體質(zhì)調(diào)研同年齡同性別第85百分位以下[3]。兩組患兒性別構(gòu)成、平均年齡差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。

1.2檢測(cè)方法

1.2.1甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的測(cè)定

采用連續(xù)監(jiān)測(cè)法，即GPDA催化反應(yīng)底物甘氨酰脯氨酰對(duì)硝基苯胺對(duì)甲苯磺酸鹽水解，生成甘氨酰脯氨酸和對(duì)硝基苯胺，后者的含量與GPDA活性呈正比。測(cè)定試劑盒由溫州伊利康公司提供。測(cè)定儀器為OLYMPUS AU640全自動(dòng)生化分析儀。

1.2.2肝纖維化指標(biāo)的測(cè)定

采用放射免疫法，透明質(zhì)酸(hyaluronic acid，HA)、層粘連蛋白(1aminin，LN)、血清Ⅲ型前膠原肽(serum type Ⅲprocollagen，PCⅢ)、Ⅳ型膠原(type Ⅳcollagen，CⅣ)試劑盒均購(gòu)自上海海軍研究所。測(cè)定儀器為中佳光電GC-1200γ放射免疫計(jì)數(shù)器。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件分析數(shù)據(jù)，呈偏態(tài)分布的計(jì)量資料用中位數(shù)表示，組間比較用非參數(shù)檢驗(yàn)的兩個(gè)獨(dú)立樣本的Mann-WhitneyU檢驗(yàn)；血清GPDA與肝纖維化指標(biāo)之間的相關(guān)性用Pearson相關(guān)分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組兒童肝纖維化指標(biāo)與甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶活性的比較

與正常對(duì)照組相比，肥胖癥組的HA、PCⅢ水平升高明顯(均P<0.05)，尤其以PCⅢ明顯；肥胖癥組GPDA活性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表1。

表1 兩組兒童肝纖維化指標(biāo)與GPDA活性比較±S)

2.2肥胖癥患兒治療前后甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶活性、透明質(zhì)酸與Ⅲ型前膠原肽的比較

選取的43例本院治療肥胖癥患兒治療后GPDA活性、HA及PCⅢ指標(biāo)均有所降低，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，見表2。

2.3相關(guān)結(jié)果分析

肥胖癥患兒GPDA與各肝纖維化指標(biāo)HA、LN、PCⅢ、CⅣ經(jīng)相關(guān)性分析顯示均呈正相關(guān)(r值分別為0.348、0.113、0.602、0.144，均P<0.05)；其中與PCⅢ相關(guān)性較強(qiáng)，有一定的臨床意義，進(jìn)一步選擇分析GPDA與PCⅢ間的相關(guān)性，回歸方程為：Y=26.307X-61.782，r=0.602，P<0.05。

3討論

肥胖的真正含義是人體內(nèi)脂肪細(xì)胞增多或細(xì)胞體積增大，或者兩種情況同時(shí)存在，導(dǎo)致體內(nèi)脂肪成分顯著增高。有研究表明，兒童、青少年肥胖很有可能延續(xù)至成年人，并且與許多成年期慢性疾病，如高血壓、高脂血癥、糖尿病及動(dòng)脈粥樣硬化性心、腦血管疾病有非常密切的關(guān)系，導(dǎo)致這些疾病的患病率和病死率急劇上升[4]，因此如何早期預(yù)防與治療是降低此類疾病發(fā)生的一重要環(huán)節(jié)。

3.1肥胖癥患兒肝纖維化指標(biāo)和甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶檢測(cè)的狀況

已往研究結(jié)果證實(shí)血清肝纖維化指標(biāo)HA、LN、PCⅢ和CⅣ是實(shí)驗(yàn)室反映細(xì)胞外基質(zhì)代謝的重要血清學(xué)指標(biāo)，其含量升高表明患者體內(nèi)已開始啟動(dòng)肝纖維化，與肝纖維化的活性呈相關(guān)性[5]。因此可以認(rèn)為此類指標(biāo)是臨床判斷肝纖維化程度和評(píng)價(jià)抗纖維化治療療效的一種主要非創(chuàng)傷性指標(biāo)[6-7]。本研究發(fā)現(xiàn)肥胖癥患兒存在血清PCⅢ和HA異常，特別是PCⅢ表現(xiàn)異常，因此認(rèn)為肥胖癥患兒已存在一定程度的纖維化傾向。

GPDA于1966年被發(fā)現(xiàn)迄今，其生理功能尚未能完全闡明。已知GPDA與機(jī)體膠原蛋白的肽鏈降解及更新有關(guān)。GPDA主要是能特異性地水解N末端為甘氨酰脯氨酸的肽鍵，而膠原分子中富含此種結(jié)構(gòu)，故某些疾病膠原代謝的變化有可能改變此酶的活性。已往文獻(xiàn)報(bào)道血清GPDA活性升高多作為肝臟發(fā)生病變的判斷指標(biāo)，但對(duì)肥胖癥患者GPDA活性的變化意義過(guò)去研究甚少[2]。本研究結(jié)果表明，肥胖癥患兒血清GPDA水平與健康兒童相比有較大幅度上升，說(shuō)明患兒肝纖維化所致肝臟已出現(xiàn)一定程度的損傷。

3.2肥胖癥患兒肝纖維化指標(biāo)和甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶檢測(cè)兩者間關(guān)聯(lián)分析

本研究發(fā)現(xiàn)，43例肥胖癥患兒治療后GPDA活性、HA及PCⅢ水平均出現(xiàn)降低(均P<0.05)，提示通過(guò)治療，肥胖癥患兒纖維化趨勢(shì)得到了有效減緩，肝損傷程度有所逆轉(zhuǎn)。

出現(xiàn)肥胖癥患兒血清GPDA活性上升的機(jī)制，一方面可能與這個(gè)年齡段的男孩發(fā)育旺盛，骨骼系統(tǒng)生長(zhǎng)迅速，膠原含量增高劇烈有關(guān)；另一方面與肥胖癥患兒出現(xiàn)早期肝纖維化傾向有關(guān)，肝纖維化的重要特征為結(jié)締組織增生，而結(jié)締組織中富含GPDA，因此在細(xì)胞分化過(guò)程中，產(chǎn)生較多的膠原酶，分解膠原，啟動(dòng)肝組織及肝細(xì)胞的正常修復(fù)[8]。GPDA作為膠原分解過(guò)程中的二肽氨基肽酶，參與了膠原的降解代謝，故患者血中GPDA濃度上升。

本研究也證實(shí)了肥胖癥患兒GPDA與肝纖維化指標(biāo)變化密切相關(guān)，從GPDA與肝纖維化指標(biāo)的相關(guān)性分析看出，兩者呈不同程度的正相關(guān)，特別與PCⅢ顯示出較強(qiáng)相關(guān)性(r=0.602)，因此結(jié)合血清GPDA與PCⅢ的聯(lián)合監(jiān)測(cè)可作為了解肝損傷程度、肝纖維化程度及治療后療效評(píng)價(jià)的一個(gè)重要參考指標(biāo)。另外，從對(duì)GPDA與肝纖維化指標(biāo)的動(dòng)態(tài)觀察結(jié)果亦表明，肥胖癥患兒各項(xiàng)指標(biāo)術(shù)后有不同幅度下降，這從一定程度上說(shuō)明GPDA與肝纖維化指標(biāo)可用于臨床療效及病情監(jiān)測(cè)。

[1]Brunt E M.Nonalcoholic fatty liver disease: pros and cons of histologic systems of evaluation[J].Int J Mol Sci,2016,17(1):97.

[2]Chen W X,Xu C Q,Chen S H,etal.Citric acid reduces the decline in P300 amplitude induced by acute alcohol consumption in healthy adults[J].J Zhejiang Univ Sci B,2012,13(5):395-401.

[3]中國(guó)肥胖問題工作組.中國(guó)學(xué)齡兒童青少年超重、肥胖篩查體重指數(shù)值分類標(biāo)準(zhǔn)[J].中華流行病學(xué)雜志,2004,25(2):97-102.

[4]Tandra S, Yeh M M, Brunt E M,etal.Presence and significance of microvesicular steatosis in nonalcoholic fatty liver disease[J].J Hepatol,2011,55(3):654-659.

[5]徐銘益,陸倫根.肝纖維化血清學(xué)標(biāo)志物及診斷模型的診斷價(jià)值[J].中華肝臟病雜志,2014,22(9):647-649.

[6]Szybowska P,Wojcik M,Starzyk J B,etal. Enhanced liver fibrosis (ELF) test in obese children with ultrasound-proven liver steatosis.[J].Neuro Endocrinol Lett,2015,36(7):700-705.

[7] Schiaffini,Liccardo,Alisi A,etal. Early glucose derangement detected by continuous glucose monitoring and progression of liver fibrosis in nonalcoholic fatty liver disease:anIndependent predictive factor [J]. Hormone Research in Paediatrics,2016,85(1):29-34.

[8]Schwimmer J B,Lavine J E,Wilson L A,etal. In children with nonalcoholic fatty liver disease, cysteamine bitartrate delayed release improves liver enzymes but does not reduce disease activity scores [J]．Gastroenterology,2016,151(6):1141-1154.

[專業(yè)責(zé)任編輯：帖利軍]

Research of hepatic fibrosis indicators and serum glycylproline dipeptidyl aminopeptidase activity changes in obese children

TAN Xiao-xia, HUANG Zhen-zhen, XU Xiao-hong

(DepartmentofClinicalLaboratory,LishuiMaternalandChildHealthCareHospital,ZhejiangLishui323000,China)

Objective To discuss the changes of hepatic fibrosis indicators such as hyaluronic acid (HA), laminin (LN), serum procollagen peptide Ⅲ (PCⅢ), collagen Ⅳ (CIV) and serum glycylproline dipeptidyl aminopeptidase (GPDA) activity in obese children and their clinical application value. Methods Hepatic fibrosis indicators and serum GPDA activity were compared between 159 patients of 6 to 15 years old diagnosed as obesity in pediatric outpatient department of Lishui Maternal and Child Health Care Hospital from June 2015 to February 2016 (obese group) and 42 healthy children of 9 to 14 years old (control group). Results were compared between two groups. Results Compared to the control group, HA and PCIII levels in the obese group increased significantly (tvalue was 7.403 and 5.405, respectively, bothP<0.05), especially the increase of PCⅢ. The difference in GPDA activity between two groups had significant difference (t=8.965,P<0.01). Comparison to GPDA activity, HA and PCⅢ levels in obese children before treatment, they decreased after treatment and the differences were statistically significant (tvalue was 6.452, 5.684 and 4.369, respectively, allP<0.05). PCⅢ showed a positive correlation with GPDA (r=0.602,P<0.05). Conclusion Changes of GPDA activity and PCⅢ level in obese children are sensitive indicators of liver lesions at early stage. Dynamic monitoring of both indicators has clinical significance for diagnosis and clinical efficacy observation.

obesity; hyaluronic acid (HA); laminin (LN); procollagen peptide III (PCIII); collagen; glycylproline dipeptidyl aminopeptidase (GPDA)

2016-04-10

譚曉霞(1977-)，女，副主任技師，主要從事臨床生化及免疫工作。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.01.008

R153.2

A

1673-5293(2017)01-0021-02