□ 王 麗 煙臺市福山區(qū)檢驗檢測中心

高效液相色譜儀在食品檢驗中的應用

□ 王 麗 煙臺市福山區(qū)檢驗檢測中心

社會的進步和經(jīng)濟的發(fā)展使人們的生活水平得到了極大的提高，人們對食品質(zhì)量的要求也越來越高。高效液相色譜在食品檢驗方面具有敏感、流動相選擇范圍廣、高速、高壓和高效等優(yōu)點，這些優(yōu)點使高效液相色譜在食品安全檢測中得到廣泛應用，在保障食品安全方面起著重要作用。高效液相色譜技術靈敏度高、檢測限制低使得它逐漸成為最為重要的食品檢測技術。

食品檢測；高效液相色譜技術；應用

高效液相色譜技術是一項已發(fā)展成熟的技術，在經(jīng)典液相色譜法的基礎上，將氣相色譜實驗方法與理論相結合，通過在線檢測、高壓泵輸送流動相和高效固定相等方法形成的。高效液相色譜的主要組成是進樣器、控制器、高壓輸液泵、處理系統(tǒng)、貯液器、數(shù)據(jù)獲取、色譜柱和檢測器等[1]。

1 實驗部分

1.1 儀器與試藥

儀器：液相色譜儀；電子天平；超聲儀；離心機；紫外光度計。

試藥：番茄汁；杏汁；黑加侖汁；紅棗汁；蘿卜汁；石榴汁；香梨汁；稀氨水、甲醇：HPLC級；0.02 mol／L乙酸銨溶液；安賽蜜(乙酰磺胺酸鉀)標準儲備液1.00 mg／mL；山梨酸標準儲備液1.00 mg／mL；糖精鈉標準儲備液1.00 mg／mL；苯甲酸標準儲備液1.00 mg／mL；脫氫乙酸標準儲備液[2]。

1.2 便攜式高效液相色譜儀的評價

泵耐壓檢測方面，連接好儀器的各個部分，其中流動相環(huán)節(jié)使用100%的甲醇，流量設置為2 mL/min。儀器開始運行之后，維持壓力穩(wěn)定，使用濾紙檢查不同管路的連接位置，確保這些位置未發(fā)生漏液問題。把色譜柱取下來之后堵住泵的出口位置，逐漸加大壓力直到最大值的80%，在持續(xù)10 min后，再次檢查泵出口端有沒有泄漏。

高效液相色譜法優(yōu)點顯著，它的流動相種類多，檢測靈敏度高，操作自動化，應用范圍廣，速度快，重復性高，分離效率高，選擇性好，色譜柱可以反復使用，自動化操作，不受試樣的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性限制，應用范圍廣，對于溫度需求不高，室溫下便可分析，分辨率以及精確度都比較理想。液相色譜法有著非常廣泛的用途，在合成化學領域、環(huán)境監(jiān)測領域、臨床化學領域、藥物研究領域、食品檢驗領域、石油化學領域以及生命科學領域等都有應用。比如在檢測食品當中污染物的時候，可以分析多環(huán)芳烴、微量元素、大腸桿菌毒素以及黃桿菌毒素等。

2 溶液制備

2.1 對照品制備

分別取對照品降糖藥5 mg、甲苯磺丁脲10 mg，0.45 μm的微孔濾膜，將甲苯磺丁脲過濾，對照品貯備液便是過濾剩下的濾液，細粉置于50 mL的量瓶中，再加入適量的甲醇，經(jīng)超聲溶解，冷卻至室溫后再定容、搖勻。

2.2 供試品溶液

取服用量作為供試品，研細之后放入100 mL容量瓶當中，然后添加40 mL甲醇，通過30 min的超聲處理使其溶解，冷卻至室溫，定容、搖勻，使用0.3μm微孔濾膜進行過濾，得到的溶液就是續(xù)濾液。

3 結果

3.1 輸液系統(tǒng)評價

液相色譜儀最為關鍵的組成部分之一就是輸液系統(tǒng)，輸液系統(tǒng)是把貯液器中的流動相送入液路系統(tǒng)。然后液相色譜分析直徑的大小以及色譜柱的直徑，這就加大了填充劑的阻力，而檢測泵耐壓有高柱前壓和高速液流；分辨率的穩(wěn)定性、峰面積的重現(xiàn)性、定量精度、保留時間、流動相都直接影響到流速是否平穩(wěn)，這就需要檢測泵的流量穩(wěn)定性誤差（SR）比較小以及汞流量誤差（SS）小。根據(jù)“輸液系統(tǒng)的評價”的方法檢測泵耐壓，儀器平穩(wěn)后高效液相色譜法優(yōu)點顯著，它的流動相種類多，檢測靈敏度高，操作自動化，應用范圍廣，速度快，重復性高，分離效率高，選擇性好，不受熱穩(wěn)定性限制，應用范圍廣，對于溫度需求不高，室溫下便可分析，分辨率高、精確度高等。儀器運行之后，需要維持壓力平衡，并且使用濾紙檢查各個管路連接的位置，確保沒有滲漏問題。這就證明了泵耐壓符合要求。泵流量設定值誤差（SS）和流量穩(wěn)定性誤差（SR）均符合要求。

3.2 整機性能的評價

液相色譜儀主要部件包括色譜柱、進樣器、輸液系統(tǒng)和檢測器等，其性能在峰面積、保留時間方面都會受到一定程度的影響，為了判斷儀器整機運行性能，應用用相關方法來對液相色譜儀加以檢測，如果峰面積的相對標準偏差不大于3.0%，色譜峰持續(xù)的時間同標準偏差對比不大于2.0%，就符合行業(yè)相關標準的規(guī)定。

3.3 系統(tǒng)適用性

為了分析液相色譜法能否用來檢查實際樣品，需要對系統(tǒng)進行適用性的試驗，將制備得到的對照品液以及根據(jù)比例制作得到的混合液檢測，將結果與安捷倫HP1100液相色譜相比，樣品在安捷倫HP1100液相色譜儀、便攜式高效液相色譜儀上的峰形、出峰順序大體相同，相鄰峰的分離度、各色譜峰超過了1.5，格列本脲、格列喹酮、羅格列酮、格列吡嗪和格列美脲的理論板數(shù)均超過了2 000，系統(tǒng)適用性試驗符合要求。

3.4 線性關系

線性關系可以說是液相色譜在定量分析過程當中的關鍵，為了分析便攜式高效液相色譜儀的色譜，對降糖藥加以測定，在此過程當中持續(xù)記錄色譜圖。結果顯示對照品的濃度（μg/ mL）與峰面積存在明顯的線性關系。

4 結論

高效液相色譜法優(yōu)點顯著，它具有流動相種類多、檢測靈敏度高、操作自動化和應用范圍廣等優(yōu)點。

[1]李小盼,陳海紅.高效液相色譜技術在食品藥品檢驗中的應用探討[J].醫(yī)藥,2016，6(9):127-127.

[2]金煒.食品安全監(jiān)督管理中的檢驗以及液相色譜檢查方法[J].食品安全導刊,2016,14(6):27-28.