黃 強(qiáng) ，張 勇，劉富強(qiáng)

1.陜西省人民醫(yī)院心內(nèi)一科(西安710068)，2.西安市高陵區(qū)醫(yī)院內(nèi)三科(西安710200)

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·臨床研究·

血清抗衰老因子Klotho水平與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的關(guān)系*

黃 強(qiáng)1,2，張 勇1，劉富強(qiáng)1

1.陜西省人民醫(yī)院心內(nèi)一科(西安710068)，2.西安市高陵區(qū)醫(yī)院內(nèi)三科(西安710200)

目的：觀察冠心病患者與正常人群血清Klotho蛋白水平，探討Klotho在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中的作用。方法：對(duì)行冠狀動(dòng)脈造影確診冠心病患者30例及冠狀動(dòng)脈正常30例采用SYNTAX評(píng)分評(píng)估冠脈情況，采用酶聯(lián)免疫吸附方法(ELISA方法)測(cè)定血清Klotho的含量。結(jié)果：冠心病組血清Klotho水平明顯降低[(48.7±6.6)pg/ml與(24.9±6.2)pg/ml,P<0.05]；進(jìn)一步相關(guān)分析表明：血清Klotho水平與冠脈SYNTAX評(píng)分發(fā)現(xiàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的相關(guān)性(r=0.59，P=0.038)。結(jié)論：冠心病患者血清Klotho水平明顯降低，有可能在將來(lái)成為冠心病早期識(shí)別更加方便、快捷的標(biāo)記物。

冠心病是危險(xiǎn)人類健康的重大疾病之一，Klotho基因在小鼠中表達(dá)缺陷時(shí)會(huì)引起一系列類Klotho基因缺陷的小鼠可以表現(xiàn)出早衰，如動(dòng)脈粥樣硬化、骨質(zhì)疏松及癡呆等。本研究通過(guò)觀察冠心病患者Klotho水平，探討Klotho與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系。

資料與方法

1 一般資料 2014年1-12月陜西省人民醫(yī)院內(nèi)一科就診的冠心病患者30例，按照年齡匹配原則選擇對(duì)照組30例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡18～65歲；②初次就診行冠脈造影術(shù)明確冠脈病變，冠心病組冠脈主支血管大于50%以上狹窄，對(duì)照組未見(jiàn)明顯冠脈病變者；③無(wú)服用心血管藥物史；④同意參加本研究并簽署知情同意書。

2 研究方法

2.1 臨床調(diào)查：調(diào)查所有患者冠心病相關(guān)的危險(xiǎn)因素，包括性別、年齡、吸煙、飲酒、高血壓、糖尿病及家族史等，完善血脂、肝腎功能、C-反應(yīng)蛋白、心電圖、心臟彩超、頸動(dòng)脈超聲等檢查。

2.2 冠脈造影結(jié)果評(píng)分：對(duì)受試者進(jìn)行冠脈造影，冠脈病變采用SYNTAX評(píng)分進(jìn)行評(píng)估，一處病變的SYNTAX積分等于冠脈節(jié)段的權(quán)重因子與該處病變狹窄程度的倍增因子的乘積，再加上病變不良特點(diǎn)的附加因子。所有病變的總分值相加之和即為該患者的SYNTAX的評(píng)分。所有評(píng)估方法由兩名經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)生協(xié)商進(jìn)行。

2.3 血清Klotho測(cè)定：采血標(biāo)本前一天20:00后禁食，清晨空腹抽取血標(biāo)本，血清Klotho水平采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定，具體操作按試劑盒說(shuō)明書。試劑盒及檢測(cè)方法的各項(xiàng)指標(biāo)、室內(nèi)質(zhì)量控制指標(biāo)和其他質(zhì)控參數(shù)均在允許范圍內(nèi)。Klotho試劑盒購(gòu)自美國(guó)Eversystems biology laboratory inc。

結(jié) 果

1 兩組基線資料比較 見(jiàn)表1。30例冠心病患者與30例對(duì)照組均完成試驗(yàn)，兩組除SYNTAX評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)外，其余各項(xiàng)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

表1 兩組受試者基線資料比較

2 兩組血漿超敏C反應(yīng)蛋白比較 冠心病受試者血壓較正常組血漿超敏C反應(yīng)蛋白水平明顯高[(6.12±1.8)mg/L與(2.3±1.2)mg/L]， 兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3 兩組血清Klotho蛋白水平比較 見(jiàn)圖1。與對(duì)照組相比，冠心病組血清Klotho水平明顯降低[(48.7±6.6)pg/ml與(24.9±6.2)pg/ml,P<0.05]。

圖1 兩組血清Klotho蛋白水平比較

4 血清Klotho蛋白水平與冠脈病變?cè)u(píng)分關(guān)系 進(jìn)一步相關(guān)分析表明：血清Klotho水平與冠脈SYNTAX評(píng)分發(fā)現(xiàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的相關(guān)性(r=0.59，P=0.038)。

討 論

Klotho基因是一種與衰老疾病密切相關(guān)的基因，由5個(gè)外顯子、4個(gè)內(nèi)含子組成，定位于染色體的13q12，Klotho蛋白主要在腎臟和腦組織表達(dá)，分為膜結(jié)合型和分泌型兩種,它們分別是膜結(jié)合受體和體液調(diào)節(jié)因子,能通過(guò)如調(diào)節(jié)維生素D和鈣、內(nèi)皮功能、氧化應(yīng)激、能量代謝等途徑,對(duì)衰老過(guò)程進(jìn)行調(diào)節(jié)。近年相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)Klotho基因敲除小鼠出現(xiàn)血壓升高、動(dòng)脈硬化、血管鈣化等心血管系統(tǒng)衰老的表現(xiàn)[1-2]。

內(nèi)皮功能損傷是冠狀動(dòng)脈硬化形成的重要環(huán)節(jié)，Klotho基因缺陷小鼠在出生4周即可出現(xiàn)動(dòng)脈硬化，表現(xiàn)為動(dòng)脈嚴(yán)重鈣化,肌性中動(dòng)脈中層鈣化、內(nèi)膜增厚等，同時(shí)依賴乙酰膽堿的動(dòng)脈舒張功能明顯下降，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)Klotho蛋白及其代謝產(chǎn)物可以通過(guò)抑制胰島素/胰島素樣生長(zhǎng)因子-1信號(hào)通路，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化應(yīng)激能力，并能促進(jìn)內(nèi)皮源性NO合成[3]。Klotho基因與冠心病之間的關(guān)系在人群中也得到多方面的印證。Imamura 等研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)生日本人群患者中Klotho基因G-395A攜帶者的冠心病發(fā)病率明顯高于健康人群[4]。近年來(lái)有研究顯示人群血清Klotho水平與心血管疾病發(fā)生率呈負(fù)相關(guān)，血清Klotho水平低人群患心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)明顯升高。Lim 等[5]發(fā)現(xiàn)Klotho 及FGF受體在人動(dòng)脈血管上表達(dá)，提示Klotho蛋白可能與小鼠動(dòng)物模型相似在人體內(nèi)皮細(xì)胞功能調(diào)節(jié)方面發(fā)揮作用。劉威等[6]研究發(fā)現(xiàn)急性心肌梗死患者血清klotho表達(dá)水平顯著降低。Navarro-González等發(fā)現(xiàn)低Klotho水平與冠脈病變程度有關(guān)[7]，更進(jìn)一步有學(xué)者提出低Klotho可能是動(dòng)脈硬化的一種預(yù)測(cè)因子[8]。本研究發(fā)現(xiàn)，冠心病患者血清Klotho水平明顯低于冠脈正常人群，與前述研究結(jié)果一致，同時(shí)發(fā)現(xiàn)Klotho水平與冠脈病變程度成負(fù)相關(guān)，提示Klotho有可能成為冠心病早期識(shí)別的生化指標(biāo)。

總之，本研究發(fā)現(xiàn)冠心病患者血清Klotho水平明顯降低，其可能通過(guò)減少血管內(nèi)皮NO合成進(jìn)而導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的形成，同時(shí)Klotho有可能在將來(lái)成為冠心病早期識(shí)別更加方便、快捷的標(biāo)記物。

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(收稿：2016-07-15)

Relation of serum Klotho level and coronary atherosclerosis

Huang Qiang,Zhang Yong,Liu Fuqiang.

First Department of Cardiology,Shaanxi Provincial People’s Hospital (Xi’an 710068)

Objective：To investigate serum Klotho level and coronary atherosclerosis. Methods： Thirty patients with coronary heart disease and normal coronary artery were screened for coronary angiography. The SYNTAX score was used to evaluate the coronary artery. The concentration of serum Klotho was measured by an immunoenzyme method (ELISA). Results： Serum Klotho levels in patients with coronary heart disease was significantly lower than that of the normal control group[ (48.7±6.6)pg/ml vs(24.9±6.2)pg/ml,P<0.05]; Furthermore, significant correlation was found between Klotho level and SYNTAX score (r=0.59，P=0.038). Conclusion： The Klotho level decreases significantly in coronary heart disease patients, which may be a more convenient marker of early recognition of coronary heart disease in the future.

Coronary arteriosclerosis/etiology Coronary arteriosclerosis /diagnosis Coronary angiography @ Klotho

*國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金資助項(xiàng)目(81200512)

冠狀動(dòng)脈硬化/病因?qū)W 冠狀動(dòng)脈硬化/診斷 冠狀血管造影術(shù) @Klotho

R541.4

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.01.005