□ 房 磊 天津市濱海新區(qū)大港產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所

高效液相色譜法對(duì)膨化食品中合成色素的測(cè)定

□ 房 磊 天津市濱海新區(qū)大港產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所

人工合成色素往往比天然色素的色彩更為鮮艷，并能長(zhǎng)久持續(xù)的保存。同時(shí)，人工合成色素比天然色素的價(jià)格更為低廉，且堅(jiān)牢度與穩(wěn)定性較高。但食品中添加的色素往往屬于非營(yíng)養(yǎng)成分，且人工合成色素在制造過(guò)程中大多數(shù)會(huì)選擇煤焦油作為提煉的原料，因此在食品中過(guò)多的添加人工合成色素可能會(huì)對(duì)人們的身體健康造成一定的影響。再者，一些昧著良心的食品生產(chǎn)廠家為提高食品的銷量，常會(huì)在食品中過(guò)量地添加人工合成色素，對(duì)消費(fèi)者的健康產(chǎn)生一定的影響。所以，檢測(cè)食品中的人工合成色素十分必要。本文利用高效液相色譜法測(cè)定膨化食品中合成色素，不僅僅操作簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確，并且還具有良好的測(cè)定效果。

材料和方法

材料與試劑

水，杭州娃哈哈集團(tuán)飲用純凈水5 96m L；氨水，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；甲酸，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；氨，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；誘惑紅，天津市衛(wèi)生防疫中心，0.5 m g/m L；日落黃，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，0.5 m g/m L；胭脂紅，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，0.5 m g/m L；甲醇，di k mAPure；乙醇，di k mAPure；乙覓菜紅，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，0.5 m g/m L；新紅，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所，0.5 m g/m L；亮藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)品，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心0.5 m g/m L；檸檬黃，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，0.5 m g/m L。其余試劑均為分析純。

儀器與設(shè)備

Mi l li-Q去離子水制備系統(tǒng)，美國(guó)Mi l liPor e公司；K Q-5200d E型超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；AL20 4型電子天平，梅特勒-托利多公司；Td L-5-A型離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠；wAterSACQ Ui tY H-ClASs超高效液相色譜儀，配有二極管陣列檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、高壓泵和EmPower2色譜工作站。

色譜條件

（1）色譜柱。進(jìn)樣體積：5 μg；柱溫：25 ℃；ACQ Ui tY UPLCBeHC18（2.1 m m×50m m， 1.7 μm）。流速：0.25 m L/mi n；檢測(cè)波長(zhǎng)：254n m和627 n m；流動(dòng)相：甲醇和乙酸銨（0.02mol/L）水溶液；洗脫梯度見(jiàn)表1。

（2）標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。將質(zhì)量濃度0.5 m g/m L的色素單標(biāo)溶液，根據(jù)需要混合，并用娃哈哈飲用純凈水稀釋成質(zhì)量濃度分別為1.0、5.0、25.0、5 0.0、100.0 μg/m L和20 0.0 μg/m L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，

經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾后待測(cè)。

結(jié)果

新紅黃、檸檬黃、胭脂黃、覺(jué)菜紅黃和日落黃在1～200μg/m L，亮藍(lán)、誘惑紅黃在2～200μg/m L的范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)0.999 6～0.999 9，平均回收率為8 7%～105%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差0.5%～3.1%，檢出限為0.1 0～0.30m g/k g。

表1 洗脫梯度

結(jié)語(yǔ)

本文采用乙醇＋氨水＋水（7＋2＋1）的混合提取液對(duì)樣品存在的人工合成色素直接進(jìn)行超聲提取，此操作不僅能縮短預(yù)處理的時(shí)間，還能縮短人工合成色素的提取時(shí)間。本文構(gòu)建的UPLC法，在短柱填充時(shí)選擇小顆粒填充，不僅能夠包含較高的柱效，還具有低擴(kuò)散體積的特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)中的流動(dòng)相選擇了甲醇和乙酸銨（0.02mol/L）水溶液。與此同時(shí)，針對(duì)食品中存在的人工合成色素的檢測(cè)構(gòu)建了UPLC進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)。本文研究結(jié)果表明，該方法具有靈敏、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)、快速四大特點(diǎn)，且該方法不僅能夠有效地檢測(cè)膨化食品，還能有效地監(jiān)控膨化食品市場(chǎng)，使我國(guó)膨化食品的市場(chǎng)安全得到有效保障。選擇梯度洗脫，變化波長(zhǎng)檢測(cè)膨化食品中亮藍(lán)、胭脂紅、日落黃，主要是利用每種色素具備的最大可見(jiàn)吸收波長(zhǎng)，間接地提高檢測(cè)靈敏度，降低干擾峰對(duì)目標(biāo)峰的影響。在對(duì)選擇樣品的進(jìn)行處理前，需在試樣清液中添加了聚酰胺粉，然后根據(jù)試樣清液的具體吸附情況確定樣品添加的聚酰胺粉的劑量，從而使色素吸附的狀況相對(duì)于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定方法更完全。在處理選擇的樣品前中，首先是樣品的定容，然后再對(duì)樣品高速離心，最好并取高速離心的上清液，選擇聚酰胺粉法過(guò)注射器管小柱，然后使多個(gè)樣品同一時(shí)間共同處理，并且能夠使目標(biāo)成分提取比較完全，且相對(duì)于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的垂融漏斗抽濾法的損失較少、操作也簡(jiǎn)單易行。