用megaTAL 核酸酶對原代人T 細(xì)胞CCR5 基因座進(jìn)行有效修飾可建立HIV-1 抵抗力

已有研究表明，HIV-1 協(xié)同受體( co-receptor) CCR5 基因中自然發(fā)生的32 個(gè)堿基對缺失( 32-base pair deletion)可保護(hù)人CD4+T細(xì)胞，對抗HIV感染。最近，用工程化核酸酶干擾該基因和模擬此突變的基因工程方法展示了HIV 治療獲得成功的跡象。Romano Ibarra 等研制了一個(gè)靶向CCR5 基因第3 細(xì)胞外莖環(huán)( extracellular loop)的megaTAL核酸酶，并通過mRNA轉(zhuǎn)染把它導(dǎo)入原代人T細(xì)胞。CCR5megaTAL核酸酶在細(xì)胞系中可產(chǎn)生HIV抵抗力，并高效干擾原代人CD4+T細(xì)胞上CCR5的表達(dá)，分子水平的檢測顯示原代細(xì)胞中該基因座的80%被修飾。將基因修飾細(xì)胞移植到免疫缺陷小鼠時(shí)，其植入率與非基因修飾細(xì)胞相當(dāng)。此外，在免疫缺陷小鼠模型中，HIV-1體內(nèi)感染期間，基因修飾的CD4+細(xì)胞被優(yōu)先地?cái)U(kuò)增。該研究的結(jié)果顯示了用工程化megaTAL核酸酶靶向原代T細(xì)胞CCR5基因的可行性，以及用基因修飾細(xì)胞重建病人免疫系統(tǒng)和抵抗HIV 感染的潛能。

Mol Ther Nucleic Acids，2016，5( 8) : e352( 李光明)