張 鵬

（中國人民解放軍第二0二醫(yī)院，遼寧 沈陽 110000）

骨橋蛋白檢測在子宮頸鱗癌放療預(yù)后中的應(yīng)用價值

張 鵬

（中國人民解放軍第二0二醫(yī)院，遼寧 沈陽 110000）

目的探討骨橋蛋白檢測在子宮頸鱗癌放療預(yù)后中的應(yīng)用價值。方法選擇子宮頸鱗癌患者90例，均接受骨橋蛋白檢測，并進(jìn)行放療，總結(jié)骨橋蛋白檢測在放療預(yù)后效果預(yù)測及評價中的作用。結(jié)果子宮頸鱗癌患者骨橋蛋白陽性率及外周血中的含量越高，其放療預(yù)后效果越差，且外周血中骨橋蛋白含量再次升高，證明患者病情復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。結(jié)論檢測骨橋蛋白可預(yù)測放療的治療效果，還可用于病癥診斷或監(jiān)測治療后的復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移。

子宮頸鱗癌；骨橋蛋白；放療預(yù)后

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2014年1月至2015年10月，在我院接受治療的子宮頸鱗癌患者90例，根據(jù)放療的臨床治療效果分為A、B兩組。A組患者40例，放療后的預(yù)后效果良好，病灶大部分消失，對放療具有較高的靈敏度；B組患者50例，放療后病情未得到有效控制，對放療具有較高的抵抗性。A、B兩組患者排除骨橋蛋白含量，在年齡、性別、病程、FIGO分期等基本資料方面無明顯差異，P＞0.05，組間具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 入選的90例子宮頸鱗癌患者均應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測骨橋蛋白，統(tǒng)計(jì)兩組患者骨橋蛋白陰性例數(shù)及陽性例數(shù)；B組患者接受外周血骨橋蛋白檢測，分別統(tǒng)計(jì)B1、B2、B3三組患者的骨橋蛋白含量。

1.2.2 骨橋蛋白含量檢測：抽取空腹12 h晨起靜脈血5 mL，抗凝儲藏，離心取上清液；OPN標(biāo)準(zhǔn)蛋白稀釋，取骨橋蛋白96孔檢測試劑盒備用；除空白孔依次添加不同濃度的血液樣本，密封反應(yīng)孔，37 ℃孵育90 min；洗板，加生物素化抗體100微升/孔，孵育60 min；洗板，加酶結(jié)合物100微升/孔，孵育30 min；洗板，加顯色劑100微升/孔，孵育15～20 min；加終止液100微升/孔，混勾后即刻測量。

1.2.3 骨橋蛋白陰、陽性檢測：檢測操作：子宮頸4 μm的石蠟組織切片脫蠟水化，浸入檸檬酸緩沖液后采用高溫高壓法修復(fù)切片組織抗原；冷卻后浸泡磷酸鹽緩沖液，添加50 μL、3%的過氧化氫孵育15 min，消除切片內(nèi)源性過氧化物酶活性；沖洗，加入經(jīng)磷酸鹽緩沖液稀釋至10%的小牛血清50 μL，孵育；加1∶200比例稀釋的骨橋蛋白抗體50 μL，孵育；添加二抗50 μL，孵育；沖洗后添加鏈霉素抗生物素-過氧化物酶溶液50 μL，孵育；沖洗，添加染色劑后固封。

結(jié)果統(tǒng)計(jì)：用已知陽性片做陽性染色對照樣本，PBS做陰性染色對照樣本。染色結(jié)果為棕褐色、黃褐色、淺黃色，分別代表強(qiáng)陽性、中度陽性及弱陽性，并依次記錄3分、2分、1分，如樣本無顏色顯示則記0分。陽性細(xì)胞數(shù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果＞50%、25%～50%、＜25%時，分別記錄3分、2分、1分，無陽性細(xì)胞則以0分記錄。每名患者的兩種分?jǐn)?shù)記錄結(jié)果相加，總分＞3分為骨橋蛋白陽性，低于3分為骨橋蛋白陰性。所有樣本分?jǐn)?shù)的判定與統(tǒng)計(jì)均由兩名醫(yī)師同時獨(dú)立完成，當(dāng)結(jié)果出現(xiàn)差異時則由第三名醫(yī)師復(fù)核。

1.3 篩選指標(biāo)：所有入選患者均符合臨床宮頸鱗癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)病理學(xué)檢查確診；排除具有其他癌性病變的患者，排除已具有遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的患者；排除放射治療前接受過手術(shù)治療或其他抗腫瘤治療的患者，且所有患者在放療后均未接受手術(shù)治療；排除妊娠及哺乳期患者，排除具有嚴(yán)重臟器功能衰竭或其他會對研究結(jié)果形成影響的重大疾病患者；排除具有精神病史或已出現(xiàn)精神障礙的患者；所有患者及其家屬對本次觀察內(nèi)容均具有詳細(xì)的了解，自愿參與并能夠積極配合治療，簽署知情同意書。

1.4 評價指標(biāo)：分別統(tǒng)計(jì)A、B兩組患者的骨橋蛋白陽性例數(shù)及陰性例數(shù)，區(qū)別B1、B2、B3三個組別的骨橋蛋白的陽性例數(shù)及陰性例數(shù)，計(jì)算骨橋蛋白陽性率；檢測B1、B2、B3三個組別的骨橋蛋白含量。

1.5 統(tǒng)計(jì)處理：文中數(shù)據(jù)采用SPSS17.0軟件進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料采用%表示，資料采用卡方檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（x-±s）表示，資料采用t值檢驗(yàn)，P＜0.05，數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 A、B兩組骨橋蛋白陽性及陰性例數(shù)：A組患者進(jìn)行放射治療后預(yù)后效果良好，其40例子宮頸鱗癌患者中骨橋蛋白檢查陰性31例，陽性9例，陽性率為22.5%；B組患者進(jìn)行放射治療后預(yù)后效果不理想，其50例子宮頸鱗癌患者中骨橋蛋白檢查陰性14例，陽性36例，陽性率為72%；兩組對比χ2=21.87，P＜0.05，數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 B1、B2、B3三個組別的骨橋蛋白陽性及陰性例數(shù)：B1組患者進(jìn)行放射治療后病情持續(xù)加重，其19例子宮頸鱗癌患者中骨橋蛋白檢查陰性1例，陽性18例，陽性率為94.74%；B2組患者進(jìn)行放射治療后，病情有所好轉(zhuǎn)但局部病灶反復(fù)復(fù)發(fā)，其23例子宮頸鱗癌患者中骨橋蛋白檢查陰性7例，陽性16例，陽性率為69.57%；B3組患者進(jìn)行放射治療后病灶消失，預(yù)后具有遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移，其8例子宮頸鱗癌患者中骨橋蛋白檢查陰性6例，陽性2例，陽性率為25%。B1組與B2組對比，χ2=4.3，P＜0.05；B1組與B3組對比，χ2=14.3，P＜0.05；B2組與B3組對比，χ2=4.9，P＜0.05；數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3 B1、B2、B3三個組別的骨橋蛋白含量：B1組患者進(jìn)行放射治療前的骨橋蛋白含量為（312.4±39.7）ng/mL；B2組患者進(jìn)行放射治療前的骨橋蛋白含量為（265.3±36.5）ng/mL；B3組患者進(jìn)行放射治療前的骨橋蛋白含量為（220.2±34.3）ng/mL。B1組與B2組對比，t=4.00，P＜0.05；B1組與B3組對比，t=7.54，P＜0.05；B2組與B3組對比，t=4.03，P＜0.05；數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。B2組患者放療病情好轉(zhuǎn)時的骨橋蛋白含量為（172.4±38.2）ng/mL，復(fù)發(fā)時骨橋蛋白含量為（246.8±34.5）ng/mL；好轉(zhuǎn)時與治療前骨橋蛋白含量對比t=8.43，P＜0.05；好轉(zhuǎn)時與復(fù)發(fā)時骨橋蛋白含量對比t=6.93，P＜0.05；數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。B3組患者病灶消除時骨橋蛋白含量為（167.6±39.1）ng/mL，遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移時骨橋蛋白含量為（232.5 ±41.2）ng/mL；病灶消除時與治療前骨橋蛋白含量對比t=4.29，P＜0.05，病灶消除時與遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移時骨橋蛋白含量對比t=4.85，P＜0.05；數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討 論

骨橋蛋白是一種非膠原型、富含唾液酸的趨化因子樣磷酸化糖蛋白[1]。有學(xué)者稱之為“腫瘤轉(zhuǎn)移基因”，認(rèn)為骨橋蛋白在癌癥患者的診斷、治療及發(fā)展中具有重要作用，且對癌癥患者放療預(yù)后具有一定提示。放射療法射線作用于腫瘤的強(qiáng)度受病灶區(qū)域富氧量的影響，氧量越高則放射療法的治療效果越顯著。骨橋蛋白是組織內(nèi)提示氧量的一種內(nèi)源性標(biāo)志物，當(dāng)氧含量降低時，骨橋蛋白的含量就會增加，且與組織內(nèi)氧含量顯負(fù)相關(guān)。因此，對子宮頸鱗癌患者進(jìn)行骨橋蛋白檢測，能夠?qū)Ψ派浏煼ǖ闹委熜ЧM(jìn)行有效評估。文中2.1顯示，放射治療效果良好的A組患者，骨橋蛋白陽性率為22.5%，而放射治療后臨床癥狀未得到有效控制的B組患者的骨橋蛋白陽性率為72%，A組患者的骨橋蛋白陽性率明顯低于B組，P＜0.05。證明，治療前對患者的骨橋蛋白進(jìn)行檢測，可以對患者放射治療的預(yù)后效果進(jìn)行有效評估，骨橋蛋白的陽性率越高，子宮頸鱗癌患者的放射治療效果就越差。文中2.2顯示，放射治療后病情持續(xù)加重的B1組患者，骨橋蛋白陽性率為94.74%，局部病灶反復(fù)復(fù)發(fā)的B2組患者陽性率為69.57%、遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的B3組患者陽性率為25%。進(jìn)一步證明了2.1所得出的結(jié)論，患者骨橋蛋白陽性率與放療的治療效果顯負(fù)相關(guān)。文中2.3顯示，B1、B2、B3三個組別治療前的骨橋蛋白含量顯依次減少趨勢，且患者放射治療病情好轉(zhuǎn)后骨橋蛋白含量明顯降低。但在病灶局部復(fù)發(fā)或出現(xiàn)遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移時，骨橋蛋白含量又再次升高。證明，骨橋蛋白不僅可以預(yù)測放射治療的臨床效果，且骨橋蛋白的含量也可作為放療的預(yù)后評估標(biāo)準(zhǔn)，骨橋蛋白含量越低則放射治療的臨床效果越顯著。

檢測骨橋蛋白可預(yù)測放療的治療效果，還可用于病癥診斷或監(jiān)測治療后的復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移。 總之，對子宮頸鱗癌患者進(jìn)行骨橋蛋白檢測，可在治療前對放療效果進(jìn)行預(yù)測，并在治療后對放療效果進(jìn)行評估。

[1] 李博.子宮頸上皮內(nèi)瘤變及鱗癌組織中骨橋蛋白表達(dá)意義的研究[D].錦州:遼寧醫(yī)學(xué)院,2012.

R737.33

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1671-8194（2017）05-0166-02