孫 智

（大連市婦女兒童醫(yī)療中心遺傳基因診斷實(shí)驗(yàn)室，遼寧 大連 116001）

自然流產(chǎn)患者封閉抗體檢測(cè)及相應(yīng)免疫治療的對(duì)策分析

孫 智

（大連市婦女兒童醫(yī)療中心遺傳基因診斷實(shí)驗(yàn)室，遼寧 大連 116001）

目的 分析復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)（RSA）患者采用淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療的臨床效果及治療前后封閉抗體（BA）指標(biāo)的檢測(cè)變化及對(duì)再次妊娠的臨床價(jià)值。方法以 2010 年 8 月至 2014 年 7 月在我院婦產(chǎn)科就診的 520 例復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患者為對(duì)象，采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）對(duì)這些患者的封閉抗體進(jìn)行測(cè)定，從中選取480例封閉抗體陰性患者為研究對(duì)象，實(shí)行淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫療法，經(jīng)過(guò)2 個(gè)療程治療后，再次測(cè)定封閉抗體的變化情況及再次妊娠的情況。結(jié)果520 例復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患者中封閉抗體陽(yáng)性率為 7.69%（40/520×100%）。從中選取的 480 例封閉抗體陰性患者經(jīng)過(guò) 1 個(gè)療程的淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療后復(fù)測(cè)，封閉抗體陽(yáng)性率為 75.00%（360/480×100%），經(jīng)過(guò) 2 個(gè)療程的淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療后再?gòu)?fù)測(cè)，封閉抗體陽(yáng)性率為 90.60%（435/480×100%），與治療前相比，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；經(jīng)免疫治療后，患者再次妊娠成功率為 91.28%（398/436× 100%），其中封閉抗體陽(yáng)性患者再次妊娠成功率為 93.78%（392/418×100%），封閉抗體陰性患者再次妊娠成功率為 33.33%（6/18×100%），二者相比，封閉抗體陽(yáng)性患者再次妊娠成功率明顯高于封閉抗體陰性患者，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論采用淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫對(duì)復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患者進(jìn)行治療，能有效提高封閉抗體陽(yáng)性率及再次妊娠成功率，對(duì)臨床治療復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)及提高再次妊娠率具有重要意義，值得臨床推廣應(yīng)用。

自然流產(chǎn)；封閉抗體檢測(cè)；免疫治療；淋巴細(xì)胞

復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)（recurrent spontaneous abortion，RSA）是婦產(chǎn)科常見(jiàn)病，多發(fā)生于妊娠早期，其中有30%～40%RSA患者因不明原因而流產(chǎn)[1]。在這些不明因素中，以免疫因素為重。近年來(lái)，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的快速進(jìn)步及免疫學(xué)的高度發(fā)展，在20世紀(jì)70年代末人們將白細(xì)胞抗原（HLA）成功分型后，眾多醫(yī)學(xué)家們意識(shí)到：女性妊娠中的種種異?，F(xiàn)象，比如RSA與HLA及其相關(guān)免疫應(yīng)答密切相關(guān)。經(jīng)過(guò)醫(yī)學(xué)家們多年的臨床經(jīng)驗(yàn)，總結(jié)分析：RSA患者的封閉抗體（blocking antibody，BA）陽(yáng)性率非常低，而臨床采用患者配偶或健康第三者的淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫來(lái)醫(yī)治患者，能明顯提升患者的再次妊娠率，增加患者的BA陽(yáng)性率[2]。本文通過(guò)對(duì)BA陰性的RSA患者在采取淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療后的BA進(jìn)行測(cè)定，觀察BA在治療前后的變化情況及患者再次妊娠的情況，現(xiàn)將探究結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：以2010年8月至2014年7月在我院婦產(chǎn)科就診的520例復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患者為對(duì)象，采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）對(duì)這些患者的封閉抗體進(jìn)行測(cè)定，從中選取480例封閉抗體陰性患者為研究對(duì)象，排除生殖器官解剖異常、內(nèi)分泌異常、夫妻雙方胚胎染色體異常、生殖道感染等所致習(xí)慣性流產(chǎn)患者，患者丈夫精液經(jīng)檢查均正常。這些RSA患者年齡24～38歲，平均（30.7±3.5）歲，流產(chǎn)次數(shù)3～7次，平均4.3次；流產(chǎn)天數(shù)46～125 d，平均（70.1±4.8）d。所有患者及其丈夫、健康第三者在進(jìn)行治療前已簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

1.2.1 淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療：對(duì)480例BA陰性患者實(shí)行淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫療法。在選擇淋巴細(xì)胞時(shí)，應(yīng)優(yōu)先選擇患者配偶淋巴細(xì)胞，配偶經(jīng)檢查無(wú)梅毒螺旋體、艾滋病及肝炎病毒才可進(jìn)行下一步。若患者配偶以上任一項(xiàng)無(wú)法達(dá)到，其淋巴細(xì)胞即無(wú)法使用。這時(shí)，應(yīng)選擇健康的第三者的淋巴細(xì)胞進(jìn)行治療。患者可自愿選擇健康第三者，經(jīng)檢查排除肝炎病毒、艾滋病病毒、梅毒螺旋體等，且與患者無(wú)血緣關(guān)系條件下，才可提供血源。

選定好淋巴細(xì)胞提供者后，應(yīng)在無(wú)菌環(huán)境下抽取供血者外周血30 mL，無(wú)菌操作下，取適量肝素抗凝來(lái)分離淋巴細(xì)胞，再將提取出的淋巴細(xì)胞制成懸液，濃度為（40～70）×106/mL；用一次性注射器抽取淋巴細(xì)胞懸液3 mL，對(duì)患者前臂的6～8個(gè)點(diǎn)進(jìn)行皮下注射，30 min后，若注射局部出現(xiàn)水泡、紅腫等不良反應(yīng)，可實(shí)行抗感染、抗過(guò)敏及冷敷等來(lái)進(jìn)行治療。1療程3次，3周注射1次。2個(gè)療程結(jié)束后，再間隔2周復(fù)測(cè)BA。在治療過(guò)程中，應(yīng)注意避孕，一旦復(fù)測(cè)BA呈陽(yáng)性，請(qǐng)盡快在6個(gè)月內(nèi)受孕；一旦BA復(fù)測(cè)仍為陰性，主治醫(yī)師可建議患者讓健康的第三者為自己提供淋巴細(xì)胞，采取2次主動(dòng)免疫治療，療程與上一次相同，同樣也間隔2周復(fù)測(cè)BA。若確診患者已懷孕，需繼續(xù)實(shí)行1療程淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫來(lái)維持治療，方法如上，孕16～20周才可停止。醫(yī)護(hù)人員在為患者進(jìn)行主動(dòng)免疫療法時(shí)，應(yīng)提醒患者注意休息，保持情緒愉悅，且妊娠早期盡量避免性生活，還能及時(shí)觀察妊娠早期反應(yīng)。

1.2.2 BA測(cè)定 480例復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)：患者應(yīng)在實(shí)行主動(dòng)免疫治療前后都測(cè)定BA。方法為：抽取患者2 mL外周血，無(wú)菌操作下，取適量肝素抗凝來(lái)分離淋巴細(xì)胞，采用ELISA法進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定試劑由北京普贊生物技術(shù)有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.3 妊娠成功判斷標(biāo)準(zhǔn)及觀察指標(biāo)：①孕齡5個(gè)月以上，B超檢查胎兒無(wú)任何異?；蚍置湔３苫顙雰簽槿焉锍晒Α＂谟^察患者實(shí)行淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療后的不良反應(yīng)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：所有數(shù)據(jù)均使用SPSS 19.0軟件包處理分析，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x-±s）表示計(jì)量資料數(shù)據(jù)，采用t檢驗(yàn)比較，采用百分率表示計(jì)數(shù)資料，采用χ2檢驗(yàn)組間對(duì)比，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 實(shí)施主動(dòng)免疫前后BA變化情況：520例復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患者實(shí)行主動(dòng)免疫治療前BA呈陽(yáng)性者僅40例，陽(yáng)性率為7.69%（40/520× 100%）；480例BA陰性反復(fù)性自然流產(chǎn)患者在采取主動(dòng)免疫治療1療程后，BA陽(yáng)性率為75.00%（360/480×100%）；余下的120例BA陰性患者繼續(xù)進(jìn)行1個(gè)療程，2個(gè)療程后復(fù)測(cè)，BA陽(yáng)性率為90.60%（435/480×100%），與治療前相比，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 再次妊娠成功率：經(jīng)主動(dòng)免疫治療后，480例BA陰性患者中444例患者再次妊娠，其中宮外孕者3例，孕齡不足5個(gè)月妊娠結(jié)果不清者6例，確認(rèn)再次妊娠者435例，其中，孕齡未達(dá)5個(gè)月流產(chǎn)者37例再次妊娠成功率為91.49%（398/435×100%），均為單胎。其中，BA陽(yáng)性者再次妊娠成功率為93.78%（392/418×100%），BA陰性患者再次妊娠成功率為33.33%（6/18×100%），二者相比，BA陽(yáng)性患者再次妊娠成功率明顯高于BA陰性患者，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3 不良反應(yīng)：480例采取主動(dòng)免疫治療的患者在治療過(guò)程中未出現(xiàn)任何皮疹、過(guò)敏反應(yīng)、乙型肝炎、艾滋病等病癥，胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)均為受限，產(chǎn)后新生兒無(wú)一畸形或出現(xiàn)血小板減少癥。

3 討 論

1976年，BA的缺失首次與妊娠關(guān)聯(lián)到一起。經(jīng)醫(yī)學(xué)家們的多年研究，確認(rèn)正常孕婦血清中存在BA。母體能正常維持妊娠，與母體免疫耐受及其他免疫調(diào)節(jié)作用有直接關(guān)系。免疫調(diào)節(jié)作用之一就是特異性抗體的封閉效應(yīng)，即BA[3-5]。臨床上，醫(yī)學(xué)家們認(rèn)為BA主要因胚胎人類(lèi)白細(xì)胞抗原Ⅱ類(lèi)抗原和滋養(yǎng)葉淋巴細(xì)胞交叉抗原（TLX）而產(chǎn)生。通過(guò)與胎兒胎盤(pán)滋養(yǎng)葉抗原結(jié)合或母體淋巴細(xì)胞結(jié)合，BA可成功阻止胚胎父系抗原遭到母體免疫系統(tǒng)的識(shí)別和損害。本文也通過(guò)數(shù)據(jù)及對(duì)比研究證實(shí)了以上觀點(diǎn)的正確。

因此，對(duì)BA陰性復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患者實(shí)行BA檢測(cè)并采取對(duì)癥治療，能有效阻止流產(chǎn)發(fā)生，提高妊娠成功率，值得臨床推廣應(yīng)用。

[1]劉娟,吳和英,譚宗建,等.反復(fù)自然流產(chǎn)患者封閉抗體檢測(cè)及淋巴細(xì)胞免疫治療的臨床效果[J].醫(yī)學(xué)臨床研究,2012,29(8):1488-1490.

[2]侯哲,孔 欣 ,張娟輝 ,等.反 復(fù)自然流產(chǎn)患者封閉抗體 檢測(cè)與免疫治療分析[J].武警醫(yī)學(xué),2011,22(3):240-241.

[3]方偉禎,蔡振華,謝曉英,等.封閉抗體檢測(cè)與反復(fù)自然流產(chǎn)患者主動(dòng)免疫治療的相關(guān)性分析[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志,2014,26(9):1059-1061.

[4]王娜.反 復(fù)性自然 流 產(chǎn)不孕的封閉抗體 檢驗(yàn)與治療分析[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2015,21(28):39-40.

[5]黃永富,王沖.封閉抗體 檢 測(cè) 在 復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患 者淋巴 細(xì)胞 主動(dòng)免疫治療中的應(yīng)用[J].黑龍江醫(yī)學(xué),2014,38(4):364-368.

R714.21

B

1671-8194（2017）02-0122-02