李麗華（云南省彌渡縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 675600）

布病是由布氏桿菌引起的一種嚴(yán)重危害人民健康和畜牧業(yè)發(fā)展的人、畜共患的傳染病。在家畜中羊最常發(fā)生。以危害生殖系統(tǒng)，使母畜發(fā)生流產(chǎn)、公畜發(fā)生睪丸炎為臨床主要特征。本病易感動(dòng)物的范圍很廣，人有不同的易感性。羊、牛、豬易感性最強(qiáng)，馬、駱駝次之，貓和禽極少發(fā)病。傳染源是病畜及帶菌動(dòng)物（包括野生動(dòng)物）。最危險(xiǎn)的是受感染的妊娠母畜，在流產(chǎn)和分娩時(shí)將大量布氏桿菌隨著胎兒、胎衣和胎水排出。流產(chǎn)后的陰道分泌物以及乳汁中都含有布氏桿菌。布氏桿菌可以通過體表皮膚黏膜、消化道和呼吸道侵入機(jī)體，傳播媒介主要是病畜的流產(chǎn)物、乳、肉、內(nèi)臟和被布氏桿菌污染的皮毛、水、土壤、塵埃等。人感染布病主要是經(jīng)皮膚接觸感染，羊是最危險(xiǎn)的傳染源，其次為牛、豬。近年來，隨著養(yǎng)羊業(yè)的迅猛發(fā)展，引種、流通、交易頻繁，加之監(jiān)督管理與預(yù)防不到位，山羊布病的發(fā)病率和感染率呈逐年上升趨勢，給人民群眾的生命健康安全帶來嚴(yán)重威脅，造成的經(jīng)濟(jì)損失也越來越大。堅(jiān)持搞好監(jiān)測檢疫，及時(shí)檢出病畜，及時(shí)撲殺病畜，消滅傳染源，是控制山羊布病傳播和慢延的重要措施。

1 材料

布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗(yàn)抗原，由中國獸藥品監(jiān)察所生產(chǎn)，規(guī)格：15ml/瓶，保質(zhì)期12個(gè)月，并由大理州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心提供。

血清：采集自全縣八鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）山羊養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的山羊的新鮮血清，且無明顯蛋白凝塊，無溶血和無腐敗氣味。

2 檢疫方法

依照中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18646—2002∶動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)，采用虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)進(jìn)行。

2.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)

（1）首先把潔凈的玻璃板劃分成50個(gè)小方格 (橫10格，縱5格)，然后用吸管將抗原滴加在方格內(nèi)，劑量為0.03ml，接著再加入被檢血清0.03ml，然后用牙簽或火柴棍攪動(dòng)抗原和血清，使之混合均勻。

（2）每次試驗(yàn)應(yīng)設(shè)陰、陽血清對(duì)照。

（3）判定：在陰陽血清對(duì)照成立的條件下，方可對(duì)被檢血清進(jìn)行判定。

（4）受檢血清在5min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象者判為陽性（+），無凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性（-）。

2.2 試管凝集試驗(yàn)

2.2.1 被檢血清的稀釋

在一般情況下，每份血清用5支小試管 (口徑8～10mm)，第一管加入2.3ml石碳酸生理鹽水，第二管不加，第三、四、五管各加0.5ml，用1ml吸管吸取被檢血清0.2ml，加入第一管中混勻?；靹蚝螅迷撐芪〉谝还苤醒寮尤氲诙芎偷谌芨?.5ml，用該吸管將第三管混勻，并吸取0.5ml加入第四管中混勻，再從第四管吸取0.5ml，棄去。如此稀釋后，從第二至第五管血清稀釋度分別為 1∶12.5、 1∶25、 1∶50、1∶100。

2.2.2 加入抗原

先以0.5%石碳酸生理鹽水將抗原作適當(dāng)稀釋（一般作1∶10稀釋）。稀釋后的抗原加入各稀釋的血清管（第一管不加，作血清對(duì)照），每管加0.5ml混勻。加入抗原后，每管總量1ml，血清稀釋度從第二管至第五管分別為 1∶25、 1∶50、 1∶100、 1∶200，從第一管再吸出 0.5ml，剩 1ml。

2.2.3 對(duì)照

陰性血清對(duì)照，血清稀釋后的抗原（與被檢血清對(duì)照相似）。陽性血清對(duì)照，其血清稀釋到原有滴度，再加抗原?？乖瓕?duì)照，適當(dāng)稀釋的抗原加石碳酸鹽水。

2.2.4 判定

判定比濁管制備：每次試驗(yàn)須配制比濁管作為判定的依據(jù)。配制方法是取本次試驗(yàn)用的抗原稀釋5～10ml，加入等量的0.5%碳酸鹽水作倍比稀釋。

全部試驗(yàn)管，對(duì)照管及比濁管充分振蕩后置37℃溫箱中20～22h，取出后放室溫2h，然后以比濁管為標(biāo)準(zhǔn)判定結(jié)果。

記錄結(jié)果：根據(jù)各管中上層液體的清亮度記錄結(jié)果。特別是50%清亮度（++）對(duì)判定結(jié)果較大，一定要與比濁管對(duì)比判定。++++：完全凝集，上層液100%清亮。+++：幾乎完全凝集，上層75%清亮。++：顯著凝集，50%清亮。+：有微量凝集，25%清亮。-：無凝集，液體不清亮。

確定每份血清滴度是以出現(xiàn)++及以上的凝集現(xiàn)象的最高血清稀釋度。在實(shí)際工作中，布病檢疫首先用虎紅平板凝集試驗(yàn)篩選陽性羊，然后再對(duì)初篩出的陽性羊運(yùn)用試管凝集試驗(yàn)進(jìn)行復(fù)查。

3 檢疫結(jié)果

彌渡縣從2012年開展山羊布病監(jiān)測檢疫工作，并以常規(guī)監(jiān)測和重點(diǎn)監(jiān)測兩種方式進(jìn)行。

3.1 常規(guī)監(jiān)測

按不同規(guī)模隨機(jī)采樣。存欄30只以下的養(yǎng)殖場（戶）采集血清樣品5份，存欄30～50只的養(yǎng)殖場（戶）采集血清樣品10份，存欄50～100只的養(yǎng)殖場（戶）采集血清樣品15份，存欄100只以上養(yǎng)殖場 (戶)采集血清樣品20份。

3.2 重點(diǎn)監(jiān)測

一是根據(jù)衛(wèi)生部門反饋的信息，飼養(yǎng)員、放牧人員和有與山羊密切接觸史等高危人群人員被確診為感染布病陽性病人后的人畜同步監(jiān)測；二是在常規(guī)監(jiān)測中，檢疫出陽性病羊后進(jìn)行的監(jiān)測。重點(diǎn)監(jiān)測工作主要采取以疫點(diǎn)村（戶）為單位，整村推進(jìn)，100%檢疫的策略進(jìn)行。

3.3 檢疫結(jié)果

2013～2017年共檢疫山羊1521只，檢出陽性病羊31只，陽性率2.03%。其中重點(diǎn)監(jiān)測檢疫289只，檢出陽性病羊21只，陽性率7.26%。

4 撲殺凈化

根據(jù)《布魯氏菌病診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則》和大理州農(nóng)辦發(fā) 〔2009〕28號(hào)《關(guān)于認(rèn)真組織開展結(jié)核病、布病陽性畜撲殺凈化的緊急通知》要求，本縣堅(jiān)持對(duì)歷年監(jiān)測檢疫出的布病陽性山羊，采取了消毒、撲殺、深埋無害化處理等凈化措施，2003年以來累計(jì)撲殺凈化布病陽性山羊33只，其中同群畜2只。

5 防控建議

5.1 消滅傳染源

疫畜是布病的主要傳染源，我國大部分地區(qū)，羊是主要傳染源。2014年以來，彌渡縣查出的布病病人，根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查，其傳染源基本來自于感染布病的山羊。因此，及時(shí)檢出病羊，及時(shí)撲殺病羊是徹底消滅傳染源，控制山羊布病傳播和慢延的重要措施。

5.2 加強(qiáng)監(jiān)測檢疫力度

從未發(fā)生過布病的羊群，堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，不從疫區(qū)引進(jìn)或購買山羊。引進(jìn)或購買山羊必須隔離觀察，進(jìn)行布病檢疫，確定無感染后方可入舍或混群飼養(yǎng)。

5.3 認(rèn)真消毒

被病畜的流產(chǎn)物污染的場地、用具、廄舍及尚未食用的奶制品、高危易感人群，必須進(jìn)行認(rèn)真消毒處理。

5.4 高危人群防護(hù)

凡與病畜、可疑畜及其流產(chǎn)污物、染菌的畜產(chǎn)品直接接觸的飼養(yǎng)員、放牧者、獸醫(yī)和從事皮毛、肉乳加工人員等高危人群，一定要做好自身防護(hù)工作，一旦出現(xiàn)持續(xù)數(shù)日乃至數(shù)周發(fā)熱（包括低熱）、多汗、肌肉和關(guān)節(jié)疼痛、乏力，兼或肝、脾、淋巴結(jié)和睪丸腫大等可疑癥狀及體征時(shí)，應(yīng)立即到正規(guī)醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行診斷和系統(tǒng)治療。平時(shí)認(rèn)真做好消毒和防護(hù)，一年至少做一次包括布病篩查的健康體檢。