超高效液相色譜三重四極桿質譜聯用法測定水產品中氯霉素類藥物殘留

陳 杰 天津市東麗區(qū)產品質量監(jiān)督檢驗所

氯霉素具有廣譜抗菌能力，被廣泛應用于動物養(yǎng)殖業(yè)中。但氯霉素類藥物用于食用性動物易導致在動物源性食品中殘留量超標，可引起人體再生障礙性貧血和溶血性貧血等，對人體產生嚴重危害，因此引起國內外的廣泛重視。目前，大多數國家已嚴格限制其使用，并對食品中氯霉素類藥物的最高殘留量（MRL）進行了規(guī)定。

本文對國家標準《可食動物肌肉、肝臟和水產品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考殘留量的測定 液相色譜-串聯質譜法》（GB/T 20756-2006）和儀器自帶的方法進行比較分析，以期為提高水產品檢驗質量，保障水產品安全性提供參考。結果表明，兩種方法檢測結果差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），線性相關密切。儀器自帶方法檢測具有易操作，省時省力的優(yōu)點，可在對水產品中氯霉素類藥物殘留檢測中加以推廣應用，樣品加標回收率為81.5%～105.5%。

實驗部分

實驗材料和設備

實驗材料：選取天津市市售水產品進行加標實驗。

實驗儀器：超高效液相色譜儀于三重四極桿質譜儀，具體配置為輸液泵，在線脫氣機，自動進樣器，柱溫箱，系統(tǒng)控制器等。

水產品中氯霉素的液相色譜條件

分析儀器：LC-30A 系統(tǒng)；色譜柱：Shimadzu Shim-pack XR-ODSⅢ 2.0 mmI.D.×50 mmL.，1.6 μm；流動相：A為水，B為乙腈；流速：0.4 mL/ min；進樣體積：10μL；柱溫：40 ℃；洗脫方式：梯度洗脫，B相初始濃度為30%，時間程序見表1。

樣品制備

標準溶液配制：用甲醇配制10 mg/L的氯霉素混合標準中間溶液，用甲醇-水溶液（V/V，50∶50）稀釋成0.2、0.5、1、5、10、50 μg/L和100 μg/L不同濃度的混合標準工作液。

樣品前處理：稱取5.00 g試樣至50 mL離心管中，加入25 mL乙酸乙酯，在均質器中以14 000 r/min均質30 s，以4 000 r/min離心5 min，上層乙酸乙酯提取液收集于50 mL平底燒瓶中，殘渣加入20 mL乙酸乙酯，重復上述操作，合并提取液；45 ℃減壓旋轉濃縮至干，殘留物用1 mL甲醇-水溶液（V/ V，50∶50）溶解，再加3.0 mL正己烷混合，并轉移至10 mL比色管中，渦動混合30 s；以4 000 r/min離心2 min，棄去上層正己烷，移取下層，經0.22 μm微孔濾膜過濾后，用液質分析。

結果分析

線性關系

將濃度為0.2、0.5、1、5、10、50μg/L和100 μg/L氯霉素標準工作液，按1.2中的分析條件進行測定，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，外標法制作校準曲線，如圖1所示，氯霉素線性良好。線性方程、線性范圍和相關系數見表2。國家標準法氯霉素線性如圖2所示。

圖1 儀器自帶方法氯霉素的標準工作曲線

圖2 國家標準法氯霉素的標準工作曲線

基質加標實驗

按1.3中樣品制備方法，樣品中添加混合標樣，加標含量見表2，各平行4次。測試結果顯示，水產品加標回收率在81.5%～105.5%，見表2。

表2 加標樣的回收率結果（n=4）

結論

使用儀器自帶方法和國家標準法對氯霉素藥物殘留進行檢測，兩種方法的線性良好相關系數均大于0.999?；|加標回收率在81.5%～105.5%。根據統(tǒng)計分析表明，二者線性關系極為顯著，并無明顯差異且符合良好。二者在檢測結果上并無實質差異。表現的一致性較好。兩種方法的其他指標對比顯示，前者的易操性、勞動強度、計數準確度及計數時長均優(yōu)于國家標準檢測法，因此值得被廣泛應用于實際檢測中。