■劉 虎 陳思佳 周水岳 湯小朋 楊淑芬 方熱軍

（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院湖南畜禽安全生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心，湖南長(zhǎng)沙 410128）

鋅是生物有機(jī)體重要的微量元素之一，廣泛分布于機(jī)體內(nèi)，具有極其重要的意義。鋅是堿性磷酸酶、碳酸酐酶等的組成成分或者激活劑，參與機(jī)體內(nèi)多種代謝[1]。有機(jī)鋅因其吸收率好、低污染等優(yōu)點(diǎn)，逐漸替代無(wú)機(jī)鋅。張亞男等[2]研究添加硫酸鋅和蛋氨酸鋅飼喂產(chǎn)蛋后期蛋雞，結(jié)果表明，鋅源對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能沒有顯著影響，但能提高雞蛋品質(zhì)、改善機(jī)體抗氧化狀態(tài)。任戰(zhàn)軍等[3]研究添加硫酸鋅和蛋氨酸鋅飼喂幼齡艾哥兔，結(jié)果表明，在飼糧中添加鋅能改變1.5月齡艾哥兔生長(zhǎng)性能，蛋氨酸鋅改善幼兔生長(zhǎng)性能的效果優(yōu)于硫酸鋅。蛋氨酸鋅降低幼兔胴體率的趨勢(shì)比硫酸鋅大。飼糧中鋅的添加水平和添加形式存在交互作用，兩種鋅源在機(jī)體的代謝機(jī)制不同?？梢?，添加不同鋅源及水平在蛋雞飼糧中的生物學(xué)效應(yīng)及其對(duì)雞蛋微量元素水平的影響，有待進(jìn)一步研究。本試驗(yàn)以21周齡羅曼蛋雞為對(duì)象，研究不同鋅源及水平對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、血液生化指標(biāo)以及蛋氨酸鋅的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，為進(jìn)一步研究鋅在蛋中的富集效果提供一定的科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與動(dòng)物

飼料添加劑級(jí)氨基酸絡(luò)合鋅（含鋅＞10%），美國(guó)金寶公司；硫酸鋅（含鋅＞35%），鋅源均為牧達(dá)邦股份有限公司提供。

試驗(yàn)動(dòng)物：21周齡體況良好的羅曼褐蛋雞，試驗(yàn)動(dòng)物由湖南省鵬暉農(nóng)牧有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選用21周齡健康、產(chǎn)蛋率接近的羅曼蛋雞720只，隨機(jī)分為5個(gè)組，即基礎(chǔ)飼糧組（不含額外鋅源）、基礎(chǔ)日糧+35 mg/kg的氨基酸絡(luò)合鋅組、基礎(chǔ)日糧+70 mg/kg的氨基酸絡(luò)合鋅組、基礎(chǔ)日糧+35 mg/kg硫酸鋅組、基礎(chǔ)日糧+70 mg/kg硫酸鋅組，各組飼糧中鋅含量測(cè)定值分別為 20.56、40.11、80.39、36.62、76.10 mg/kg（均以Zn計(jì)）。

1.3 試驗(yàn)飼糧與飼養(yǎng)管理

基礎(chǔ)飼糧參照NRC（1994）配制，組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)雞采用立體三層籠養(yǎng)，每籠4只，每個(gè)重復(fù)6籠，每個(gè)重復(fù)之間空1個(gè)雞籠，自由采食（每天飼喂兩次：上午6:00和下午2:00）和飲水，飼養(yǎng)管理和免疫等均按雞場(chǎng)正常程序進(jìn)行。試驗(yàn)分為預(yù)試期和正試期，預(yù)試期7 d，正試期56 d。

1.4 樣品收集與測(cè)定方法

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.4.1 生產(chǎn)性能

每天收蛋2次（上午9：00和下午3：00），以重復(fù)為單位記錄每天蛋重、產(chǎn)蛋數(shù)和軟殼蛋、破殼蛋以及異形蛋，計(jì)算平均蛋重、產(chǎn)蛋量和產(chǎn)蛋率。每周定時(shí)稱量飼料，以重復(fù)為單位計(jì)算平均采食量和料蛋比。及時(shí)記錄淘汰雞以及病死雞。

1.4.2 蛋品質(zhì)

試驗(yàn)第56 d以重復(fù)為單位收集6枚雞蛋。使用游標(biāo)卡尺測(cè)定雞蛋長(zhǎng)徑、短徑、蛋黃寬度和高度，計(jì)算蛋形指數(shù)、蛋黃指數(shù)，使用Orka Thchnology公司的egg shell thickness、egg analyzer分別測(cè)定蛋殼厚度、蛋黃顏色、蛋白高度和哈氏單位等。

1.4.3 血液生化指標(biāo)

分別于試驗(yàn)第56 d早上，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)挑選2只雞，空腹翅靜脈采血，3 000 r/min離心15 min，移取上清液至eppendorf管中，-20℃貯存。鋅離子、超氧化物歧化酶、銅鋅超氧化物歧化酶分別用絡(luò)合比色法、WST-1法、羥胺法測(cè)定，均采用南京建成生物工程研究所研發(fā)的試劑盒，按照試劑盒說明操作。

1.4.4 飼糧鋅及蛋鋅測(cè)定

試驗(yàn)第14、28、42、56 d以重復(fù)為單位收集2枚雞蛋。用ICP-OES測(cè)定飼糧和蛋黃鋅含量[4]。取配制好的各組顆粒飼糧少許，粉碎備用；用注射器將雞蛋蛋黃取出，加熱干燥制成粉干稱取蛋黃2 g左右（精確至0.000 1 g），入10.0 ml高氯酸與硝酸的混合酸（體積比為1∶9）及幾粒玻璃珠，蓋上塞子，冷消化過夜。次日于電熱板上加熱消化(消化溫度不超過180℃)，并及時(shí)補(bǔ)加混合酸。當(dāng)溶液變?yōu)榍辶翢o(wú)色并伴有白煙出現(xiàn)時(shí)，再繼續(xù)加熱至體積剩余2 ml左右，切不可蒸干。冷卻，倒入50 ml容量瓶中定容，過濾待測(cè)。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2007整理后，用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行GLM模型雙因子方差分析，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”，模型的主效應(yīng)包括鋅源來(lái)源、水平以及兩者之間的互作效應(yīng)，并用Duncan's法進(jìn)行多重比較,差異顯著水平為P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同鋅源及水平對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響(見表2)

表2 不同鋅源及水平對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，鋅源和鋅水平對(duì)蛋雞平均日采食量、料蛋比、產(chǎn)蛋率、損蛋率均沒有顯著影響(P＞0.05)，鋅源之間平均日蛋重差異顯著，氨基酸絡(luò)合鋅能極顯著提高蛋重(P＜0.01)，但鋅水平之間對(duì)蛋重差異不顯著(P＞0.05)；鋅源與鋅水平互作對(duì)平均采食量、平均日蛋重、料蛋比、產(chǎn)蛋率差異不顯著(P＞0.05)；但對(duì)損蛋率差異顯著(P＜0.05)；添加70 mg/kg硫酸鋅較氨基酸絡(luò)合鋅能降低損蛋率。

2.2 不同鋅源及水平對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響(見表3)

表3 不同鋅源及水平對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

表3可見，不同鋅源及水平對(duì)雞蛋蛋形指數(shù)、蛋殼厚度、蛋殼硬度、蛋黃重、蛋黃指數(shù)、蛋白高度以及哈氏單位并沒有顯著影響(P＞0.05),但對(duì)蛋殼重有顯著影響(P＜0.05)，添加氨基酸絡(luò)合鋅較硫酸鋅，能極顯著降低蛋殼重(P＜0.01)；與基礎(chǔ)日糧組組相比，添加氨基酸絡(luò)合鋅能夠降低蛋殼重（P＜0.05），添加70 mg/kg硫酸鋅具有增加蛋殼重的趨勢(shì)，添加低劑量硫酸鋅具有降低蛋殼重的趨勢(shì)，差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 不同鋅源及水平對(duì)蛋雞血液生化指標(biāo)的影響(見表4)

表4 不同鋅源及水平對(duì)蛋雞血液生化指標(biāo)的影響

由表4可見，不同鋅源對(duì)蛋雞血清鋅離子、SOD活性以及CuZn-SOD活性均沒有顯著影響（P＞0.05）；不同水平的鋅對(duì)蛋雞血清鋅離子有極顯著影響（P＜0.01）、對(duì)CuZn-SOD活性有顯著影響(P＜0.05），對(duì)SOD活性并沒有顯著影響（P＞0.05）。

2.4 不同鋅源及水平對(duì)蛋雞蛋黃鋅含量的影響(見表5)

表5 不同鋅源及水平對(duì)蛋黃鋅含量的影響

表5可見，鋅源對(duì)第14、28、42、56 d蛋黃鋅含量的影響差異顯著（P＜0.05），氨基酸絡(luò)合鋅在雞蛋中的沉積比硫酸鋅更好；鋅水平對(duì)第14、28、42 d蛋黃鋅含量的影響差異不顯著（P＞0.05），但對(duì)第56 d蛋黃鋅含量影響差異極顯著（P＜0.01）。鋅源和鋅水平之間對(duì)14、28、42、56 d蛋黃鋅含量的影響差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 不同鋅源及水平對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

鋅是蛋雞正常生命活動(dòng)所必需的一種微量元素，其缺乏或者過量都會(huì)引起機(jī)體代謝紊亂，影響正常的生長(zhǎng)發(fā)育和生產(chǎn)性能，同時(shí)鋅還能影響其他微量元素如銅、鐵的吸收，因此適宜的鋅對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響具有極其重要的作用。許甲平等[5]研究表明，添加40～70 mg/kg蛋氨酸鋅能使產(chǎn)蛋性能得到顯著提高。鮑宏云等[6]研究表明，添加甘氨酸鋅能夠顯著提高斷奶仔豬的平均日采食量、日增重，降低料肉比。張軍霞等[7]研究表明，飼糧中添加鋅對(duì)產(chǎn)蛋率、采食量和料蛋比并沒有顯著影響，但能降低破殼蛋率。王靜等[8]研究表明，在蛋雞飼糧中添加鋅可顯著提高產(chǎn)蛋率，顯著降低料蛋比和破軟蛋率，飼糧添加高水平鋅可提高產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，添加不同鋅源及水平對(duì)蛋雞平均日采食量、料蛋比和產(chǎn)蛋率均沒有顯著影響，添加不同來(lái)源及水平對(duì)蛋雞平均日蛋重有極顯著影響，對(duì)損蛋率差異有顯著影響，添加35 mg/kg氨基酸絡(luò)合鋅能夠極顯著增加蛋重，但添加硫酸鋅能顯著降低破殼率，以70 mg/kg硫酸鋅效果最佳。這與前人的研究結(jié)果存在一定的差異，可能與蛋雞的品種、飼養(yǎng)環(huán)境以及鋅與其他微量元素發(fā)生拮抗等影響有關(guān)。

3.2 不同鋅源及水平對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

鋅是碳酸酐酶的重要組成成分，而蛋殼的主要成分為碳酸鹽，因此高鋅能夠更好地促進(jìn)碳酸酐酶的合成，促進(jìn)碳酸鈣的沉積，從而影響蛋殼。Zamani等[9]研究表明，在基礎(chǔ)飼糧中添加水平為50、100、150 mg/kg鋅可顯著提高蛋殼厚度，且添加水平為150 mg/kg的蛋殼最厚。Mabe等[10]研究表明，飼糧鋅添加水平為30或60 mg/kg可在一定程度上提高蛋雞后期蛋殼強(qiáng)度，但二者差異不顯著，鋅源對(duì)蛋殼強(qiáng)度也無(wú)顯著影響。張亞男等[2]研究添加硫酸鋅和蛋氨酸鋅飼喂產(chǎn)蛋后期的蛋雞，結(jié)果表明蛋品質(zhì)有一定的提高作用。Sahin等[11]添加30 mg/kg硫酸鋅可顯著提高雞蛋哈夫單位。也有研究表明，添加蛋氨酸鋅和硫酸鋅對(duì)哈夫單位并沒有顯著影響[12]。研究表明，飼糧中缺鋅時(shí)，蛋殼強(qiáng)度明顯降低，但隨著鋅添加水平的提高，蛋殼強(qiáng)度并不能持續(xù)增強(qiáng)。本研究認(rèn)為，不同鋅源及水平對(duì)雞蛋蛋形指數(shù)、蛋殼厚度、蛋殼硬度、蛋黃重、蛋黃指數(shù)、蛋白高度以及哈氏單位并沒有顯著影響，添加氨基酸絡(luò)合鋅能夠降低蛋殼重且高水平的效果更好。

3.3 不同鋅源及水平對(duì)蛋雞血液生化指標(biāo)的影響

鋅是體內(nèi)Cu-ZnSOD的重要組成部分，在機(jī)體內(nèi)發(fā)揮著抗氧化的作用。張亞男等[2]研究表明，添加硫酸鋅和蛋氨酸鋅可顯著提高產(chǎn)蛋后期蛋雞的蛋品質(zhì)和機(jī)體的抗氧化性能。成廷水等[12]研究表明，飼糧中氨基酸鋅添加水平為60 mg/kg時(shí)可顯著提高45、60周齡蛋雞肝臟T-SOD活性；機(jī)體內(nèi)鋅離子的水平在一定程度上會(huì)影響其他離子如銅、鐵等的吸收。本試驗(yàn)結(jié)果表明，不同鋅源對(duì)蛋雞血清鋅離子、SOD活性以及CuZn-SOD活性均沒有顯著影響，不同水平的鋅源能極顯著提高蛋雞血清鋅離子水平，顯著提高CuZn-SOD活性，對(duì)SOD活性并沒有顯著影響，但具有提高SOD活性的趨勢(shì)。

3.4 不同鋅源及水平對(duì)蛋黃鋅的影響

雞蛋中的鋅主要是指蛋黃中的鋅，其主要靠吸收飼料中的鋅從而在蛋中沉積。劉慶華等[13]研究表明，隨著飼糧鋅水平的提高，其在蛋中的沉積也增高，但增加趨勢(shì)不大，結(jié)果表明，通過控制飼糧鋅水平調(diào)節(jié)蛋鋅含量并沒有很大的意義。同時(shí)，錢莘莘[14]認(rèn)為，添加鋅可提高蛋中鋅含量，且隨著添加時(shí)間的增長(zhǎng)而提高。張軍霞等[7]研究表明，飼糧中添加鋅60、180 mg/kg能顯著提高蛋中鋅含量。王靜等[8]研究添加酵母鋅在飼喂蛋雞后，結(jié)果表明飼糧中添加鋅可顯著提高雞蛋中鋅含量19.5 μg/g，最高可達(dá)22 μg/g，飼糧中添加鋅一段時(shí)間后，蛋鋅含量保持穩(wěn)定，停喂1周蛋鋅含量不下降。本研究結(jié)果表明，飼糧中隨著添加鋅的時(shí)間延長(zhǎng)，蛋黃中鋅含量增加，不同鋅源之間隨著添加水平的增加而蛋黃中的鋅增加。

4 結(jié)論

①鋅源對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能有一定的影響，氨基酸絡(luò)合鋅能顯著增加平均日蛋重。

②鋅源對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)有一定的影響，添加氨基酸絡(luò)合鋅能夠顯著降低蛋殼重。

③不同鋅水平能顯著提高蛋雞血清鋅離子濃度、CuZn-SOD活性，對(duì)SOD活性并沒有顯著影響，但具有提高SOD活性的趨勢(shì)。

④鋅源及水平能增加蛋雞蛋黃鋅的沉積，隨著時(shí)間的推移，蛋鋅含量增加；隨著水平的增加，蛋鋅含量也增加，且氨基酸絡(luò)合鋅比硫酸鋅沉積好。