本刊記者：陳詞

李用國：正確看待抗乙肝病毒的生物治療

本刊記者：陳詞

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李用國：主任醫(yī)師，教授，研究員，博士生導(dǎo)師。哈醫(yī)大一院感染科主任、教研室主任、黨支部書記；哈醫(yī)大一院國家臨床重點(diǎn)建設(shè)?？聘腥静W(xué)科負(fù)責(zé)人，黑龍江省感染病疑難重癥診治中心主任、黑龍江省感染病質(zhì)量控制中心主任；哈醫(yī)大一院基因中心副主任，哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)術(shù)學(xué)位委員會(huì)委員、哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院學(xué)術(shù)學(xué)位委員會(huì)委員。

中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)委員、中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病分會(huì)自然疫源性疾病學(xué)組副組長、中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病分會(huì)重癥肝炎與人工肝組委員、中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)黑龍江省分會(huì)主任委員、中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)會(huì)黑龍江省分會(huì)侯任主任委員、中國醫(yī)師協(xié)會(huì)感染病分會(huì)常委、黑龍江省醫(yī)師協(xié)會(huì)感染病分會(huì)主任委員、黑龍江省艾滋病協(xié)會(huì)副會(huì)長、黑龍江省防癆協(xié)會(huì)副理事長、衛(wèi)生部應(yīng)急突發(fā)事件國家級(jí)專家，科技部成果鑒定專家、黑龍江省人民政府突發(fā)事件應(yīng)急委員會(huì)專家組成員、北京亞太肝病診療技術(shù)聯(lián)盟黑龍江省第一屆聯(lián)盟理事長、衛(wèi)計(jì)委第一批醫(yī)療管理服務(wù)指導(dǎo)專家?guī)斐蓡T，中國研究型醫(yī)院肝病專委會(huì)常委。

主持國家自然科學(xué)基金、中國博士后特別基金、黑龍江省自然科學(xué)基金等多項(xiàng)課題；參與國家“十一五”、“十二五”重大傳染病專項(xiàng)基金、國家973項(xiàng)目等多項(xiàng)子課題的研究。參編11部人衛(wèi)出版社教材編寫工作，國內(nèi)外發(fā)表論文70余篇。獲得中華醫(yī)學(xué)科技進(jìn)步獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)，教育部科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)，重慶市科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)等多項(xiàng)榮譽(yù)。

生物治療的含義很廣，抗體治療、免疫治療、細(xì)胞因子治療等都屬于生物治療的范疇。當(dāng)前一些藥物、手術(shù)無法解決的問題，有時(shí)可以通過生物治療得到很好地解決。但是，目前肝病領(lǐng)域的生物治療研究還處于早期階段，還有很多問題亟待結(jié)局和改進(jìn)。下面我們來看看哈醫(yī)大一院感染科主任李用國教授是怎么說的：

1、細(xì)胞免疫治療，未來的路還很長

樹突狀細(xì)胞（DC）是目前已知的體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞（APC）。它最大的特點(diǎn)是能顯著刺激初始T細(xì)胞（naive T cells）增殖，為機(jī)體免疫反應(yīng)的始動(dòng)者，并可誘導(dǎo)免疫耐受，因此研究者們利用其能誘導(dǎo)免疫反應(yīng)的特點(diǎn)治療腫瘤和感染性疾?。焕闷湔T導(dǎo)免疫耐受的特點(diǎn)治療過敏性疾病、自身免疫病和器官移植排斥反應(yīng)。在治療感染性疾病的研究方面，最令人關(guān)注的手段是利用DC細(xì)胞的功能，誘導(dǎo)出機(jī)體針對(duì)HBV的免疫反應(yīng)，達(dá)到治療慢性乙型肝炎的目的。我們于2004年在國內(nèi)最早開展該研究，曾用HBsAg疫苗負(fù)載的自體DC治療19例慢性乙型肝炎患者，結(jié)果見57.9%（11/19）的患者發(fā)生了不同程度的應(yīng)答反應(yīng)，其中HBeAg的陰轉(zhuǎn)率為52.6% （10/19），HBeAg血清轉(zhuǎn)換率為26.3%。血清轉(zhuǎn)換率和現(xiàn)在的干擾素是比較接近的，其中2例患者出現(xiàn)了HBsAg血清轉(zhuǎn)換，但在隨后的隨訪過程中有1例又轉(zhuǎn)為大三陽。那么DC疫苗抗乙肝病毒到底有沒有效呢？答案是肯定的，但其機(jī)制及最佳治療方案仍然是一個(gè)謎，如誘導(dǎo)到什么程度、劑量、免疫途徑、療程等等。

之后我去美國學(xué)習(xí)后回到哈爾濱醫(yī)科大學(xué)又繼續(xù)做這個(gè)研究。在之前研究基礎(chǔ)上，輔以佐劑，然而結(jié)果很令人失望，原因不十分清楚，可能與這次試驗(yàn)誘導(dǎo)DC純度過高有關(guān)（以前用貼壁法獲取單核細(xì)胞直接誘導(dǎo)）。本次試驗(yàn)分離出來的單核細(xì)胞特別純，但是當(dāng)我給4個(gè)患者使用了之后，療效較差，甚至連關(guān)節(jié)疼痛、輕微的發(fā)熱的反應(yīng)都沒有。而我們當(dāng)年研究DC疫苗的時(shí)候，是會(huì)有一些反應(yīng)的，特別是效果好的往往會(huì)有低熱、關(guān)節(jié)痛及肌肉酸軟等表現(xiàn)。現(xiàn)在醫(yī)學(xué)技術(shù)提高了，而且還加了佐劑，細(xì)胞培養(yǎng)的也比以前好，可是患者一點(diǎn)反應(yīng)都沒有。這些都在告訴我們，采用DC細(xì)胞疫苗抗乙肝病毒治療，還需要很長的路要走。

其實(shí)，回頭看以前的研究實(shí)驗(yàn)，我們又發(fā)現(xiàn)了其他問題。到底為什么細(xì)胞分離技術(shù)提高了，還加了免疫佐劑，結(jié)果卻無效？而在十幾年前技術(shù)還沒那么成熟的時(shí)候反而有效呢？當(dāng)時(shí)我們靠最簡(jiǎn)單的貼壁方法進(jìn)行誘導(dǎo)，并非現(xiàn)在的細(xì)胞分裂方式。貼壁出來的細(xì)胞是不純的，雖然主要都是單核細(xì)胞，但是也包含了B淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞或其他免疫細(xì)胞。就是這樣一個(gè)以DC細(xì)胞為主的大雜燴細(xì)胞恰好管用，這不是很奇怪嗎？因此我們想到單純的DC疫苗是不是還存在很多問題，這其中就包括了質(zhì)量、數(shù)量問題，或者要不要和其他細(xì)胞共同免疫（因?yàn)槊庖哒{(diào)節(jié)實(shí)質(zhì)上是細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)）？所以，到目前為止，探討了好多年的細(xì)胞免疫治療，還仍然達(dá)不到我們使用干擾素或者核苷（酸）類似物的治療效果。

2、干細(xì)胞移植，還需要繼續(xù)探索

其實(shí)從2005年開始，我們?cè)趪鸬馁Y助下，一直在做造血干細(xì)胞與乙肝慢性化關(guān)系的課題研究，的確發(fā)現(xiàn)了一些問題。第一點(diǎn)，乙肝病毒在骨髓里面是存在的；第二點(diǎn)，干細(xì)胞被乙肝病毒感染了和乙肝的持續(xù)性感染是有關(guān)聯(lián)的。第三，造血干細(xì)胞分化的免疫細(xì)胞，免疫功能是下調(diào)的（文章已發(fā)表）。

該系列研究重要基礎(chǔ)主要基于這一臨床現(xiàn)象：骨髓移植時(shí)HBsAg陽性（甚至是僅為HBcAb陽性）的白血病患者接受HBsAb-/HBcAb-供體的骨髓進(jìn)行移植治療時(shí)，由于免疫抑制劑的應(yīng)用，往往出現(xiàn)HBV的再激活，肝功能惡化，病情加重。而供體是HBV感染自愈者的骨髓，受體卻會(huì)出現(xiàn)HBV被清除，產(chǎn)生乙肝表面抗體，HBsAg清除率最高可達(dá)75%。在應(yīng)用強(qiáng)大的免疫抑制劑的情況下，竟出現(xiàn)如此高的HBsAg清除率，單純用骨髓移植后免疫重建解釋是行不通的，很可能是移植過程中HBV特異性過繼免疫作用來實(shí)現(xiàn)的，即移植后免疫重建和骨髓移植過繼免疫記憶性干細(xì)胞雙重作用的結(jié)果（骨髓干細(xì)胞存在免疫記憶能力，即免疫特異性）。已有研究證實(shí)了記憶性干細(xì)胞樣T細(xì)胞（memory stem cell-like T cell，TSCM）的存在，說明干細(xì)胞存在免疫記憶性。有研究十多年前因嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷疾病接受淋巴細(xì)胞注射患者的外周血淋巴細(xì)胞和造血干細(xì)胞，追蹤了移植細(xì)胞及其子代細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)十多年前的記憶干細(xì)胞，既保持了自我更新能力，療效穩(wěn)定，而且也分化成中央重大研記憶和效應(yīng)記憶細(xì)胞。這些

究的發(fā)現(xiàn)有力地支持了我們前期研究發(fā)現(xiàn)和現(xiàn)今的假設(shè)，即干細(xì)胞免疫活性與HBV感染狀態(tài)及干細(xì)胞過繼免疫的療效有著必然的聯(lián)系。我們?cè)谶@方面的研究還在進(jìn)一步進(jìn)行。

綜上所訴，生物治療抗乙肝病毒，無論是免疫細(xì)胞治療還是干細(xì)胞治療，一方面是不放棄研究，另一方面是絕對(duì)不可以亂用。