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        產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌對(duì)艾維茵肉雞生產(chǎn)性能、免疫器官指數(shù)和腸道菌群的影響

        2016-12-31 00:00:00余祖華丁軻孔志園李旺李元曉劉一塵曹平華
        湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年15期

        摘要:本試驗(yàn)旨在研究產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌對(duì)艾維茵肉雞生產(chǎn)性能、免疫器官指數(shù)和腸道菌群的影響。選取240只1日齡健康艾維茵肉雞,隨機(jī)分4組,每組20只,3個(gè)重復(fù)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧;試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加終濃度為1.0×106、1.0×107和1.0×108 CFU/g的產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌制劑,試驗(yàn)期為42 d。結(jié)果表明,在1~42日齡時(shí),試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組的平均日增重顯著高于對(duì)照組(P<0.05),試驗(yàn)Ⅱ組的料重比顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌對(duì)肉雞的免疫器官指數(shù)無(wú)顯著差異(P>0.05),但試驗(yàn)組與對(duì)照組相比均有提高趨勢(shì),其中試驗(yàn)Ⅱ組免疫器官指數(shù)最高。21日齡時(shí),試驗(yàn)Ⅱ組腸道乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量極顯著地高于對(duì)照組(P<0.01),各試驗(yàn)組的大腸桿菌數(shù)量均極顯著地低于對(duì)照組(P<0.01);42日齡時(shí),各試驗(yàn)組的乳酸桿菌數(shù)量極顯著地高于對(duì)照組(P<0.01),各試驗(yàn)組的雙歧桿菌數(shù)量顯著高于對(duì)照組(P<0.05),各試驗(yàn)組的大腸桿菌數(shù)量極顯著地低于對(duì)照組(P<0.01)。由此可知,飼料中添加一定量的產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌具有提高艾維茵肉雞的生產(chǎn)性能、免疫器官指數(shù)和改善腸道菌群的作用,其中按1×107 CFU/g劑量添加效果最好。

        關(guān)鍵詞:芽孢桿菌;植酸酶;艾維茵肉雞;生產(chǎn)性能;免疫器官指數(shù);腸道菌群

        中圖分類號(hào):S831 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2016)15-3942-03

        DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.15.035

        Abstract: This experiment was conducted to investigate the effects of phytase producing Bacillus on the production performance,immune organ index and intestinal microbiota in avain broiler. A total of 240 one-day old broiler chicken were randomly divided into 4 groups with 20 chicken per group and, 3 replicates. Control group(Group) were fed the basal diet,the test group(GroupⅠ,Ⅱ,Ⅲ) were fed with the basal diet and different dose of Bacillus(1.0×106 CFU/g,1.0×107 CFU/g,1.0×108 CFU/g) respectively. The experiment lasted for 42 days. The results showed as follow: Compared with the control group, the average daily gain in group Ⅰand Ⅱ were significantly increased(P<0.05),and the feed/weight ratio of broilers in group Ⅱ were significantly decreased(P<0.05) during day 1 to 42. There was an increasing trend in the immune organ index between experimental groups and the control group,and the immune organ index in group Ⅱ was highest,but there were no significant differences in all groups(P>0.05). On day 21,compared with the control group,the number of Lactobacillus and Bifidobacterium in the intestinal of group Ⅱwere significantly increased(P<0.01),and the number of E. coli in the intestinal of all test groups were significantly decreased(P<0.01). On day 42,compared with the control group,the number of lactobacillus in the intestinal of all test groups were significantly increased(P<0.01),the number of Bifidobacterium in the intestinal of all test groups were significantly increased(P<0.05),and the number of E. coli in the intestinal of all test groups were significantly decreased(P<0.01). The results suggest that supplementing a certain amount of phytase producing Bacillus to fodder can increase the production performance and immune organ index,improve the intestinal microbiota, and the optimum added dose was 1.0×107 CFU/g.

        Key words: Bacillus; phytase; Avain broiler; production performance; immune organ index; intestinal microbiota

        隨著對(duì)健康意識(shí)的不斷增強(qiáng),人們對(duì)動(dòng)物性食品質(zhì)量愈加關(guān)注??茖W(xué)研究表明人類的一些健康問(wèn)題與肉、蛋、奶中的抗生素、激素和其他合成藥物的殘留有關(guān)[1],所以動(dòng)物性食品中的藥物殘留已成為當(dāng)今最熱門(mén)的話題。近年來(lái),為了尋找抗生素的替代品,國(guó)內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行了大量研究,其中益生菌作為抗生素替代品已被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖業(yè)[2]。芽孢桿菌是最理想的微生物飼料添加劑,它不僅營(yíng)養(yǎng)需求簡(jiǎn)單,易于培養(yǎng),而且抗逆性較強(qiáng),還能分泌動(dòng)物所需的蛋白酶、淀粉酶及植酸酶等。動(dòng)物食用后能夠消耗其腸道內(nèi)的氧氣,抑制需氧致病菌的增殖,可以提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能和免疫功能[3]。植酸酶能夠提高飼料中植酸磷的利用率,解除植酸的抗?fàn)I養(yǎng)作用,提高飼料中礦物元素蛋白質(zhì)和氨基酸的利用率,以提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能。因此,本試驗(yàn)以前期分離的產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌B.Ld2-C為飼料添加劑飼喂肉雞,通過(guò)檢測(cè)生產(chǎn)性能、免疫器官指數(shù)、腸道菌群數(shù)量等指標(biāo),以評(píng)價(jià)該菌株開(kāi)發(fā)為微生態(tài)菌種的可能性,并為其作為飼料添加劑替代抗生素在畜牧業(yè)上應(yīng)用提供理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 菌種 產(chǎn)植酸酶紡錘形賴氨酸芽孢桿菌B.Ld2-C制劑(經(jīng)液體發(fā)酵制備,含活菌數(shù)1×1010 CFU/g),由河南科技大學(xué)宏翔生物飼料實(shí)驗(yàn)室分離保存。

        1.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物分組與管理 選取1日齡健康艾維茵肉雞240只,隨機(jī)分為4組,每組20只,3個(gè)重復(fù)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼料;試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組在基礎(chǔ)飼料中分別添加終濃度為1.0×106、1.0×107、1.0×108 CFU/g的產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌B.Ld2-C制劑。試驗(yàn)期為42 d?;A(chǔ)飼料參照我國(guó)飼料成分及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值表(2014年第25版)肉雞營(yíng)養(yǎng)需求配制。試驗(yàn)期間各組飼養(yǎng)管理?xiàng)l件一致。

        1.2 測(cè)定指標(biāo)

        1.2.1 生產(chǎn)性能 分別在試驗(yàn)雞1、7、14、21、28、35、42日齡時(shí)空腹稱重,記錄各組雞的體重和耗料量,計(jì)算各組平均日增重、平均日采食量和料重比。

        1.2.2 免疫器官指數(shù) 分別在雞只21 d和42 d時(shí),從各組每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取3只雞稱重并剖殺,取脾臟、法氏囊和胸腺,剔除脂肪后稱重,計(jì)算免疫器官的絕對(duì)質(zhì)量并計(jì)算免疫器官指數(shù),計(jì)算公式為:免疫器官指數(shù)(g/kg)=免疫器官重(g)/體重(kg)

        1.2.3 腸道菌群 在上步剖殺雞的同時(shí),取中段回腸約3 cm結(jié)扎后送實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌取樣1 g,加入9 mL生理鹽水,充分混勻,進(jìn)行10梯度稀釋,取合適梯度的稀釋液20 μL分別滴種到乳酸桿菌(MRS培養(yǎng)基)、雙歧桿菌(BBL培養(yǎng)基)、大腸桿菌(伊紅-美蘭培養(yǎng)基)的專性培養(yǎng)基進(jìn)行相應(yīng)的微生物數(shù)量測(cè)定。用1 g腸內(nèi)容物所含細(xì)菌數(shù)量的對(duì)數(shù)[lg(CFU/g)]表示。

        1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

        所有數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用單因素方差分析one-way ANOVA進(jìn)行差異性比較,差異顯著者用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示,P>0.05表示差異不顯著,P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響

        產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響見(jiàn)表1。由表1可知,21日齡內(nèi),與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組的平均日增重均極顯著提高(P<0.01),且極顯著高于Ⅲ組(P<0.01);試驗(yàn)Ⅱ組的料重比顯著低于其余各組(P<0.05),其余各組間的料重比無(wú)明顯差異(P>0.05)。22~42日齡,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組的平均日增重有上升的趨勢(shì),但兩者間無(wú)顯著差異(P>0.05)。在1~42日齡,試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組的平均日增重顯著地高于對(duì)照組(P<0.05),料重比顯著地低于對(duì)照組(P<0.05)。

        2.2 產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌對(duì)肉雞免疫功能的影響

        產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌對(duì)肉雞免疫功能的影響見(jiàn)表2。由表2可知,各組間的胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)和脾臟指數(shù)均無(wú)顯著差異(P>0.05),但試驗(yàn)組與對(duì)照組相比均有提高趨勢(shì),表明添加芽孢桿菌能有效提高肉雞免疫器官指數(shù)??傮w來(lái)講,試驗(yàn)Ⅱ組的免疫器官指數(shù)最高。

        2.3 產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌對(duì)肉雞主要腸道菌群的影響

        從表3中可知,21日齡時(shí),在乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量方面,試驗(yàn)Ⅱ組極顯著地高于對(duì)照組(P<0.01),試驗(yàn)Ⅰ組顯著高于對(duì)照組(P<0.05),試驗(yàn)Ⅲ組也高于對(duì)照組,但差異不顯著(P>0.05);各試驗(yàn)組的大腸桿菌數(shù)量與對(duì)照組相比均極顯著地降低(P<0.01),各試驗(yàn)組之間差異不顯著(P>0.05)。42日齡時(shí),各試驗(yàn)組的乳酸桿菌細(xì)菌數(shù)量極顯著的高于對(duì)照組(P<0.01),而大腸桿菌數(shù)量極顯著的低于對(duì)照組(P<0.01),各試驗(yàn)組的雙歧桿菌數(shù)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

        3 討論

        3.1 產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

        Li等[4]研究發(fā)現(xiàn),飼料里添加B. subtilis CGMCC 1.1086明顯促進(jìn)了AA肉雞的日增重和飼料轉(zhuǎn)化率。譚莉等[5]研究發(fā)現(xiàn)地衣芽孢桿菌制劑和枯草芽孢桿菌制劑能顯著提高1~21日齡肉雞平均日采食量和平均日增重,有增加料重比的趨勢(shì)。由此可見(jiàn),飼料中添加芽孢桿菌對(duì)肉雞的生產(chǎn)性能有一定的促進(jìn)作用。本試驗(yàn)表明,肉雞日糧中添加一定劑量的芽孢桿菌制劑,可顯著提高肉雞的體重并降低料重比。本試驗(yàn)采用在飼料中添加菌粉的方式飼喂肉雞,劑量分別為1.0×106、1.0×107、1.0×108 CFU/g。從整個(gè)喂養(yǎng)過(guò)程來(lái)看,按照1.0×107 CFU/g劑量添加時(shí),不管是在增加肉雞的平均體重還是降低料重比上,效果均優(yōu)于1.0×106、1.0×108 CFU/g劑量添加組,表明菌量加的過(guò)多或過(guò)少都不能明顯增加肉雞的生長(zhǎng)性能,有時(shí)反而會(huì)降低生長(zhǎng)性能。

        3.2 產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌對(duì)免疫功能的影響

        禽類最重要的免疫器官就是胸腺、脾臟和法氏囊,其中胸腺是細(xì)胞免疫的中樞器官,法氏囊是禽類特有的體液免疫器官,脾臟則是禽類最大的外周免疫器官,參與了全身的細(xì)胞免疫和體液免疫。免疫器官指數(shù)是這些免疫器官占活體體重的比例,這個(gè)比例反映了這些器官的相對(duì)發(fā)育程度,也反映了機(jī)體的免疫功能。近年的研究表明,芽孢桿菌能促進(jìn)動(dòng)物免疫器官的發(fā)育,能提高動(dòng)物機(jī)體的T細(xì)胞、B細(xì)胞的數(shù)量,提高動(dòng)物體液和細(xì)胞免疫的水平。林顯華等[6]研究發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌可顯著提高飼喂雛雞的脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)。潘寶海等[7]發(fā)現(xiàn)在肉雞日糧中添加芽孢桿菌能可明顯提高免疫器官指數(shù)和血清中IgG水平。李衛(wèi)芬等[8]研究表明枯草芽孢桿菌可促進(jìn)雛雞盲腸和回腸黏膜中IL-2、IL-4、IL-10和TNF-α的表達(dá)。本試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組添加產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌B.Ld2-C后其免疫器官指數(shù)高于對(duì)照組,按1×107 CFU/g劑量添加時(shí),肉雞免疫器官指數(shù)最高,表明在飼料中添加一定量的芽孢桿菌可提高機(jī)體的免疫水平。

        3.3 產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌對(duì)肉雞腸道菌群的影響

        一般來(lái)說(shuō),健康動(dòng)物腸道中各種細(xì)菌的比例基本是保持不變,動(dòng)物長(zhǎng)期持續(xù)飼喂芽孢桿菌可產(chǎn)生病原菌拮抗物質(zhì),拮抗腸道病原細(xì)菌,起到維護(hù)和調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡的作用。芽孢桿菌為需氧菌,在生長(zhǎng)過(guò)程中需要大量的氧氣,大量吸收了動(dòng)物腸道內(nèi)游離的氧,降低了腸道內(nèi)氧的濃度,有利于乳酸桿菌、雙歧桿菌等厭氧菌的生長(zhǎng),同時(shí)使腸道中需氧菌的生長(zhǎng)受到抑制,從而提高動(dòng)物機(jī)體的抗病能力。葉玉娥等[9]將芽孢桿菌制劑飼喂肉雞后可顯著降低肉雞盲腸道內(nèi)的大腸桿菌數(shù)。楊家軍等[10]研究表明,在痳雞日糧中添加地衣芽孢桿菌能增加腸乳桿菌和雙歧桿菌數(shù)量,減少腸球菌和葡萄球菌的數(shù)量。本試驗(yàn)中添加植酸酶芽孢桿菌B.Ld2-C肉雞的乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量均上升,大腸桿菌數(shù)量下降,其中1.0×106 CFU/g和1.0×107 CFU/g添加量的作用更明顯,表明產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌B.Ld2-C可以優(yōu)化腸道菌群結(jié)構(gòu),促進(jìn)有益菌的增殖。

        4 結(jié)論

        本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼料中添加產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌B.Ld2-C可顯著提高艾維茵肉雞的生產(chǎn)性能,極顯著地改善腸道菌群,且可提高免疫器官指數(shù),按1.0×107 CFU/g劑量添加的效果優(yōu)于其他添加劑量。

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