摘要：對(duì)紅龍魚（Scleropages formosus）鰓部腫瘤進(jìn)行了病理切片研究。結(jié)果表明，該腫瘤是由外界不良因素長(zhǎng)期刺激導(dǎo)致的腺體大量分泌，纖維素、蛋白、炎癥細(xì)胞大量分泌纖維化而成的疏松結(jié)蹄組織囊腫性腫瘤。

關(guān)鍵詞：紅龍魚（Scleropages formosus）；腫瘤；鰓部

中圖分類號(hào)：S943 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2016）12-3147-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.12.035

Abstract： In this study， the pathological section were adopted to analyze the gill tumor of Scleropages formosus. The results showed that the tumor belonged to cystic tumor of loose connective tissue which induced by too much secretion of cellulose， proteins and inflammatory cells from glands and secretion fibrosis. The root reason was long-term stimulation from adverse external factors.

Key words：Red arrowana（Scleropages formosus）； tumor； gill

紅龍魚（Scleropages formosus）屬古代魚類，骨舌魚科，繁殖能力弱，雌魚產(chǎn)卵，雄魚含在口中進(jìn)行孵化和養(yǎng)育，行為非常奇特。因其嘴上的兩條胡須加上閃光發(fā)亮的大鱗片及其遠(yuǎn)古的身世，使人們自然而然地將它與神秘的龍聯(lián)系起來(lái)，稱為“龍魚”。在東南亞、港澳臺(tái)地區(qū)和國(guó)外華人集中的地方，龍魚被視為神魚，被認(rèn)為可以旺家、鎮(zhèn)宅、避邪，作風(fēng)水魚來(lái)養(yǎng)，尤其是紅龍魚，由于瀕臨絕種，在1980年華盛頓野生動(dòng)物保護(hù)條約列為甲級(jí)保護(hù)動(dòng)物而身價(jià)高漲。在港澳臺(tái)，一條紅龍魚的價(jià)格有的超過(guò)百萬(wàn)元，被視作家財(cái)和身份地位的象征。日前，有媒體報(bào)道稱，湖北省武漢市漢口球場(chǎng)路花鳥市場(chǎng)里，一條身長(zhǎng)50 cm，質(zhì)量3～4 kg的紅龍魚，標(biāo)價(jià)268萬(wàn)元。

紅龍魚體格強(qiáng)健，一般不容易生病。常見(jiàn)的疾病主要有翻鰓、水霉、白點(diǎn)、腸炎等[1]。對(duì)于紅龍魚鰓部腫瘤國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)尚未見(jiàn)報(bào)道。本文主要對(duì)其鰓部腫瘤進(jìn)行了病理研究，以期為龍魚鰓部腫瘤疾病的防治提供理論和技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)病魚為新加坡仟湖漁場(chǎng)1齡左右的辣椒紅龍魚，未見(jiàn)明顯癥狀，在喂魚過(guò)程中偶然通過(guò)腮蓋和身體的縫隙看到有一個(gè)腫塊。魚體經(jīng)過(guò)專用麻醉劑麻醉后，快速用手術(shù)剪刀切除（圖1），腫瘤呈灰白色，約3～4 cm。

1.2 方法

1.2.1 修切與洗滌 將腫瘤組織分段切成2～3 cm的橫斷面，用70%乙醇或流水進(jìn)行沖洗。

1.2.2 脫水與透明 將腫瘤組織塊50%乙醇—70%乙醇—85%乙醇—95%乙醇—無(wú)水乙醇梯度脫水，每個(gè)梯度時(shí)間為1 h。脫水后將組織放入二甲苯∶無(wú)水乙醇（1∶1，V/V）和二甲苯中各透明30 min，直到組織透明為止。具體時(shí)間視組織塊的大小確定[2]。

1.2.3 浸蠟與包埋 將蠟熔化，使溫箱溫度保持約55～60 ℃，將已透明的組織放入熔點(diǎn)為54～56 ℃的二甲苯-石蠟混合液蠟杯中約40 min；再浸入第二個(gè)熔點(diǎn)為56～58 ℃的二甲苯-石蠟混合液蠟杯40 min；再浸入第三個(gè)熔點(diǎn)為58～60 ℃的二甲苯-石蠟混合液蠟杯約40 min。然后60 ℃脫蠟包埋。將熔化備用的石蠟注入紙盒內(nèi)，用預(yù)熱的鑷子夾取組織放入盒中的適當(dāng)位置，將切面朝向盒子的底部。以兩手持紙盒兩端輕輕放置冷水中，使紙盒一半浸入冷水中，用口吹氣，使石蠟表面凝成一較厚層后，將紙盒急速全部浸入冷水中，待石蠟完全凝結(jié)變硬即可取出（約浸30 min左右）[3]。

1.2.4 切片 將包埋好的蠟塊修切成方塊形，讓組織四周留有少許石蠟，蠟塊兩邊切成平行的直線[4]。將蠟塊底面熔化，迅速黏于小木塊上，冷卻后裝在切片機(jī)上夾緊。用旋轉(zhuǎn)切片機(jī)連續(xù)切片5張，厚度為5 μm。

1.2.5 貼片 把玻片放在展片臺(tái)上，向玻片上滴幾滴蒸餾水然后加熱到40 ℃左右，將預(yù)先割開的蠟片攤于水面上，用撥針展平，撥正位置，倒去多余水滴，把玻片放入37～48 ℃溫箱中烤24 h左右（粘片劑用一個(gè)雞蛋的蛋清、500 mL蒸餾水和1 mL氨水混勻過(guò)濾而得）[5]。

1.3 染色

采用HE染色[6]。取已干燥的切片放入二甲苯缸中各脫蠟10 min，放入二甲苯與100%乙醇溶液（1∶1，V/V）混合5 min，100%乙醇Ⅰ、Ⅱ各5 min，依次放入95%至70%乙醇溶液各4 min，入蒸餾水沖洗，再放入蘇木精中染色約15 min，用蒸餾水洗去多余染料后，入0.5%鹽酸乙醇溶液分色，以鏡檢為準(zhǔn)，用自來(lái)水藍(lán)化15 min，使之恢復(fù)藍(lán)色。再用蒸餾水過(guò)洗一次。放入70%的伊紅乙醇溶液染30 s。乙醇溶液濃度梯度上行至95%（各1～2 min），入0.5%的伊紅乙醇溶液染30 s至1 min，再依次入95%乙醇溶液和無(wú)水乙醇溶液脫水（各1～3 min），經(jīng)二甲苯∶無(wú)水乙醇（1∶1，V/V）和二甲苯透明，最后取出玻片擦去多余的二甲苯，迅速滴樹膠封固[7]。OLYMPUS顯微鏡觀察。

2 結(jié)果與分析

由圖2可見(jiàn)，囊腫內(nèi)部有疏松結(jié)蹄組織相互交織形成囊泡狀結(jié)構(gòu)；由圖3可見(jiàn)，囊泡邊界清晰，囊壁較厚，分布不規(guī)則，浸潤(rùn)大量的淋巴細(xì)胞；囊泡附近有腺管、無(wú)血管、無(wú)柱狀細(xì)胞、無(wú)有核細(xì)胞。未成熟囊泡呈現(xiàn)透明狀結(jié)構(gòu)，有不斷擴(kuò)張?jiān)龃筇畛浯竽遗葳厔?shì)；囊壁無(wú)鈣化灶。

切片時(shí)，病理組織柔軟，大量白色液體從組織內(nèi)排出，從圖2看囊泡內(nèi)液體排空后成空泡狀，內(nèi)有少量散落淋巴細(xì)胞。

3 小結(jié)與討論

紅龍魚的腫瘤本身就不多見(jiàn)，鰓部的腫瘤就更罕見(jiàn)了，該病例是偶然獲得，實(shí)屬珍貴。對(duì)一些高等動(dòng)物腫瘤性疾病的治療一般采用手術(shù)切除的方法[8]，對(duì)水生動(dòng)物來(lái)講，由于生活在水環(huán)境里面，其疾病很難及時(shí)發(fā)現(xiàn)，更別提腫瘤性的疾病。紅龍魚等具有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的魚類主張采用手術(shù)方法對(duì)其腫瘤進(jìn)行切除。本試驗(yàn)中該紅龍魚手術(shù)切除腫瘤后，恢復(fù)良好。

從病理切片來(lái)看，該魚腫瘤內(nèi)有疏松結(jié)蹄組織相互交織形成囊泡狀結(jié)構(gòu)，而且有大量的淋巴細(xì)胞，可能是紅龍魚魚鰓受寄生蟲、細(xì)菌、藥物或者其水體里不良因素長(zhǎng)期刺激后，魚鰓腺體大量分泌，纖維素、蛋白、炎癥細(xì)胞大量分泌纖維化而成的疏松結(jié)蹄組織囊腫性腫瘤[9]。隨著囊腫不斷增大，從而影響魚在水中二氧化碳和氧氣的交流，使龍魚窒息而亡。

水生生物的健康與水體質(zhì)量的優(yōu)劣息息相關(guān)。紅龍魚的生存需要弱酸性至中性的水質(zhì)，硬度要求軟水。pH 6.5～7.5，DH值3～12，水溫28～30 ℃較適宜，亞硝酸鹽含量以及氯含量最好為零[10]。中國(guó)自來(lái)水大部分都偏硬，達(dá)不到養(yǎng)龍魚的要求，需要進(jìn)行軟水處理，但很多養(yǎng)殖者忽略這些問(wèn)題，由于硬水中的某些鈣鎂離子不能被龍魚的鰓代謝掉，很可能在魚的腮部聚集，形成鰓部疾病的發(fā)生甚至腫瘤的發(fā)生。

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