◎王海燕

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稻谷和糙米中殺草胺的殘留檢測方法分析

◎王海燕

本次討論分析的目的是檢測稻谷和糙米中殺草胺的殘留檢測方法，以判定稻谷和糙米中農(nóng)藥的殘余量，以保證糧食的安全。大體方法是將樣品倒入石油醚后提取出來，再將提取物通過弗羅里硅土玻璃層柱凈化，最后再利用Agglent-1260高效液相色譜與紫外線檢測儀搭配進(jìn)行殺草胺的檢測。利用該方法進(jìn)行試驗(yàn)和測定，結(jié)果是稻谷和糙米中殺草胺添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)極小，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差符合標(biāo)準(zhǔn)，稻谷和糙米回收率也較高。因此此次檢測方法具有靈敏性和準(zhǔn)確性，因此檢測方法符合稻谷和糙米中殺草胺殘留檢測的要求。

殺草胺是一類高效的除草劑，遇酸穩(wěn)定，而遇堿不穩(wěn)定，用于水稻秧田、大豆田、花生田除草，同時(shí)可以消滅一年生單子葉雜草，除草具有顯著的效果。像殺草胺這類的除草劑大多是利用剛萌芽的植物或幼根，之后在其接觸的部位通過抑制植被的自身細(xì)胞分類生長，或者利用合成的獨(dú)特蛋白質(zhì)來毒殺植物。雖然殺草胺這類除草劑的毒性不高，但許多專家發(fā)現(xiàn)和證實(shí)了其有致癌的潛性。即使其急性毒性很低，但目前看來建立稻谷和糙米中殺草胺殘留的檢測方法是至關(guān)重要的。

專家目前主要利用液相色譜［7-8］ 、氣相色譜［3-6］、液相-質(zhì)譜［10］和氣相-質(zhì)譜［9］等這些現(xiàn)有的方法來進(jìn)行殺草胺殘留檢測，但盡管如此，大眾甚少知道殺草胺的檢測方法。為了提供大眾一個(gè)關(guān)于稻谷和糙米中殺草胺殘留量的具體檢測結(jié)果，本人利用高效液相色譜的方法來檢測殺草胺的殘留量，為了建立一整套精確靈敏的檢測系統(tǒng)，本人還加入了固相萃取柱以及2種不同凈化方法，此項(xiàng)實(shí)驗(yàn)操作簡單易懂，具有較大的意義。

實(shí)驗(yàn)所需材料及檢測方法

試驗(yàn)所需材料

殺草胺標(biāo)準(zhǔn)品；分析純石油醚；分析純乙酸乙酯；色譜乙腈。弗羅里硅土層析用；中性氧化鋁層析用；小柱層析用；試劑盒。Agilent 1260液相色譜儀、電子天平、R201旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、SHZ-D型循環(huán)水真空泵、漩渦振蕩器、移液管、氣浴恒溫振蕩器、100 mL具塞量筒梨形抽濾瓶、布氏漏斗、150 mL具塞磨口三角瓶等。

檢測方法

①配制--標(biāo)準(zhǔn)工作液：精準(zhǔn)量取1mL 的143 mg/L的殺草胺作為標(biāo)準(zhǔn)儲備液，然后移入至10mL的容量瓶中，之后再利用色譜乙腈來確定容量，調(diào)配成14.3 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作液，然后使用分步稀釋法得到一系列不同質(zhì)量濃度的殺草胺標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，共7組，分別為0.143、0.286、0.715、1.43、2.86、 7.15、14.3 mg/L。

標(biāo)準(zhǔn)儲備液：精準(zhǔn)量取0.0073g的97.7%殺草胺標(biāo)準(zhǔn)品，置于50mL的棕色容量瓶中，用丙酮溶解并定容至刻度，配制成143 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，4℃保存。

②提取和凈化。提取：精準(zhǔn)稱取20.00g糙米和稻谷，之后將其放置到150mL具塞三角瓶中，再添加硅藻土和石油醚，分別為2 g和60mL，利用機(jī)械振蕩30分鐘，振蕩后將瓶中實(shí)驗(yàn)品經(jīng)過布氏漏斗進(jìn)行抽濾，然后再將所得濾液移入100mL具塞量筒，添加20mL飽和氯化鈉溶液，并劇烈搖動30秒，最后使溶液靜置一段時(shí)間后分層，然后再再凈化。

凈化：依次將少量脫脂棉，2cm無水硫酸鈉，4g弗羅里硅土，2cm無水硫酸鈉裝填入玻璃層析柱。再加入10mL石油醚使其活化。讓其吸入15mL石油醚后提取出溶液上的樣品將其出去，加入10mL體積比9∶1石油醚-乙酸乙酯混合溶液進(jìn)行樣品淋洗，除去淋洗后所得溶液，再用20mL體積比9∶1石油醚-乙酸乙酯混合溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液；將洗脫后所得溶液加入1，2-丙二醇2滴，再35℃溫度下將其旋轉(zhuǎn)濃縮近干，再用氮?dú)鈱⑵渫耆蹈桑蒙V乙腈測定容量，最后用0.22μm膜濾過，之后提供給液相色譜測定。

測定和計(jì)算計(jì)算

測定注入農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰面積、注入樣本溶液的峰面積，測定樣品重量、提取液、凈化液比例與樣本溶液最終定容體積。利用計(jì)算公式計(jì)算樣品中殺草胺的殘留量、回收率和標(biāo)準(zhǔn)偏差平均值

結(jié)果

分析實(shí)際樣品和殺草胺標(biāo)樣在不同波長下的色譜圖，可以發(fā)現(xiàn)標(biāo)樣在210nm樣品的下反應(yīng)最明顯。并且，還可以發(fā)現(xiàn)隨著波長的的降低，其反應(yīng)值也隨之降低，因?yàn)槠湓?10nm時(shí)，樣品中雜質(zhì)的反應(yīng)也比較明顯，因此可以利用220nm樣品來檢測殺草胺，以觀察和分析其波長。觀察流速不同的色譜圖，可以發(fā)現(xiàn)色譜中流動相流速較快或者乙腈比例較高時(shí)峰值出現(xiàn)時(shí)間較快，最后可以認(rèn)定一種能夠很好地分離雜質(zhì)與殺草胺的條件，那邊是在0.6mL/min的流速和體積比70∶30的比例條件下，這種條件準(zhǔn)確、高效且靈敏。

結(jié)論

固相萃取柱中含有石墨化炭黑這類的填充物，而這類填充物能有效的吸附一些色素的吸附，但是石漠化炭黑吸附一些稻谷和糙米中的有機(jī)酸、蛋白質(zhì)和脂肪的效果卻并不是十分理想。顆粒較細(xì)的中性氧化鋁，因其密度較高，所以其對殺草胺吸附能力也比較樂觀，但其不足的是這種方法需要更多洗脫液才能將殺草胺完全洗脫，同時(shí)更多雜質(zhì)也會隨之洗脫下來。弗羅里硅土玻璃層析柱不僅能高準(zhǔn)確地分離殺草胺和雜質(zhì)，而且此種玻璃層析柱對凈化糙米和稻谷也有較好的效果。為了糧食的安全穩(wěn)定，并且快速精準(zhǔn)便捷地測定出糧食作物中農(nóng)藥的殘留量，QuEChERS這種方法常被用于農(nóng)藥殘余的檢測。這種方法的原理是采用吸附物質(zhì)與絕大部分雜質(zhì)相結(jié)合，然后再用離心的技術(shù)將其除去，但是這種方法也只能夠除去大部分的雜質(zhì)，不能囊括全部，實(shí)驗(yàn)后仍有部分雜質(zhì)剩余且會影響樣品中殺草胺殘留的檢測結(jié)果，這也說明：如若在溶液條件下檢測樣品時(shí)，相萃取的方式更利于將頑固的雜志清除掉。

此次試驗(yàn)的檢測方法較為有效，不僅可以使樣品的前期操作準(zhǔn)備的方便、簡單、精確，同時(shí)可以有效地出去雜質(zhì)，減小雜質(zhì)的影響，高效液相色譜的方法來分析結(jié)果，其靈敏簡單精確的優(yōu)點(diǎn)也十分適合稻谷和糙米中殺草胺的檢測。

如今，隨著農(nóng)業(yè)科技的發(fā)展，許多新型農(nóng)藥逐漸出現(xiàn)，因此越來越多的農(nóng)藥需要專家檢測。盡管一些農(nóng)藥因?yàn)闅埩舳雀呋蚨拘詮?qiáng)而被禁止在食品種植中使用， 但實(shí)際中，許多禁止使用的農(nóng)藥也在市場傳播售賣，為了保證和食品的安全和人類的健康，制作高效精準(zhǔn)的農(nóng)藥殘留檢測方法刻不容緩。大多的農(nóng)藥殘留檢測方法都可使用于多種農(nóng)藥檢測，以上種種都要求農(nóng)藥殘留檢測方法必須適用于大多數(shù)種類樣品，因此， 多農(nóng)藥殘留檢測是今后許多家探討和實(shí)驗(yàn)的部分。

（山東濟(jì)寧魚臺縣檢驗(yàn)檢測中心）