陳 軻 劉零怡 徐 翔 胡傳榮 何東平

基于離子遷移譜法對橄欖油與油茶籽油區(qū)分鑒別的研究

陳 軻1劉零怡1徐 翔2胡傳榮1何東平1

（武漢輕工大學(xué)1，武漢 430023）
（武漢矽感科技有限公司2，武漢 430040）

采用盒進樣-離子遷移譜法快速測定橄欖油與油茶籽油中的揮發(fā)性物質(zhì)，從而得到揮發(fā)性風(fēng)味成分的譜圖。對比譜圖，橄欖油與油茶籽油區(qū)別明顯。進一步對橄欖油與油茶籽油的離子遷移譜圖數(shù)據(jù)求一階及二階導(dǎo)數(shù)，提取各自特征點，可以對2類植物油的譜圖數(shù)據(jù)進行很好的區(qū)分，但油橄欖油IMS數(shù)據(jù)仍與油茶籽油IMS數(shù)據(jù)存在部分重疊。最后利用隨機森林法對原有數(shù)據(jù)進行訓(xùn)練，通過對盲樣進行識別，橄欖油與油茶籽油的識別正確率達100%。

離子遷移譜 檢測辨別 隨機森林 橄欖油 油茶籽油

離子遷移譜（Ion Mobility Spectrometry，IMS）是一種氣相分析技術(shù)［1］，作為一種新的分析方法，IMS技術(shù)廣泛應(yīng)用于環(huán)境保護［2-3］、藥品［4］、醫(yī)學(xué)［5］、食品［6-7］、安防檢測［8-9］等領(lǐng)域。IMS 技術(shù)的原理是在大氣壓條件下利用電離手段使得氣體化的待檢測物質(zhì)電離，并在電場與反向遷移氣體的共同作用下遷移，從而產(chǎn)生不同種類離子的分離而形成的離子時間分辨譜。通俗地講，就是通過采集氣態(tài)物質(zhì)在電場中的遷移速度差異信息，對物質(zhì)進行區(qū)分的一種方法，其基本原理如圖1所示。

圖1 IMS原理示意圖

橄欖相對油茶籽的資源較少，營養(yǎng)價值相對高，2類植物油的區(qū)分多是建立在消費者對其顏色和風(fēng)味認知及消費者對品牌的信任之上。由于橄欖油價格要比油茶籽油高昂，加上現(xiàn)有檢測手段的局限性，導(dǎo)致個別商家出于經(jīng)濟利益使用油茶籽油假冒橄欖油進行銷售。因此，尋求一套快速區(qū)分橄欖油和油茶籽油的檢測儀器以及行之有效的鑒別方法，對加快橄欖油與油菜籽油國家標(biāo)準(zhǔn)修改，保障消費者權(quán)益具有重要意義。

橄欖油和油茶籽油均是通過不經(jīng)過任何加熱和化學(xué)處理的冷榨法工藝制成，所以2類油中都保留了豐富的單不飽和脂肪酸及其他天然營養(yǎng)成分。如表1所示，橄欖油與油茶籽油無論是在理化特性還是在脂肪酸組成方面均較為接近［10］。

表1 油茶籽油與橄欖油的理化特性及主要脂肪酸組成

由表1可知，橄欖油與油茶籽油在理化指標(biāo)及脂肪酸組成指標(biāo)上都存在交叉的情況，單純通過1項指標(biāo)無法對2類油脂進行有效區(qū)分。目前橄欖油和油茶籽油的區(qū)分主要集中在氣相色譜／質(zhì)譜法［11］、近紅外光譜法［12］等方法，但這些檢測方法所應(yīng)用的儀器昂貴，推廣難度大，應(yīng)用受到限制。離子遷移譜法具快速、靈敏、便捷和成本低等特點，本研究通過分析橄欖油及油茶籽油離子遷移譜圖的差異性，對2類油進行快速區(qū)分鑒別。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 原料與試劑

由表2可知，試驗收集橄欖油樣品64種，油茶籽油樣品79種。

正己烷（HPLC）、甲醇（HPLC）、2，4，6- 三甲基吡啶標(biāo)準(zhǔn)品（B1）、四庚基溴化銨標(biāo)準(zhǔn)品（B2）：上海安譜試劑有限公司。

表2 收集油脂樣本表

1.1.2 儀器與用品

IMS-100離子遷移譜儀：武漢矽感科技有限公司；SK3200H臺式超聲波清洗機：上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司；5μL微量進樣針：上海安亭微量進樣器廠。

1.2 試驗方法

1.2.1 待測油脂樣本預(yù)處理

待測油脂樣本用正己烷（HPLC）為稀釋溶劑稀釋50倍，吸取油脂樣本20μL到980μL正己烷（HPLC）溶液中，旋渦振蕩3 min，再超聲振蕩10 min，備用。

1.2.2 油脂的IMS 測試條件

通過標(biāo)準(zhǔn)操作程序?qū)嶒灒⊿OP）得到油脂檢測的最佳參數(shù)，通過測試軟件進行調(diào)整，其參數(shù)為測試溫度：170℃，測試時長：20 s，遷移管溫度：60℃。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理方法

采集得到的數(shù)據(jù)經(jīng)譜圖累加觀察不同油脂在以1／K0（K0為遷移率）為橫坐標(biāo)時的譜圖特征；同時對譜圖數(shù)據(jù)求一階導(dǎo)數(shù)和二階導(dǎo)數(shù)，觀察不同油脂的IMS譜圖差異；采用隨機森林對橄欖油和油茶籽油的IMS譜圖數(shù)據(jù)進行預(yù)測，觀察預(yù)測準(zhǔn)確率。

2 結(jié)果與分析

2.1 純油茶籽油與摻偽油茶籽油IMS譜圖對比分析結(jié)果

采用油脂樣本IMS譜圖采集標(biāo)準(zhǔn)操作流程，對所制備的橄欖油和油茶籽油樣品進行IMS譜圖數(shù)據(jù)采集，利用回放軟件將所采集的油脂按需要疊加分析。每個油樣使用編號為A00A274204和A00A28D302兩臺離子遷移譜設(shè)備做平行試驗。對疊加的IMS譜圖進行分析（圖2、圖3）。通過肉眼觀察2類油在IMS中產(chǎn)生響應(yīng)峰的位置，觀察IMS譜圖基本特征。

圖2 橄欖油IMS測試二維譜圖

圖3 油茶籽油IMS測試二維譜圖

對比圖2和圖3可以看出，油茶籽油與橄欖油的IMS譜圖差異明顯，說明IMS能夠?qū)@2種油脂進行區(qū)分鑒別。

2.2 一階導(dǎo)數(shù)識別模型建立

進一步對IMS譜圖進行分析。從原始譜圖上看，2類植物油整體差異十分明顯，但是由于地域及工藝的差別，各自類別中的具體植物油樣本差異還是很大的，為減少這種差異性的干擾，隨機選取橄欖油與油茶籽油各50組原始數(shù)據(jù)，對原始數(shù)據(jù)求導(dǎo)以約化遷移率的倒數(shù)1／K0為自變量（x軸），原始譜圖求一階導(dǎo)數(shù)為因變量（y軸），圖4是橄欖油IMS一階導(dǎo)數(shù)譜圖，圖5是油茶籽油IMS一階導(dǎo)數(shù)譜圖。

一階導(dǎo)數(shù)即是對原函數(shù)求導(dǎo)數(shù)，得到計算原函數(shù)上每一點的斜率的新函數(shù)，從而將單類植物油的譜圖差異變小，多類植物油的譜圖差異變大。從一階導(dǎo)數(shù)譜圖上看，處理后的譜圖仍然能保持2類植物油的整體差異，而各自類別中具體植物油樣本差異雖然存在，但已經(jīng)降低了許多。將橄欖油與油茶籽油的原始譜圖經(jīng)過Savitzky-Golay一階導(dǎo)數(shù)分析得到的數(shù)據(jù)進行疊加處理，其結(jié)果如圖6所示。

由圖6可知，在約化遷移率倒數(shù)1／K0為0.88～0.97的區(qū)域兩者區(qū)別明顯，因此選定0.88～0.97區(qū)間進行識別，區(qū)域識別結(jié)果如圖7所示。

由圖7可知，通過對油脂IMS數(shù)據(jù)求一階導(dǎo)數(shù)，在約化遷移率倒數(shù)1／K0為0.88～0.97的區(qū)域，橄欖油IMS譜圖的面積明顯大于油茶籽油IMS譜圖的面積，由此可以將絕大部分油茶籽油IMS數(shù)據(jù)從油茶籽油IMS數(shù)據(jù)中分離。

圖4 橄欖油求一階導(dǎo)數(shù)譜圖

圖5 油茶籽油求一階導(dǎo)數(shù)譜圖

圖6 一階導(dǎo)數(shù)譜圖對比

圖7 一階導(dǎo)數(shù)下油茶籽油與橄欖局部區(qū)域IMS峰面積對比

2.3 二階導(dǎo)數(shù)識別模型建立

為進一步減少內(nèi)部差異性的干擾，對譜圖數(shù)據(jù)進行二次求導(dǎo)得到二階導(dǎo)數(shù)。二階導(dǎo)函數(shù)的意義在于判斷原函數(shù)上每一點的凹凸性以及判斷極值的特性，從而與一階導(dǎo)數(shù)結(jié)合起來反應(yīng)2類植物油譜圖的差異性。圖8是橄欖油IMS二階導(dǎo)數(shù)譜圖，圖9是油茶籽油IMS二階導(dǎo)數(shù)譜圖。

圖8 橄欖油求二階導(dǎo)數(shù)譜圖

圖9 油茶籽油求二階導(dǎo)數(shù)譜圖

從二階導(dǎo)數(shù)譜圖上看，求二階導(dǎo)之后譜圖仍然能保持2類植物油的整體差異，而且這種差異與一階導(dǎo)數(shù)譜互為補充。將橄欖油與油茶籽油的IMS原始譜圖經(jīng)過Savitzky-Golay二階導(dǎo)數(shù)分析得到的數(shù)據(jù)進行疊加處理，其結(jié)果如圖10所示。

由圖10可知，在約化遷移率倒數(shù)1／K0為0.58～0.60的區(qū)域兩者區(qū)別明顯，因此選定0.58～0.60區(qū)間進行識別。區(qū)域識別結(jié)果如圖11所示。

由圖11可知，對2類油脂IMS數(shù)據(jù)求二階導(dǎo)數(shù)，仍然可以將大部分橄欖油IMS數(shù)據(jù)從油茶籽油IMS數(shù)據(jù)中分離，但圖中橄欖油IMS數(shù)據(jù)與油茶籽油IMS數(shù)據(jù)還是存在重疊，若使用該方法會產(chǎn)生較多誤判。隨著模型中油脂數(shù)量的增多，油脂選取特征區(qū)域?qū)嬖诮徊?，這會導(dǎo)致類別中的個別油樣被誤判，因此考慮進一步改進識別模型。

圖10 二階導(dǎo)數(shù)譜圖對比

圖11 二階導(dǎo)數(shù)下油茶籽油與橄欖油局部區(qū)域IMS峰面積對比

2.4 隨機森林識別結(jié)果

將2臺機上所有橄欖油的IMS數(shù)據(jù)提取出來放入one文件夾，所有油茶籽油的數(shù)據(jù)放入other文件夾。然后提取one和other文件夾里的所有數(shù)據(jù)放到隨機森林界面的train文件夾進行訓(xùn)練。其識別構(gòu)建過程如圖12所示。

圖12 隨機森林識別構(gòu)建圖

通過模型對盲樣進行測試，以武漢輕工大學(xué)提供的植物油盲樣為例得到表3。橄欖油與油茶籽油的區(qū)分識別正確率均為100%。

表3 油脂樣本預(yù)測的準(zhǔn)確率

3 結(jié)論

利用離子遷移譜儀（IMS），結(jié)合一階及二階導(dǎo)數(shù)識別模型及隨機森林識別模型，對橄欖油和油茶籽油進行了區(qū)分，準(zhǔn)確率為100%，符合油脂成分真實性的檢測要求。本方法簡單快速，1個樣品的檢測總耗時不超過20 s，樣品量需求非常少，除正己烷外無需其他有機試劑。隨機森林模型含橄欖油樣品64種，油茶籽油樣品79種，建庫模型有效。油脂是人體每天必須補充的營養(yǎng)物質(zhì)，但是不同類別植物油的營養(yǎng)價值不同。在植物油市場經(jīng)營過程中出現(xiàn)的將油茶籽油充當(dāng)橄欖油銷售的情況，會擾亂行業(yè)秩序，損害消費者利益。離子遷移譜技術(shù)的應(yīng)用，提供了一種區(qū)別橄欖油與油茶籽油的新思路新，相比其他檢測手段加有利于環(huán)保，IMS檢測分析成本低，是一種高效、廉價、準(zhǔn)確的快檢方法。

［1］張東風(fēng)，張得儀，梅濤，等.離子遷移譜微型化的現(xiàn)狀與進展［J］.儀器儀表學(xué)報，2006，2：199-204

Zhang Dongfeng，Zhang Deyi，Mei Tao，et al.Current status and progress of ion mobility spectrometry［J］.Chinese Journal of Instrumentation，2006，2：199-204

［2］王建鳳，張仲夏，杜振霞，等.離子遷移譜法檢測圣女果中的敵敵畏和馬拉硫磷［J］.分析實驗室，2011，30（4）：30-33

Wang Jianfeng ，Zhang Zhongxia，Du Zhexia，et al.Etection of dichlorvos and malathion in cherry tomatoes by ion mobility spectrometry［J］.Analysis Laboratory，2011，30 （4）：30-33

［3］Nousiainen M，Holopainen S，Puton J，et al.Fast detection of methyl tert-butyl ether from water using solid phase microextraction and ion mobility spectrometry［J］.Talanta，2011，84（3）：738-744

［4］Vautz W，Baumbach JI.Exemplar application of multicapillary column ion mobility spectrometry for biological and medical purpose［J］.International Journal for Ion Mobility Spectrometry，2008，11：135-141

［5］Niculescu M，Nistor C，F(xiàn)rebort I，et al.Redox hydrogelbased amperometric bienzyme electrodes for fish freshness monitoring［J］.Analytical Chemistry，2000，72（7）：1591-1597

［6］劉春紅，馮志彪，徐英超.離子遷移譜機器在食品分析中的應(yīng)用［J］.食品研究與開發(fā)，2008，29（9）：154-157

Liu Chunhong，F(xiàn)eng Zhibiao，Xu Yingcao.Ion moblity spectrometry and its applications in food analysis［J］.Food Research and Development，2008，29（9）：154-157

［7］Jafari M T，Khayamian T，Shaer V，et al.Determination of veterinary drug residues in chicken meat using corona discharge ion mobility spectrometry［J］.Analytica Chimica Acta，2007，581（1）：147-153

［8］袁曦，鄭建，施亮，等.用于現(xiàn)場痕跡檢測的IMS爆炸物探測儀研究［J］.核技術(shù)，2006（7）：544-547

Yuan Xi，Zheng Jian ，Shi Liang，et al，Detection of trace detector in field testing by IMS［J］.Nuclear Technology，2006（7）：544-547

［9］Najarro M，Morris M E D，Staymates M E，et al.Optimized thermal desorption for improved sensitivity in trace explosives detection by ion mobility spectrometry［J］.Analyst，2012，137（11）：2614-2622

［10］胡健華，韋一良，何東平，等.油脂加工脫殼冷榨生產(chǎn)純天然油茶籽油［J］.中國油脂，2009（4）：16-18

Hu Jianhua，Wei Yiliang，He Dongping，et al，Production of pure natural camellia oil by processing of shelling cold pressing［J］.China Oil and Fats，2009（4）：16-18

［11］張青齡.橄欖油中角鯊烯含量的氣相色譜／質(zhì)譜法分析［J］.福建分析測試，2011，20（3）：1-4

Zhang Qingling.Determination of squalene in olive oil by GC／MS［J］.Fujian Analysis ＆ Testing，2011，20（3）：1-4

［12］王傳現(xiàn)，褚慶華，倪昕路，等.近紅外光譜法用于橄欖油的快速無損鑒別［J］.食品科學(xué)，2010，31（24）：402-404

Wang Chuanxian，Chu Qinghua，Ni Xinlu，et al.Nondestructive identification of olive oil by near infrared spectroscopy［J］.Food Science，2010，31（24）：402-404.

Application of Ion Mobility Spectrometry in Detection Olive Oil and Camellia Oil

Chen Ke1Liu Lingyi1Xu Xiang2Hu Chuangrong1He Dongping1
（Wuhan Polytechnic University1，Wuhan 430023）
（Wuhan Syscan Tech.Co.Ltd2，Wuhan 430040）

Volatile flavor components in olive oil and camellia oil was detected and identified by using boxes sampling-rapid IMS，in order to build up the fingerprint of olive oil and camellia oil.Obvious differences between olive oil samples and camellia oil samples could be observed.Taking the first-order and the second-order derivative of the data and extracting the feature points，most of camellia oil could be apart from olive oil，but the data of camellia oil was overlapped with that of olive oil.After training and identifying with test data through random forests method，the correct rate of unknown olive oil and camellia oil identification could be reached 100%.

ion mobility spectrometry，detection and identification，random forests method，olive oil，camellia oil

TQ646.1

A

1003-0174（2016）11-0130-05

“十二五”國家科技支撐計劃（2011BAD02B00），國家糧食局糧食公益性行業(yè)科研專項（201313012-03）

2015-03-12

陳軻，男，1989年出生，碩士，糧食、油脂與植物蛋白工程

何東平，男，1957年出生，教授，糧食、油脂及植物蛋白工程