盧利萍，桑德春，白帆，陳慧，楊帆，褚宏宇，張曉鈺，李欣，劉建華

腦梗死患者康復(fù)治療前后血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平的比較①

盧利萍，桑德春，白帆，陳慧，楊帆，褚宏宇，張曉鈺，李欣，劉建華

目的觀察腦梗死患者康復(fù)治療前后血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)水平的變化。方法選取2014年6月～2016年8月本院48例首次腦梗死患者(病例組)，在康復(fù)治療前和康復(fù)治療6周后采用酶聯(lián)免疫(ELISA)法測(cè)定血清VEGF水平，并與33例正常體檢者(對(duì)照組)的血清VEGF水平進(jìn)行比較。結(jié)果康復(fù)治療前及康復(fù)治療6周后，病例組VEGF水平均高于對(duì)照組(t＞2.540,P＜0.05)，而且大面積腦梗死(最大梗死直徑＞4 cm)組的VEGF水平高于小面積腦梗死(最大梗死直徑≤4 cm)組(t=4.436,P＜0.05)，短病程(≤1個(gè)月)腦梗死組的VEGF水平高于長(zhǎng)病程(＞1個(gè)月)組(t=2.316,P＜0.05)。結(jié)論康復(fù)治療前后，VEGF均維持較高水平。

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；腦梗死；康復(fù)治療；血管再生

[本文著錄格式]盧利萍，桑德春，白帆，等.腦梗死患者康復(fù)治療前后血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平的比較[J].中國(guó)康復(fù)理論與實(shí)踐,2016,22(12):1434-1437.

CITED AS:Lu LP.Sang DC,Bai F,etal.Levelof serum vascular endothelialgrow th factor in patientswith cerebral infarction before and after rehabilitation[J].Zhongguo Kangfu Lilun Yu Shijian,2016,22(12):1434-1437.

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelialgrow th factor,VEGF)是一種強(qiáng)的血管生成肽，也是目前發(fā)現(xiàn)最強(qiáng)的增加血管通透性的物質(zhì)之一。在神經(jīng)組織中，VEGF可表達(dá)于神經(jīng)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞，不但能促進(jìn)新生血管形成，還具有直接的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和神經(jīng)保護(hù)作用，促進(jìn)神經(jīng)再生[1-7]。

本研究通過(guò)觀察腦梗死患者康復(fù)治療前后VEGF水平的變化，探討其對(duì)腦梗死患者康復(fù)效果的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年6月～2016年8月北京博愛(ài)醫(yī)院48例首次腦梗死患者作為病例組，診斷符合全國(guó)第四次腦血管病會(huì)議診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①首次發(fā)?。虎诮?jīng)頭顱CT或MRI檢查確診；③年齡33～79歲；④生命體征穩(wěn)定。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴意識(shí)障礙；②并發(fā)嚴(yán)重并發(fā)癥(如心、肺、肝、腎功能衰竭)；③其他系統(tǒng)的血管性疾病。

終止和退出標(biāo)準(zhǔn)：①突發(fā)再次腦卒中；②病情不穩(wěn)定不能繼續(xù)進(jìn)行康復(fù)治療；③患者或家屬在研究期間提出退出要求。

腦梗死患者按發(fā)病3～7 d的顱腦CT結(jié)果分為2組，最大梗死直徑≤4 cm者為小面積腦梗死組，最大梗死直徑＞4 cm者為大面積腦梗死組。

根據(jù)入院時(shí)病程長(zhǎng)短分為2組，發(fā)病時(shí)間≤1個(gè)月者為短病程組，發(fā)病時(shí)間＞1個(gè)月者為長(zhǎng)病程組。

選取本院2016年7月至8月的33例健康查體者作為對(duì)照組，年齡、性別皆與患者組相匹配，且無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組受試者一般資料比較

1.2 方法

1.2.1 常規(guī)康復(fù)治療

根據(jù)神經(jīng)生理學(xué)及神經(jīng)發(fā)育學(xué)原理，按照患者疾病的不同階段、不同特點(diǎn)以Bobath療法、Brunnstrom療法、Rood療法、本體感神經(jīng)肌肉促進(jìn)療法等為基本方法，綜合進(jìn)行康復(fù)治療[9]，內(nèi)容包括體位控制、改善關(guān)節(jié)活動(dòng)范圍、抗痙攣、隨意性改善訓(xùn)練、肢體耐力訓(xùn)練、坐位和立位平衡訓(xùn)練、步行訓(xùn)練、拐杖使用及輪椅使用訓(xùn)練、日常生活動(dòng)作訓(xùn)練等，同時(shí)注意家屬指導(dǎo)，以配合康復(fù)治療。

每次45m in，每天1次，每周5次，共6周。

1.2.2 評(píng)價(jià)方法

1.2.2.1 VEGF測(cè)定

腦梗死患者均于康復(fù)治療前及康復(fù)治療6周后各采空腹血一次。對(duì)照組于體檢時(shí)采取早晨空腹血，收集血清，只采集一次。

測(cè)定材料及儀器：酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法(ELISA法)試劑盒(武漢云克隆科技股份有限公司)；EnSpire多功能酶標(biāo)儀(美國(guó)PERKIN ELMER公司)。

實(shí)驗(yàn)按照試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行。預(yù)試驗(yàn)確定樣品稀釋倍數(shù)。實(shí)驗(yàn)樣本經(jīng)過(guò)4倍稀釋后取100μl加入到包被有VEGF抗體的酶標(biāo)板中，37℃孵育2 h后吸棄，加入檢測(cè)溶液A 100μl，37℃孵育1 h后洗板3次，再加入檢測(cè)溶液B 100μl，37℃孵育30 m in，洗板5次后加入TMB底物90μl，37℃孵育20 m in后加入終止液50μl，并在多功能酶標(biāo)儀上以450 nm讀取平均光密度值(opticaldensity,OD)，并通過(guò)計(jì)算得出樣品實(shí)際濃度。

1.2.2.2 簡(jiǎn)式Fugl-Meyer評(píng)定法(Fugl-Meyer Assessment,FMA)[10]

采用FMA評(píng)定運(yùn)動(dòng)功能。FMA總分100分。＜50分為嚴(yán)重運(yùn)動(dòng)障礙(Ⅰ級(jí))；50～84分明顯運(yùn)動(dòng)障礙(Ⅱ級(jí))；85～95分中度運(yùn)動(dòng)障礙(Ⅲ級(jí))；96～99分輕度運(yùn)動(dòng)障礙(Ⅳ級(jí))。

1.2.2.3 改 良 Barthel指 數(shù) (modified Barthel index, MBI)[11]

采用MBI評(píng)定日常生活活動(dòng)能力(activitiesof daily living,ADL)。MBI分進(jìn)食、如廁、梳飾、洗澡、更衣、轉(zhuǎn)移、行走、上下樓梯、小便控制、大便控制共10項(xiàng)，總分100分。

分別于康復(fù)治療前和康復(fù)治療6周后進(jìn)行上述評(píng)價(jià)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料采用配對(duì)t檢驗(yàn)，比較病例組康復(fù)治療前后VEGF水平、FMA評(píng)分和MBI評(píng)分；運(yùn)用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，分別比較大面積腦梗死組與小面積腦梗死組、短病程組與長(zhǎng)病程組VEGF的水平。顯著性水平α=0.05。

2 結(jié)果

康復(fù)治療結(jié)束時(shí)病例沒(méi)有出現(xiàn)脫落情況。

2.1 兩組血清VEGF水平比較

病例組康復(fù)治療前后血清VEGF水平均高于對(duì)照組(P＜0.05)，但組內(nèi)比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。見(jiàn)表2。

表2 康復(fù)治療前后血清VEGF水平(pg/m l)

2.2 病例組FMA評(píng)分和MBI評(píng)分

病例組康復(fù)治療后FMA和MBI評(píng)分均較治療前顯著提高(P＜0.001)。見(jiàn)表3。

表3 病例組康復(fù)治療前后FMA和MBI評(píng)分

2.3 小面積腦梗死組與大面積腦梗死組VEGF水平比較

大面積腦梗死組的VEGF水平高于小面積腦梗死組的VEGF水平(P＜0.05)。見(jiàn)表4。

表4 小面積腦梗死組與大面積腦梗死組VEGF水平比較

2.4 短病程組與長(zhǎng)病程組VEGF水平比較

短病程組的VEGF水平高于長(zhǎng)病程組的VEGF水平(P＜0.05)。見(jiàn)表5。

表5 短病程組與長(zhǎng)病程組VEGF比較

3 討論

VEGF是一種特異性的與血管生長(zhǎng)有關(guān)的生長(zhǎng)因子，在缺血等病理?xiàng)l件下，低氧作為一種信號(hào)激活VEGF/VEGF受體系統(tǒng)，參與血管再生機(jī)制及側(cè)支循環(huán)的形成。

近期研究提示，VEGF對(duì)神經(jīng)發(fā)生具有直接或間接的促進(jìn)作用[12-13]，其機(jī)制可能有以下三種：①VEGF可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞釋放腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，并在腦組織中形成血管，從而有利于神經(jīng)前體細(xì)胞的增殖和分化，或直接促進(jìn)神經(jīng)前體細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂[14]；②VEGF可保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞不致發(fā)生程序性死亡，從而抵抗腦組織缺血或再灌注損傷[15]；③VEGF可通過(guò)一氧化氮產(chǎn)生舒張血管平滑肌的作用，促進(jìn)血流恢復(fù)，進(jìn)而保護(hù)缺血性損傷的腦組織[15]。

有多項(xiàng)研究結(jié)果表明，缺血性腦卒中發(fā)生24 h即可從血清中檢測(cè)出VEGF水平升高，后迅速增加，約第7天達(dá)高峰，隨后逐漸下降，約第14天左右濃度可回歸至正常水平[12-13]，且血清VEGF水平與缺血性腦卒中患者的預(yù)后關(guān)系密切[16]，VEGF的濃度越高，其神經(jīng)保護(hù)作用越強(qiáng)，則缺血性腦卒中的預(yù)后越好。

董桂英在研究高壓氧治療對(duì)急性腦梗死患者血清VEGF水平的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，血清VEGF的濃度在第15天時(shí)達(dá)到高峰，在第30天時(shí)出現(xiàn)下降[17]。這與之前研究顯示的缺血性腦卒中患者血清VEGF的濃度曲線有所差別。分析其原因，考慮其機(jī)制可能為高壓氧治療通過(guò)調(diào)節(jié)腦梗死患者血清中VEGF的含量，參與急性腦梗死患者的腦血管發(fā)生和重建，從而達(dá)到改善神經(jīng)功能缺損及提高ADL的作用。

眾所周知，腦梗死患者生命體征平穩(wěn)后需要進(jìn)行康復(fù)治療[18-21]，但康復(fù)治療是否對(duì)腦梗死后VEGF的水平產(chǎn)生影響，至今未見(jiàn)相關(guān)研究及報(bào)道。

關(guān)于治療及干預(yù)措施如何影響腦梗死后VEGF水平方面的研究，主要涉及高壓氧治療[17]、尤瑞克林[2]、中藥湯劑[22]等，未見(jiàn)康復(fù)治療作為干預(yù)措施對(duì)腦梗死后VEGF水平的研究報(bào)道。

故本研究通過(guò)觀察48例腦梗死患者康復(fù)治療前后VEGF水平的變化，探討腦梗死患者康復(fù)治療的有關(guān)機(jī)制。結(jié)果顯示，病例組在康復(fù)治療前與康復(fù)治療6周后相比，血清VEGF水平無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，康復(fù)治療前后VEGF水平均高于對(duì)照組(P＜0.05)。病例組康復(fù)治療后運(yùn)動(dòng)功能和ADL均較治療前提高。

腦梗死患者經(jīng)過(guò)康復(fù)治療后，VEGF可維持在較高的濃度。之前的研究顯示，腦梗死發(fā)病后14 d左右血清VEGF回歸至正常水平[12-13]。本研究提示，康復(fù)治療對(duì)VEGF高濃度水平的維持起著重要的作用。

近期有國(guó)內(nèi)外研究表明，運(yùn)動(dòng)可以提高VEGF和VEGF mRNA的含量，有利于血管損傷后的恢復(fù)[23-25]，但研究均局限于骨骼肌及心肌血管側(cè)支循環(huán)的形成，未涉及腦梗死患者的腦血管發(fā)生和重建。本研究發(fā)現(xiàn)，腦梗死后康復(fù)治療可使VEGF水平維持在較高濃度，機(jī)制可能與之相似，即康復(fù)治療包括肢體運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練，可調(diào)整機(jī)體的缺血缺氧狀況，誘發(fā)VEGF增加，這有利于血管內(nèi)皮修復(fù)或代償性的側(cè)支循環(huán)。

進(jìn)一步分析腦梗死病灶大小與VEGF水平的關(guān)系，結(jié)果顯示，大面積腦梗死組的VEGF水平高于小面積腦梗死組的VEGF水平(P＜0.05)。表明腦損傷面積越大，缺血缺氧程度越重，誘導(dǎo)產(chǎn)生VEGF含量越多。該結(jié)果與之前相關(guān)研究結(jié)果一致[26-27]，從一個(gè)側(cè)面支持缺血低氧作為一種信號(hào)激活VEGF/VEGF受體系統(tǒng)，可保護(hù)神經(jīng)組織，并誘導(dǎo)側(cè)支血管生成，改善腦梗死的預(yù)后。

關(guān)于腦梗死病程與VEGF水平的關(guān)系，未見(jiàn)有相關(guān)方面研究。本研究結(jié)果顯示，短病程組的VEGF水平高于長(zhǎng)病程組的VEGF水平(P＜0.05)。結(jié)合之前相關(guān)研究[12-13]，該結(jié)果提示腦梗死恢復(fù)期病程越短，VEGF的產(chǎn)生越多，隨著缺血缺氧的改善，VEGF的產(chǎn)生逐漸減少，符合VEGF受缺血缺氧誘導(dǎo)的產(chǎn)生規(guī)律。

綜上所述，VEGF作為參與血管再生機(jī)制及側(cè)支循環(huán)形成的主要作用因子，有著十分重要的地位，可保護(hù)神經(jīng)組織，促進(jìn)側(cè)支循環(huán)，改善腦梗死的預(yù)后。康復(fù)治療通過(guò)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練使VEGF維持在較高的濃度水平，促進(jìn)患者的功能恢復(fù)。

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Level of Serum Vascular EndothelialGrow th Factor in Patientsw ith Cerebral Infarction before and after Rehabilitation

LU Li-ping,SANG De-chun,BAIFan,CHEN Hui,YANG Fan,CHU Hong-yu,ZHANG Xiao-yu,LIXin,LIU Jian-hua
1.CapitalMedical University Schoolof Rehabilitation Medicine,Beijing 100068,China;2.Beijing Bo'aiHospital, China Rehabilitation Research Center,Beijing 100068,China

ObjectiveTo investigate the changeof serum vascularendothelialgrow th factor(VEGF)in cerebral infarction before and after rehabilitation.MethodsForty-eightpatientswith first cerebral infarction wereenrolled from June,2014 to August,2016 in Beijing Bo'ai Hospital.Level of serum VEGF wasmeasured by enzyme-linked immunosorbentassay(ELISA)before and six weeks after rehabilitation. The level of serum VEGF of 33 normal subjectswas compared with the patients'.ResultsThe level of serum VEGFwas higher in the patientsgroup than in the controlgroup before and six w eeksafter rehabilitation(t＞2.540,P＜0.05).The level of VEGFw ashigher in the large area infarction group(＞4 cm)than in the small area infarction group(≤4 cm)(t=4.436,P＜0.05),and was higher in the short course(less than onemonth)infarction group than in the long course(more than onemonth)group(t=2.316,P＜0.05).ConclusionVEGF can bemaintained in high levelafter rehabilitation.

vascularendothelialgrow th factor;cerebral infarction;rehabilitation;vascular regeneration

10.3969/j.issn.1006-9771.2016.12.015

R743.3

A

1006-9771(2016)12-1434-04

2016-10-17

2016-11-10)

中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(No.2014CZ-35)。

1.首都醫(yī)科大學(xué)康復(fù)醫(yī)學(xué)院，北京市100068；2.中國(guó)康復(fù)研究中心北京博愛(ài)醫(yī)院，北京市100068。作者簡(jiǎn)介：盧利萍(1983-)，女，漢族，湖南瀏陽(yáng)市人，碩士，主治醫(yī)師，主要研究方向：康復(fù)評(píng)定和神經(jīng)康復(fù)。通訊作者：桑德春。E-mail:sdc12663@126.com。