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        四種不同來(lái)源精子對(duì)ICSI治療結(jié)局的影響分析

        2016-12-26 08:18:59鐘安宋革陳瑞玲
        中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥 2016年23期

        鐘安 宋革 陳瑞玲

        【摘要】 目的 比較四種來(lái)源精子進(jìn)行卵胞漿內(nèi)單精子注射(ICSI)的臨床結(jié)局。方法 女方常規(guī)超排卵和取卵, 成熟卵子行ICSI注射, 比較采用睪丸精子組(A組)、附睪精子組(B組)、輸精管精子組(C組)和射出精子組(D組)的受精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率和臨床妊娠率。結(jié)果 四組受精率、卵裂率及臨床妊娠率比較, 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 而C組優(yōu)胚率39.40%低于A、B、D組的49.86%、53.34%、49.08%(P<0.05)。結(jié)論 射出精子、睪丸精子、附睪精子和輸精管精子可以通過(guò)ICSI技術(shù)治療各種因素的男性不育。

        【關(guān)鍵詞】 卵胞漿內(nèi)單精子注射;睪丸精子;附睪精子;射出精子;輸精管精子

        DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.23.073

        男性不育是男科疾病中的常見(jiàn)病, 對(duì)于各種因素造成的重度少弱畸形精子癥、無(wú)精子癥的治療一直較為困難。1992年P(guān)alermo等[1]發(fā)明了卵胞漿內(nèi)單精子注射技術(shù)(ICSI), 為嚴(yán)重男性因素不育的治療帶來(lái)了新的突破, 但不同來(lái)源的精子行ICSI治療的結(jié)局是否有差異存在爭(zhēng)議, 本研究對(duì)此進(jìn)行初步的探討, 報(bào)告如下。

        1 資料與方法

        1. 1 一般資料 收集本院2014年3月~2015年12月因男方因素行ICSI治療的不育癥患者, 共397個(gè)周期, 不育原因?yàn)橹囟壬偃趸尉影Y、無(wú)精子癥。依據(jù)精子來(lái)源不睪丸精子組(A組)83個(gè)周期、附睪精子組(B組)107個(gè)周期、輸精管精子組(C組)18個(gè)周期和射出精子組(D組)189個(gè)周期。無(wú)精子癥患者進(jìn)入治療周期前均行附睪穿刺或睪丸活檢, 以明確附睪或睪丸內(nèi)有無(wú)精子, 其中輸精管精子組為雙側(cè)輸精管結(jié)扎術(shù)后患者。重度少弱畸形精子癥患者行ICSI治療的標(biāo)準(zhǔn)為:精子濃度<5.0×106/ml, 前向運(yùn)動(dòng)精子(PR)<10%或正常精子形態(tài)(N)<2%。

        1. 2 方法

        1. 2. 1 常規(guī)超排卵 采用促性腺激素激動(dòng)劑(GnRHa)進(jìn)行降調(diào)節(jié), 用卵泡生成激素(FSH)促超排卵, 當(dāng)卵泡發(fā)育成熟后, 肌內(nèi)注射人絨毛膜促性腺激素(HCG)誘發(fā)排卵, 36~38 h后在B超引導(dǎo)下行取卵。

        1. 2. 2 經(jīng)皮附睪精子抽吸術(shù)(PESA)取精 患者取仰臥位, 常規(guī)消毒鋪巾后, 5 ml 2%利多卡因生理鹽水1:1稀釋后精索局部麻醉阻滯。用連接7號(hào)針頭的5 ml注射器抽取精子分離液約1 ml, 左手固定一側(cè)附睪, 右手持注射器經(jīng)皮穿刺附睪, 持續(xù)施加負(fù)壓抽吸, 直至有乳白色附睪液體抽出, 將抽出的附睪液放入培養(yǎng)皿中, 在倒置顯微鏡下尋找活動(dòng)精子。

        1. 2. 3 睪丸取精術(shù)(TESA)取精 麻醉方法同上。固定一側(cè)睪丸后用連接9號(hào)針頭的10 ml注射器經(jīng)皮穿刺睪丸抽吸, 將抽吸出的曲細(xì)精管置于培養(yǎng)皿中, 用注射器針頭撕碎曲細(xì)精管, 倒置顯微鏡下尋找活動(dòng)精子。

        1. 2. 4 輸精管取精 選擇輸精管較粗一側(cè), 5 ml 2%利多卡因生理鹽水1:1稀釋后局部麻醉后, 用輸精管固定鉗固定輸精管于陰囊皮下, 用輸精管分離鉗撐開(kāi)陰囊皮膚暴露輸精管, 并用輸精管固定鉗固定輸精管。用連接7號(hào)鈍針頭的5 ml注射器抽吸精子分離液約1 ml后, 插入近附睪端輸精管, 邊沖洗輸精管邊負(fù)壓抽, 將抽出的輸精管精液放入培養(yǎng)皿中, 在倒置顯微鏡下尋找活動(dòng)精子。

        1. 2. 5 射出精子獲取 禁欲4~7 d, 手淫法取精, 將全部精液射入取精杯中, 放入37℃ 、5% CO2培養(yǎng)箱中, 待精液液化后, 采用梯度離心法進(jìn)行處理。

        1. 2. 6 受精、移植及臨床妊娠情況的判定 取卵后3~4 h行ICSI, 受精后16~18 h觀察受精情況。取卵后第3天選擇評(píng)分最高的1~3個(gè)胚胎進(jìn)行移植。移植后2周測(cè)血HCG確定有無(wú)妊娠, 5周后 B超觀察有無(wú)臨床妊娠和有無(wú)多胎妊娠。

        1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        A組受精率為87.33%, 卵裂率為98.31%, 優(yōu)胚率為49.86%, 妊娠率為60.24%。B組受精率為83.87%, 卵裂率為95.45%, 優(yōu)胚率為53.34%, 妊娠率為63.55%。C組受精率為80.52%, 卵裂率為95.97%, 優(yōu)胚率為39.40%, 妊娠率為55.56%。D組受精率為86.75%, 卵裂率為96.71%, 優(yōu)胚率為49.08%, 妊娠率為61.90%。四組受精率、卵裂率及臨床妊娠率比較, 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), C組優(yōu)胚率低于其余各組(P<0.05)。

        3 討論

        精子在睪丸中產(chǎn)生, 在附睪運(yùn)行過(guò)程中不斷成熟, 獲得運(yùn)動(dòng)能力、識(shí)別卵子透明帶的有力及與卵子結(jié)合的能力。理論上睪丸精子最不成熟, 畸形率相對(duì)較高, 活動(dòng)能力差, 但本研究用睪丸精子、附睪精子、輸精管精子與射出精子行ICSI進(jìn)行比較, 發(fā)現(xiàn)不同來(lái)源精子借助顯微注射技術(shù)直接進(jìn)入卵漿內(nèi), 均能達(dá)到較好的受精能力。

        Bukulmez[2]比較射出精子組、附睪精子組、睪丸精子組的ICSI結(jié)局, 結(jié)果各組間無(wú)明顯差別。李滿等[3]的研究表明, 使用射出精子、附睪精子、睪丸精子在受精率、卵裂率及臨床妊娠率方面無(wú)明顯差別。張丹等[4]報(bào)道射出精液組、經(jīng)皮附睪穿刺和經(jīng)皮睪丸穿刺取精組在受精率、優(yōu)胚率、卵裂率和臨床妊娠率比較差異無(wú)明顯差別。本研究與其結(jié)局一致, 但C組優(yōu)胚率低于其余各組(P<0.05), 可能由于輸精管精子在輸精管環(huán)境停留時(shí)間過(guò)久, 大量精子發(fā)生老化或凋亡導(dǎo)致ICSI操作時(shí)間和卵子暴露時(shí)間延長(zhǎng), 也可能與輸精管結(jié)扎手術(shù)使得輸精管精子內(nèi)環(huán)境發(fā)生改變相關(guān), 具體因素還需要進(jìn)一步探討。

        綜上所述, 不論是射出的精子、還是附睪或睪丸精子、或者是輸精管精子, 不影響其ICSI的受精率、卵裂率和臨床妊娠率。

        參考文獻(xiàn)

        [1] Palermo G, Joris H, Devroey P, et al. Pregnancies after intracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte. Lancet, 1992 , 340(8810):17-18.

        [2] Bukulmez O. The origin of spermatozoa does not affect intracy-toplasmic sperm injection outcome. European Journal of Obstetrics Gynecology & Reproductive Biology, 2001, 94(2):250-255.

        [3] 李滿, 莊廣倫, 張敏芳, 等.用射出精子、附睪精子、睪丸精子顯微受精治療男性不育.中華外科雜志, 2000, 38(4):280-282.

        [4] 張丹, 譚麗, 趙冬梅.三種不同來(lái)源精子行卵泡漿內(nèi)單精子注射臨床結(jié)局的比較.中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新, 2014, 32(11):11-13.

        [收稿日期:2016-04-22]

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