丁 華，羅光恒，羅 蕾，曹 穎，唐小虎，柳 浩，楊秀書，孫兆林

(1.貴州醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院泌尿外科，貴州貴陽(yáng) 550002；2.貴州醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院病理科，貴州貴陽(yáng) 550002)

?

·基礎(chǔ)研究·

經(jīng)尿道2 μm激光前列腺汽化切除術(shù)后前列腺部尿道創(chuàng)面修復(fù)機(jī)制的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究

丁 華1，羅光恒1，羅 蕾1，曹 穎2，唐小虎1，柳 浩1，楊秀書1，孫兆林1

(1.貴州醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院泌尿外科，貴州貴陽(yáng) 550002；2.貴州醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院病理科，貴州貴陽(yáng) 550002)

目的 建立2 μm激光犬經(jīng)膀胱前列腺汽化切除術(shù)模型，探討前列腺部尿道創(chuàng)面再上皮化的修復(fù)機(jī)制。方法 對(duì)15只成年雄性中華田園犬行2 μm激光經(jīng)膀胱前列腺汽化切除術(shù)，于術(shù)后3 d、1、2、3及4周行膀胱鏡鏡檢觀察前列腺部尿道的修復(fù)情況。對(duì)創(chuàng)面進(jìn)行序貫取材，HE染色，免疫組織化學(xué)檢測(cè)創(chuàng)面細(xì)胞integrin α2β1、CD133、CD44和Sca-1的表達(dá)，電鏡下觀察再生細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果 膀胱鏡檢顯示術(shù)后1周可見少量再生上皮，未發(fā)現(xiàn)膀胱頸尿路上皮與尿道創(chuàng)緣呈爬行生長(zhǎng)的現(xiàn)象。術(shù)后2周再生上皮逐步增多，至術(shù)后3～4周創(chuàng)面被其覆蓋。HE染色可見創(chuàng)面壞死組織下前列腺上皮增殖、遷移和分化，將創(chuàng)面覆蓋。術(shù)后4周創(chuàng)面再上皮化完成，整個(gè)修復(fù)過程未觀察到創(chuàng)面兩端正常上皮向創(chuàng)面爬行生長(zhǎng)。免疫組化提示創(chuàng)面下增生細(xì)胞不表達(dá)integrin α2β1、CD133、CD44 和Sca-1。術(shù)后2、3周透視電鏡下增生細(xì)胞核仁顯著，胞質(zhì)內(nèi)見豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，未見前列腺小體及神經(jīng)內(nèi)分泌顆粒。結(jié)論 2 μm激光犬經(jīng)膀胱前列腺汽化切除術(shù)后前列腺部尿道再上皮化很可能是由創(chuàng)面下殘余的前列腺組織完成，而其中的基底細(xì)胞可能是再上皮化的重要來源。

良性前列腺增生；再上皮化；基底細(xì)胞；前列腺干細(xì)胞

良性前列腺增生(benign prostate hyperplasia，BPH)是中老年男性常見疾病之一[1]。近年來2 μm激光汽化切除術(shù)因操作精細(xì)、止血效果良好、術(shù)后恢復(fù)快等，已成為治療BPH安全有效的新手段[2-3]。然而術(shù)后的創(chuàng)面組織水腫、壞死及繼發(fā)腐肉形成，可導(dǎo)致患者排尿不適和(或)術(shù)后出血、創(chuàng)面結(jié)石形成及尿路感染。前列腺部尿道的再上皮化(re-epithelialization)有利于封閉前列腺部尿道手術(shù)創(chuàng)面，是BPH患者前列腺切除術(shù)后修復(fù)的關(guān)鍵步驟之一。前期研究顯示2 μm激光前列腺切除術(shù)后犬前列腺部尿道創(chuàng)面修復(fù)并非傳統(tǒng)觀念的由創(chuàng)緣旁膀胱頸尿路上皮向創(chuàng)面中心增殖覆蓋完成，而是由創(chuàng)面下殘余前列腺細(xì)胞增殖、遷移、覆蓋創(chuàng)面后分化完成[4-5]。但較短時(shí)間內(nèi)創(chuàng)面即被尿路上皮覆蓋修復(fù)的原因尚不清楚。為此，我們對(duì)創(chuàng)面再上皮化的確切細(xì)胞來源及修復(fù)機(jī)制進(jìn)行進(jìn)一步探索。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 成年雄性中華田園犬15只，購(gòu)于遵義醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物場(chǎng)，年齡5～7歲，體重18～22 kg。

1.2 模型建立 2 μm激光犬前列腺汽化切除術(shù)模型參見文獻(xiàn)[6]。2 μm激光使用Tm-YAG激光(RevoLixTM，Lisa Laser Products，Katlenburg，德國(guó)), 輸出能量為70 W。水合氯醛(0.3 mL/100 g)麻醉家犬，麻醉生效后仰臥位固定，常規(guī)消毒后行下腹部正中切口暴露膀胱。經(jīng)膀胱插入電切鏡。直視下，2 μm激光由尿道內(nèi)口進(jìn)入前列腺部尿道，完成弧形汽化切除前列腺部尿路上皮和部分前列腺組織。術(shù)畢縫合膀胱，關(guān)閉腹腔，術(shù)后不留置導(dǎo)尿管。

1.3 膀胱鏡 水合氯醛(0.3 mL/100 g)麻醉家犬，麻醉生效后仰臥位固定，常規(guī)消毒后經(jīng)原切口逐層切開，鈍性分離，暴露膀胱，膀胱前壁切開約1 cm切口，置入膀胱鏡，固定。術(shù)中進(jìn)行錄像。

1.4 取材及HE染色 分別于術(shù)后3 d、1、2、3、4周處死動(dòng)物，每組各3只，留取前列腺部尿道標(biāo)本，HE染色光鏡觀察。

1.5 免疫組織化學(xué)染色 采用EnVision二步法，按照說明書進(jìn)行操作。一抗integrin α2β1、CD133、CD44及Sca-1均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.6 電鏡觀察方法 將術(shù)后2、3周犬處死后迅速取出前列腺部尿道標(biāo)本, 將組織切成體積<1 mm3的組織塊，放入2.5%戊二醛固定液固定2 h(4 ℃保存), 經(jīng)清洗液沖清后, 于1%鋨酸固定液固定2 h, 經(jīng)遞增濃度的乙醇逐級(jí)脫水, 用618環(huán)氧樹脂制成包埋塊后, 使用LKB-I型超薄切片機(jī)切片, 超薄切片經(jīng)過枸櫞酸鉛、醋酸鈾雙重染色后, 在JEM-1200EX 透射電子顯微鏡下觀察、攝片。

2 結(jié) 果

2.1 犬前列腺尿道部前列腺再上皮化膀胱鏡觀察結(jié)果 術(shù)后立即觀察前列腺尿道部，創(chuàng)面組織呈燒灼樣(圖1A)。術(shù)后3 d見創(chuàng)面大量蒼白壞死組織覆蓋，未見再生上皮(圖1B)。術(shù)后1周創(chuàng)面較前紅潤(rùn)，部分蒼白壞死組織覆蓋，出現(xiàn)散在薄層再生上皮，該再生上皮與創(chuàng)緣旁膀胱頸尿路上皮不相連(圖1C)。術(shù)后2周觀察再生上皮較術(shù)后1周增多，仍未觀察到膀胱頸尿路上皮爬行覆蓋手術(shù)創(chuàng)面的現(xiàn)象(圖1D)。術(shù)后3周觀察創(chuàng)面由再生上皮幾乎完全覆蓋創(chuàng)面，創(chuàng)面紅潤(rùn)，較平整(圖1E)。術(shù)后4周觀察前列腺部再生上皮和正常尿路上皮顏色接近(圖1F)。 犬前列腺尿道部再上皮化膀胱鏡觀察見圖1。

圖1 犬前列腺汽化切除術(shù)后膀胱鏡觀察結(jié)果

A:術(shù)畢，創(chuàng)面組織燒灼樣改變；B:術(shù)后3 d，創(chuàng)面大量蒼白壞死組織覆蓋；C:術(shù)后1周，創(chuàng)面少量蒼白壞死組織覆蓋,可見散在薄層再生上皮；D:術(shù)后2周，創(chuàng)面上再生上皮覆蓋；E:術(shù)后3周，創(chuàng)面上再生上皮完全覆蓋；F:術(shù)后4周，前列腺部再生上皮和正常尿路上皮顏色接近。

2.2 犬前列腺尿道部再上皮化HE染色觀察 術(shù)后3 d手術(shù)創(chuàng)面見大量凝固性壞死及炎性滲出物附著，創(chuàng)面下殘余前列腺腺泡增生，以壞死側(cè)增生明顯且呈實(shí)性團(tuán)巢狀(圖2A)。術(shù)后1周創(chuàng)面下前列腺上皮細(xì)胞增生較術(shù)后3 d更為顯著，細(xì)胞核大，染色質(zhì)增多，核仁明顯，部分上皮鱗狀化生，多數(shù)創(chuàng)面仍為炎性壞死滲出物附著，少數(shù)創(chuàng)面已見小片狀單層或2～3層立方新生上皮被覆，并可見新生上皮與創(chuàng)緣下增生前列腺腺泡細(xì)胞相延續(xù)現(xiàn)象(圖2B)，未觀察到膀胱頸尿路上皮和尿道遠(yuǎn)端上皮向創(chuàng)緣增殖爬行現(xiàn)象，創(chuàng)緣尿路上皮旁仍為壞死物，新生上皮與創(chuàng)緣旁尿路上皮不延續(xù)。術(shù)后2周創(chuàng)面見較多再生上皮覆蓋，再生上皮2～3層，仍可觀察到再生上皮與上皮下增生細(xì)胞團(tuán)相延續(xù)現(xiàn)象(圖2C)。術(shù)后3周，再生上皮基本覆蓋創(chuàng)面，上皮有極向，部分上皮表面見傘細(xì)胞，上皮下肉芽組織漸成熟，纖維組織增生并炎細(xì)胞減少(圖2D)。術(shù)后4 周HE圖像基本同術(shù)后3周(圖2E)。犬前列腺尿道部再上皮化病理組織學(xué)見圖2。

圖2 犬前列腺部尿道再上皮化病理組織學(xué)觀察結(jié)果(HE，×400)

A:術(shù)后3 d創(chuàng)面壞死組織下前列腺腺泡上皮增生，近壞死側(cè)增生呈實(shí)性團(tuán)巢狀(箭頭示)； B:術(shù)后1周創(chuàng)面下前列腺上皮顯著增生并部分鱗狀化生(白箭頭示)，創(chuàng)面再生上皮與創(chuàng)緣下增生前列腺上皮相延續(xù)(黑箭頭示)；C:術(shù)后2周較多創(chuàng)面見2～3層的再生上皮覆蓋，仍可見再生上皮與上皮下增生細(xì)胞團(tuán)相延續(xù)(箭頭示)；D:術(shù)后3周再生上皮5～6層，仍可見再生上皮與上皮下增生細(xì)胞團(tuán)相延續(xù)(箭頭示);E:術(shù)后4周再上皮化完成。

2.3 犬前列腺尿道部再上皮化免疫組化染色結(jié)果 免疫組化染色結(jié)果顯示，術(shù)后3 d、1、2、3及4周創(chuàng)面下前列腺腺泡增生細(xì)胞不表達(dá)integrin α2β1、CD133、CD44及Sca-1。犬前列腺尿道部再上皮化免疫組化染色見圖3。

圖3 犬前列腺汽化切除術(shù)后再上皮化免疫組化術(shù)后3 d觀察結(jié)果(EnVision，×400)

A:創(chuàng)面下增生的前列腺細(xì)胞不表達(dá)integrin α2β1；B:創(chuàng)面下增生的前列腺細(xì)胞不表達(dá)CD133；C:創(chuàng)面下增生的前列腺細(xì)胞不表達(dá)CD44；D:創(chuàng)面下增生的前列腺細(xì)胞不表達(dá)Sca-1。

2.4 犬前列腺尿道部前列腺再上皮化電鏡觀察結(jié)果 術(shù)后2周及3周創(chuàng)面下前列腺增生細(xì)胞核仁顯著(圖4A)，胞質(zhì)內(nèi)見豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(圖4B)，未見半月形的致密性前列腺小體及神經(jīng)內(nèi)分泌顆粒。犬前列腺尿道部電鏡觀察見圖4。

圖4 犬前列腺部尿道增生細(xì)胞電鏡結(jié)果

A:術(shù)后2周增生細(xì)胞見大核仁(箭頭示)；B:術(shù)后2周增生細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(箭頭示)

3 討 論

雖然經(jīng)尿道前列腺電切術(shù)(transurethral resection of the prostate，TURP)是泌尿外科治療BPH的金標(biāo)準(zhǔn)，但隨著快速康復(fù)理念的廣泛接納，因經(jīng)尿道銩激光 前列腺切除術(shù)(transurethral thulium laser resection of prostate, TmLRP)由于止血效果良好和操作精細(xì)而被越來越多的泌尿外科醫(yī)師所選擇[7]。然而在前列腺切除術(shù)后，創(chuàng)面裸露并無尿路上皮覆蓋。此時(shí)尿路上皮覆蓋創(chuàng)面的修復(fù)過程，即再上皮化，成為封閉創(chuàng)面、抵御外源性病原體的關(guān)鍵。為此，再上皮化細(xì)胞來源及修復(fù)機(jī)制的研究對(duì)于加快患者術(shù)后恢復(fù)有著重要意義。

但再上皮化的細(xì)胞來源一直存在著爭(zhēng)議。傳統(tǒng)觀念認(rèn)為再上皮化是由創(chuàng)緣旁膀胱頸尿路上皮爬行，但在POW-SANG等[6]的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明再上皮化來源于增殖的腺泡、導(dǎo)管細(xì)胞爬行覆蓋創(chuàng)面。在本研究中，我們采用了膀胱鏡對(duì)手術(shù)創(chuàng)面進(jìn)行了序貫的觀察和記錄，通過前后對(duì)比以利于對(duì)再上皮化修復(fù)的動(dòng)態(tài)觀察。結(jié)果顯示術(shù)后的不同時(shí)間段，創(chuàng)面壞死組織隨時(shí)間而逐漸減少脫落消失，再生上皮的逐步覆蓋，均未見創(chuàng)緣周圍膀胱頸尿路上皮爬行覆蓋，提示再上皮化并非來源于創(chuàng)緣周圍膀胱頸正常尿路上皮。

HE染色觀察結(jié)果顯示術(shù)后3 d，前列腺部尿道創(chuàng)面下即出現(xiàn)前列腺腺泡和導(dǎo)管上皮的增生，術(shù)后1周，創(chuàng)面下前列腺細(xì)胞增生顯著且鱗狀化生，部分區(qū)域可見增生的前列腺細(xì)胞向創(chuàng)面遷移并覆蓋創(chuàng)緣致創(chuàng)面再上皮化形成，未見創(chuàng)緣周圍膀胱頸尿路上皮向創(chuàng)面中心增殖爬行現(xiàn)象，與膀胱鏡觀察結(jié)果一致；術(shù)后2周創(chuàng)面再上皮化過程基本完成，并于術(shù)后3～4周向尿路上皮分化。該結(jié)果除與膀胱鏡觀察結(jié)果一致提示再上皮化并非來源于創(chuàng)緣旁膀胱頸細(xì)胞外，還進(jìn)一步表明創(chuàng)面下增殖的前列腺細(xì)胞可能參與到了再上皮化修復(fù)。以上兩項(xiàng)觀察結(jié)果與POW-SANG等[6]研究結(jié)果一致，但是具體哪種前列腺細(xì)胞參與了再上皮化修復(fù)，這值得深入探討。

前列腺細(xì)胞由兩種類型細(xì)胞組成，即上皮和間質(zhì)細(xì)胞。上皮細(xì)胞包括基底細(xì)胞、一過性增幅細(xì)胞和終分化完全的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞以及分泌上皮細(xì)胞，它們表達(dá)分泌產(chǎn)物各不相同[8]。前列腺分泌細(xì)胞能合成和分泌前列腺特異性抗原(prostate specific antigen, PSA)，表達(dá)PSA和低分子量細(xì)胞角蛋白(34βE12，CK8/18)，前列腺基底細(xì)胞無分泌PSA的活性，但特異性表達(dá)高分子量細(xì)胞角蛋白(CK5和CK14)和P63, 神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞表達(dá)突觸素(Synaptophysin, Syn)、嗜鉻素A(Chromogranin A, CgA)[9]，因此可以通過免疫組化染色可將基底細(xì)胞、分泌細(xì)胞和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞清晰地區(qū)分開。為探討是何種前列腺細(xì)胞參與再上皮化，我們?cè)谇捌谘芯恐蟹謩e對(duì)術(shù)后不同時(shí)間段的前列腺尿道部組織進(jìn)行免疫組化，發(fā)現(xiàn)從術(shù)后3 d至4周，創(chuàng)緣下增生的前列腺上皮表達(dá)CK34βE12、CK14、p63，不表達(dá)PSA、CK8/18、Syn、CgA，即創(chuàng)面下增殖的細(xì)胞表達(dá)前列腺基底細(xì)胞特異生物標(biāo)志，不表達(dá)分泌細(xì)胞特異標(biāo)志[5,10]。這說明參與再上皮化的細(xì)胞很可能為前列腺基底細(xì)胞而非分泌細(xì)胞或神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞。

創(chuàng)面修復(fù)需要細(xì)胞的增殖、分化。為進(jìn)一步明確再上皮化細(xì)胞來源，我們還對(duì)術(shù)后2周及3周創(chuàng)面下前列腺增生細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了電鏡觀察，結(jié)果顯示：其一，增生細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)未見前列腺分泌細(xì)胞特異性的致密性前列腺小體或神經(jīng)內(nèi)分泌顆粒，提示增生細(xì)胞并非前列腺分泌細(xì)胞或神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞，而可能是前列腺基底細(xì)胞，這與我們前期免疫組化結(jié)果一致；其二，創(chuàng)面下增生細(xì)胞核仁顯著，胞質(zhì)內(nèi)見豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。大核仁或多個(gè)核仁提示蛋白質(zhì)合成旺盛；粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增多往往出現(xiàn)在細(xì)胞受到某些損傷和出現(xiàn)功能性改變時(shí)(如細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成增多)時(shí)，例如在生長(zhǎng)過程、再生過程或癌的發(fā)生過程中[11-12]中免疫組化染色增殖因子PCNA、Ki-67高表達(dá)一致，與本研究HE染色中觀察到創(chuàng)面下前列腺細(xì)胞增生相符。我們?cè)谇捌谘芯恐羞€采用免疫組化方法發(fā)現(xiàn)術(shù)后3～4周創(chuàng)面再生上皮表達(dá)Uroplakin，即證實(shí)再生上皮向尿路上皮分化的過程[5,12]。結(jié)合前期和本次研究的免疫組化及電鏡結(jié)果，我們推斷前列腺基底細(xì)胞通過活躍增殖、分化直接參與到了再上皮化修復(fù)過程中。

在經(jīng)典的小鼠去勢(shì)-雄激素替代實(shí)驗(yàn)后，經(jīng)多年努力，現(xiàn)今學(xué)者們普遍認(rèn)為前列腺中很可能存在干細(xì)胞。有研究提示前列腺干細(xì)胞位于基底細(xì)胞層[13-14]，它們長(zhǎng)期處于靜止?fàn)顟B(tài)、具備卓越的增殖能力、多向分化潛能[15-16]。這使得其可以增殖分化為其他上皮類型[17]，維持前列腺結(jié)構(gòu)功能完整[18]。干細(xì)胞生存的微環(huán)境維持并調(diào)節(jié)著干細(xì)胞的生物學(xué)特性，使干細(xì)胞的靜息態(tài)、自我更新和分化保持平衡。2 μm激光前列腺切除術(shù)對(duì)前列腺組織的熱損傷使得前列腺列腺組織的修復(fù)過程類似組織燒傷的修復(fù)過程，期間經(jīng)歷了炎癥反應(yīng)期。有研究提示炎癥可以促進(jìn)前列腺干細(xì)胞的增殖與直接分化[19]。因此，我們推測(cè)2 μm激光前列腺切除術(shù)后，干細(xì)胞微環(huán)境的改變、炎癥因子的作用下，前列腺干細(xì)胞增值分化潛能被激發(fā)，故而通過增殖、遷移、并逐漸分化為尿路上皮進(jìn)而完成了再上皮化過程。

目前多采用利用CD44、integrin α2β1、CD133、Sca-1等干細(xì)胞表面標(biāo)志，通過免疫磁珠或流式細(xì)胞儀從前列腺組織中分選純化出前列腺干細(xì)胞群[15,18]。所以為探索前列腺干細(xì)胞是否直接參與再上皮化，我們選取了integrin α2β1、CD133、CD44和Sca-1這些較為特異的干細(xì)胞抗原，對(duì)術(shù)后3 d、1～4周增生的前列腺增生細(xì)胞及再生上皮化細(xì)胞進(jìn)行免疫組化。然而免疫組化標(biāo)記結(jié)果均不表達(dá)integrin α2β1、CD133、CD44和Sca-1。從結(jié)果考慮前列腺干細(xì)胞未直接參與再上皮化，但可能為選用的生物指標(biāo)不夠特異[20]，亦或是免疫組化方法檢測(cè)不夠敏感。因此前列腺干細(xì)胞是否參與了創(chuàng)面再上皮化過程仍有待進(jìn)一步研究。

綜上，膀胱鏡檢提示2 μm激光前列腺切除術(shù)后犬前列腺部尿道再上皮化并非源于創(chuàng)面附近正常的尿路上皮，可能來源于創(chuàng)面下殘余前列腺組織。免疫組化和電鏡結(jié)果提示創(chuàng)面下前列腺基底細(xì)胞可能是該修復(fù)過程的主要細(xì)胞，但前列腺干細(xì)胞是否參與再上皮化過程仍需進(jìn)一步研究。此外，此研究為動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，該結(jié)果能否能推廣到人體仍需探討。

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(編輯 何宏靈)

The mechanism of re-epithelialization in canine prostatic urethra after two-micron laser resection of the prostate

DING Hua1, LUO Guang-heng1, LUO Lei1, CAO Ying2, TANG Xiao-hu1, LIU Hao1, YANG Xiu-shu1, SUN Zhao-lin1

(1.Department of Urology; 2. Department of Pathology, Guizhou Provincial People’s Hospital,Guiyang 550002, China)

Objective Animal models were established to explore the mechanism of re-epithelialization of prostatic urethra after two-micron laser resection of the prostate(TmLRP). Methods TmLRP was performed in 15 male canines and the wounds were observed with cystoscopy and immunohistochemical staining on day 3, and in week 1, 2, 3 and 4 respectively. Cell ultrastructure was observed via electron microscope. Results Regeneration of epithelium under the wound, rather than from the edges of the wound at the bladder neck, was observed with cystoscopy after TmLRP and the regenerated epithelium gradually covered the wound. HE staining suggested that the re-epithelialization of prostatic urethra resulted from the migration and differentiation of proliferating epithelium from the residual acinar and ductal prostatic epithelium under the wound. The expression of integrin α2β1, CD133, CD44 and Sca-1 was not detected in proliferating epithelium. Remarkable nucleolus and abundant rough endoplasmic reticulum were observed by electron microscope, but not the same case with prostasome and neuroendocrine granule. Conclusion Re-epithelialization of canine prostatic urethra after TmLRP resulted from residual prostate tissue. Prostatic basal cell may be the major source in this repair process.

benign prostate hyperplasia; re-epithelialization; basal cells; prostate stem cells

2015-10-24

2016-01-29

國(guó)家自然科學(xué)基金(No.81260119)

羅光恒，教授.E-mail:luoguangheng1975@ 126.com

丁華(1989-)，男(漢族)，碩士在讀.研究方向：良性前列腺增生.E-mail：390227748@qq.com

R69

A

10.3969/j.issn.1009-8291.2016.06.016