李明勇 龐福珍 陳中件 龐黎華 徐鴦霞 奚旭陽 蔣玲珍 王穎蔚

肺炎支原體肺炎患兒血清MBL和唾液酸水平的變化研究

李明勇 龐福珍 陳中件 龐黎華 徐鴦霞 奚旭陽 蔣玲珍 王穎蔚

目的 分析肺炎支原體肺炎（MPP）患兒的血清甘露糖結(jié)合凝集素（MBL）和唾液酸水平的變化，探討其在MPP發(fā)病機制中的作用。方法 選取MPP患兒95例為MPP組，同期參加體檢的兒童60例為對照組，兩組性別、年齡比較均無統(tǒng)計學(xué)差異（均P＞0.05）。兩組均抽取外周血2ml，用ELISA法檢測血清MBL水平，神經(jīng)氨酸苷酶法檢測血清唾液酸水平，分析比較兩組MBL和唾液酸水平，探討兩者與MPP的關(guān)系。結(jié)果 MPP組急性期和恢復(fù)期血清MBL水平均顯著高于對照組（均P＜0.05）；MPP組急性期唾液酸水平顯著高于對照組（P＜0.05），恢復(fù)期與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。MPP組急性期與恢復(fù)期MBL、唾液酸水平比較均無統(tǒng)計學(xué)差異（均P＞0.05）。結(jié)論 MPP患兒血清MBL和唾液酸水平明顯增高，可能與機體炎癥反應(yīng)有關(guān)。

肺炎支原體 肺炎 兒童 甘露糖結(jié)合凝集素 唾液酸

肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP）是兒童常見的社區(qū)獲得性疾病，病程較一般肺炎長，可有持續(xù)高熱、反復(fù)咳嗽和肺外損害等表現(xiàn)，胸部X線片多有大片高密度影。MPP發(fā)病機制復(fù)雜，既有病原體直接侵犯，又有多種機制參與的免疫損傷[1]。甘露糖結(jié)合凝集素（MBL）是一種糖蛋白，是人類天然免疫中非常重要的一線抗感染分子，能通過不依賴抗體的方式激活補體起抗感染作用，同時還具有一定的急性時相蛋白的特征。唾液酸是一系列含9個碳原子羥基化單糖?；苌锏慕y(tǒng)稱，是一種帶負(fù)電荷的酸性單糖，具有一定的抗感染作用[2]。人體血清中的唾液酸主要以結(jié)合形態(tài)存在于血清類黏蛋白、結(jié)合球蛋白、補體蛋白等糖蛋白中[3]，MBL作為一種重要糖蛋白，也富含唾液酸，兩者之間存在關(guān)聯(lián)，在機體血清中表達(dá)水平的變化可能會存在一致性。本研究旨在通過分析MPP患兒血清MBL和唾液酸表達(dá)水平的變化，探討其在MPP發(fā)病機制中的可能作用。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2014年1月至2015年6月在本院兒科住院治療的MPP患兒95例（MPP組）。MPP診斷標(biāo)準(zhǔn)：符合中華人民共和國衛(wèi)生部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)——肺炎診斷（標(biāo)準(zhǔn)編號WS382-2012）的基礎(chǔ)上，同時具備肺炎支原體（MP）感染的依據(jù)（恢復(fù)期MP IgG滴度較急性期上升4倍以上或痰液MP-DNA陽性；入院時為急性期，恢復(fù)期指患兒經(jīng)治療后體溫正常、咳嗽癥狀明顯減輕2d后，或復(fù)查胸部X線片肺部炎癥較治療前明顯吸收[4]）。排除明確混合其它病原體感染，或使用免疫抑制劑及免疫調(diào)節(jié)劑的MPP患兒。另擇同期參加體檢的60例健康兒童為對照組。MPP組男53例，女42例；年齡0.92～11（5.41±2.62）歲。對照組男31例，女29例；年齡1.5～11（4.86±2.46）歲。MPP組和對照組性別、年齡比較均無統(tǒng)計學(xué)差異（均P＞0.05）。

1.2 方法 MPP組患兒分別于入院時及出院前抽取外周血2ml，置生化促凝管內(nèi)；室溫放置0.5～1h后，2 500g離心15min，取過濾膠上層血漿，分裝2管，每管200μl，置于超低溫（-80°C）冰箱保存；兩次抽血間隔（6.47± 1.70）d。采用ELISA法檢測血清MBL，試劑盒購自荷蘭Hycult Biotech公司，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作，以復(fù)孔檢測保證實驗結(jié)果準(zhǔn)確可靠。采用神經(jīng)氨酸苷酶法檢測唾液酸，試劑盒購自北京九強生物技術(shù)有限公司。對照組僅于體檢時抽取外周血檢測，方法同MPP組。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件；正態(tài)分布的計量資料以表示，兩組比較采用t檢驗；非正態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)表示，兩組比較采用Wilcoxon秩和檢驗；計數(shù)資料以構(gòu)成比表示，兩組比較采用χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 MPP組患兒臨床特點和轉(zhuǎn)歸 MPP組患兒中，有不同程度的發(fā)熱癥狀85例（89.5%），熱程（5.69±3.42）d；有較劇烈咳嗽81例（85.3%）；肺部可聞及干、濕性啰音70例（73.7%）；急性期C反應(yīng)蛋白（CRP）＞10mg/L 67例（70.5%），恢復(fù)期CRP均降至正常；胸部X線片有單側(cè)或雙側(cè)大片狀高密度影54例（56.8%），斑片狀高密度影41例（43.2%），伴胸腔積液2例（2.1%）。MPP組患兒均予阿奇霉素靜脈滴注治療至少1個療程，均治愈，住院3～17（8.66±2.38）d。

2.2 MPP組和對照組血清MBL和唾液酸水平比較 見表1。

表1 MPP組和對照組血清MBL和唾液酸水平比較

由表1可見，MPP組急性期和恢復(fù)期血清MBL水平均顯著高于對照組（均P＜0.05），而急性期與恢復(fù)期比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。MPP組急性期唾液酸水平顯著高于對照組（P＜0.05），但與恢復(fù)期比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05），且恢復(fù)期唾液酸水平與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。

3 討論

MPP的發(fā)病機制復(fù)雜，包括病原體直接侵犯和感染后造成的免疫損傷[5-6]。免疫損傷很多情況下與補體的激活有關(guān)，其中凝集素途徑不依賴特異性抗體產(chǎn)生，就能由病原微生物直接激活補體，故在抗體產(chǎn)生之前的感染早期就能發(fā)揮作用[7]。凝集素途徑主要通過血清中MBL直接識別病原體表面糖結(jié)構(gòu)，與MBL相關(guān)絲氨酸蛋白酶結(jié)合后激活補體的級聯(lián)反應(yīng)而發(fā)揮抗感染作用，該物質(zhì)在感染急性期血清中水平可較平時上升1.5～2倍[8]，可能是對抗感染的適應(yīng)性反應(yīng)。MPP組患兒急性期和恢復(fù)期血清MBL水平均高于對照組，提示MBL在啟動補體激活的凝集素途徑中可能發(fā)揮了作用，而恢復(fù)期與急性期相比，并未如預(yù)料中的有顯著下降，分析原因，可能與MPP本身病程較長，恢復(fù)期采集的標(biāo)本仍未接近完全健康狀態(tài)有關(guān)。研究表明，MBL先天缺陷機體對多種病原體的易感性增加[9-10]。本研究還未能闡明MBL缺陷與MPP易感性之間的關(guān)系，分析原因，可能與MBL遺傳缺陷在人群中的發(fā)病率相對較低，而本研究樣本量較小有關(guān)，今后若能進(jìn)行大樣本長期隨訪研究，則會對易感性分析有幫助。

唾液酸是人類很多血漿蛋白表面的組成部分，被認(rèn)為是急性炎癥反應(yīng)的重要標(biāo)記[11]。本研究顯示，MPP組患兒急性期唾液酸水平顯著高于對照組，提示唾液酸參與急性炎癥過程。MPP患兒唾液酸水平增高與急性期機體合成富含唾液酸的CRP、MBL和其他炎性相關(guān)糖蛋白的數(shù)量明顯增加有關(guān)，至于血漿糖蛋白分子表面唾液酸表達(dá)是否因炎癥過程而增加，有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，MPP患兒血清MBL和唾液酸水平明顯增高，唾液酸可能通過MBL、CRP等炎癥相關(guān)的蛋白分子表達(dá)增加來參與炎癥過程，MBL和唾液酸在兒童MPP發(fā)病中的具體機制有待進(jìn)一步研究。

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Serum levels of mannose-binding lectin and sialic acid in children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia

LI Mingyong,PANG Fuzhen,CHEN Zhongjian,et al.Department of Pediatrics,Tiantai People's Hospital,Taizhou 317200,China

【 Abstract】 Objective To investigate serum levels of mannose binding lectin(MBL)and sialic acid in children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia(MPP). Methods Ninety five children with MPP(MPP group)and 60 healthy children were (control group)were enrolled in the study.Serum MBL and sialic acids levels were detected by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)and neuraminidase method respectively.MBL and sialic acid levels between the two groups were compared. Results MBL levels in MPP group at both acute phase and convalescent phase were significant higher than those in control group(both P＜0.05).Sialic acid level in MPP group at acute phase was higher than that in control group(P＜0.05),while sialic acid level at convalescent phase had no difference with that in control group(P＞0.05). Conclusion Serum MBL and sialic acid levels in MPP children are increased,which may be correlated with inflammatory reaction.

Mycoplasma pneumonia Pneumonia Children Mannose-binding lectin Sialic acid

2015-07-22）

（本文編輯：李媚）

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