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(南京醫(yī)科大學(xué)附屬常州市第二人民醫(yī)院兒科，江蘇 常州 213003)

·臨床醫(yī)學(xué)·

匹多莫德輔助治療嬰幼兒支原體肺炎療效觀察及免疫功能變化

徐凱虹，周羅根*，程寶金

(南京醫(yī)科大學(xué)附屬常州市第二人民醫(yī)院兒科，江蘇 常州 213003)

目的探討匹多莫得輔助治療對(duì)嬰幼兒支原體肺炎患兒的T淋巴細(xì)胞亞群的百分比的影響及細(xì)胞因子和免疫球蛋白表達(dá)的變化。方法選取100例嬰幼兒支原體肺炎患兒，隨機(jī)分為觀察組(n=50)和對(duì)照組(n=50)。對(duì)照組給予紅霉素治療，觀察組采用紅霉素聯(lián)合匹多莫德治療，比較兩組患兒T淋巴細(xì)胞亞群、血清細(xì)胞因子、血清免疫球蛋白及臨床療效。結(jié)果與對(duì)照組比較，觀察組患兒外周血中CD3+、CD4+和CD4+/CD8+細(xì)胞數(shù)顯著升高，而CD8+細(xì)胞數(shù)則顯著下降，兩組間比較，其差異有顯著性(P<0.05)；觀察組患兒血清中白細(xì)胞介素(IL)-12、IFN-γ的水平顯著升高，而IL-6和IL-8的水平則明顯下降(P<0.05)；此外，觀察組患兒血清IgM、IgG和IgA的水平較對(duì)照組增高(P<0.05)，并且觀察組的臨床療效要優(yōu)于對(duì)照組(92.0% vs 66.0%，P<0.05)。結(jié)論匹多莫得佐治嬰幼兒支原體肺炎，可顯著改善患兒免疫功能，提高臨床療效，值得臨床推廣使用。

嬰幼兒支原體肺炎； 匹多莫德； T淋巴細(xì)胞亞群； 細(xì)胞因子； 免疫球蛋白

近年來，支原體肺炎(Mycoplasma Pneumonia，MMP)的發(fā)病率逐漸上升，目前已經(jīng)成為嬰幼兒常見的急性呼吸道感染疾病，治療不及時(shí)則可引起流行，嚴(yán)重威脅患兒健康[1]。有研究證實(shí)[2-3]，支原體肺炎患兒免疫失衡現(xiàn)象較常見，嬰幼兒支原體肺炎患兒亦是如此。傳統(tǒng)的抗菌治療通過抑制局部炎癥反應(yīng)而表現(xiàn)出較好的近期療效，但因于其無法糾正全身免疫功能的失衡，從而使病情反復(fù)，甚至遷延不愈。因此，對(duì)機(jī)體免疫平衡的調(diào)節(jié)可望成為治療嬰幼兒支原體肺炎的新思路。匹多莫德作為新型的免疫調(diào)節(jié)劑，可促進(jìn)中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞增殖、活化，提高其趨化性，調(diào)節(jié)促炎因子及抗炎因子分泌，具有顯著的抗感染及抗病毒作用[4]。本研究在常規(guī)大環(huán)內(nèi)酯類治療基礎(chǔ)上以匹多莫德佐治嬰幼兒支原體肺炎，并從患兒T淋巴細(xì)胞亞群、血清Th1/Th2相關(guān)細(xì)胞因子、血清免疫球蛋白等方面探討匹多莫德佐治嬰幼兒支原體肺炎的療效及初步機(jī)制，從而為臨床治療嬰幼兒支原體肺炎的藥物應(yīng)用提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1病例的一般資料收集100例經(jīng)我院收治的嬰幼兒支原體肺炎患兒(2013年6月至2015年6月)，入選病例均經(jīng)臨床體征、病史、X線檢查及實(shí)驗(yàn)室檢查等明確診斷，臨床主要表現(xiàn)為咳嗽、發(fā)熱、肺部啰音等。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)完全符合嬰幼兒支原體肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)年齡10月～3歲。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)肺結(jié)核患兒；(2)細(xì)菌、病毒、衣原體肺炎的患兒；(3)嬰幼兒哮喘患兒及患其他免疫缺陷病患兒；(4)使用其他免疫調(diào)節(jié)劑治療者。按隨機(jī)數(shù)字表法將入組患兒分為對(duì)照組和觀察組，每組50例。對(duì)照組中男28例，女22例；年齡10～36個(gè)月，平均年齡(20.0±4.5)個(gè)月；病程1～7天，平均病程(4.5±2.1)天。觀察組中男26例，女24例；年齡10～36個(gè)月，平均年齡(20.2±4.0)個(gè)月；病程1～7天，平均病程(4.6±2.3)天。各組患兒年齡、性別和病程等一般資料無差異(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1 對(duì)照組 治療用藥為靜脈注射紅霉素按20～30 mg/kg·天，分2次/天使用，連續(xù)使用7天；隨后改為口服阿奇霉素(生產(chǎn)廠家：輝瑞制藥；規(guī)格：0.1 g/袋)，口服劑量為10 mg/kg，1次/天服3天停4天，連續(xù)用藥2周。

1.2.2 觀察組 在對(duì)照組用藥基礎(chǔ)上給予口服匹多莫德口服液(生產(chǎn)廠家：江蘇蘇州長(zhǎng)征制藥廠；規(guī)格：400 mg/支)，400 mg/次，2次/天，連續(xù)用藥2周。

1.3血液采集所有患兒分別于治療前后空腹抽取肘靜脈血5 mL，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4觀察指標(biāo)

1.4.1 T淋巴細(xì)胞亞群 取CD4、CD8、CD3單抗各20 μL，分別加抗凝全血100 μL，混勻后避光置室溫孵育15min，上流式細(xì)胞儀，分別檢測(cè)CD4+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞、CD3+T淋巴細(xì)胞的百分比，并計(jì)算CD4+/CD8+比值。

1.4.2 免疫球蛋白 患兒入院當(dāng)日采集(未治療前)清晨空腹抽取外周靜脈血5 mL，1.5 mL裝入微量EDTA抗凝管中，另3.5 mL裝入未抗凝管中，2 000 r/min離心置-30 ℃冰箱保存待檢。采用免疫透射比濁法檢測(cè)免疫球蛋白m(immunoglobulin m，IgM)、免疫球蛋白G(immunoglobulin g，IgG)、免疫球蛋白a(immunoglobulin a，IgA)水平。

1.4.3 細(xì)胞因子 選用Elisa kit(BD公司)檢測(cè)血清白介素-6(interleukin-6，IL-6)、白介素-8(interleukin-6，IL-8)、白介素-12(interleukin-12，IL-12)、干擾素-γ(interferon-γ，IFN-γ)，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒內(nèi)附說明書進(jìn)行。

1.4.4 療效判定 顯效：3天內(nèi)體溫復(fù)常，1周內(nèi)咳嗽癥狀消失，肺部啰音消失，2周內(nèi)胸片好轉(zhuǎn)；有效：1周內(nèi)體溫復(fù)常，咳嗽及肺部啰音明顯減輕，2周內(nèi)胸片提示肺部炎癥減輕；無效：臨床癥狀及體征無明顯改善，甚至惡化者。

2 結(jié) 果

2.1 T淋巴細(xì)胞亞群經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)，T淋巴細(xì)胞亞群在治療前，觀察組和對(duì)照組患兒外周血中的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+細(xì)胞百分比之間差異無顯著性意義(P>0.05)，而經(jīng)治療后，與對(duì)照組比較，觀察組患兒外周血中的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比例顯著升高，且CD8+比例明顯下降，其差異有顯著性意義(P<0.05)(見表1)。

2.2細(xì)胞因子水平以ELISA檢測(cè)細(xì)胞因子水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，未經(jīng)治療，對(duì)照組和觀察組患兒血清中IL-6、IL-8、IL-12和IFN-γ的水平差異無顯著性意義(P>0.05)，而治療后，觀察組患兒血清IL-12和IFN-γ水平顯著升高，但I(xiàn)L-6和IL-8水平則明顯降低，與對(duì)照組比較，差異具有顯著性意義(P<0.05)(見表2)。

表1流式細(xì)胞術(shù)分析患兒T淋巴細(xì)胞亞群(%)

組別nCD3+治療前治療后CD4+治療前治療后CD8+治療前治療后CD4+/CD8+治療前治療后觀察組5060.1±3.268.3±3.135.3±4.543.3±3.531.1±3.528.6±2.31.4±0.42.5±0.3對(duì)照組5059.8±3.861.6±3.034.9±4.336.2±3.331.3±2.429.5±1.21.4±0.31.9±0.2t值0.8563.160.3162.910.0332.8530.0482.951P值0.4130.0340.7680.0480.9750.0460.9640.043

表2兩組患兒細(xì)胞因子水平比較(ng/L)

組別nIL-6治療前治療后IL-8治療前治療后IFN-γ治療前治療后IL-12治療前治療后觀察組5079.8±5.738.5±4.768.2±4.432.6±4.980.0±7.6109.9±6.21.6±0.44.2±0.6對(duì)照組5080.2±6.565.0±5.068.4±4.250.1±4.579.5±6.289.4±7.51.6±0.32.6±0.7t值0.0833.1140.0952.8990.1413.1560.3142.947P值0.9290.0350.9170.0480.8720.0340.7950.042

2.3免疫球蛋白水平采用免疫透射比濁法檢測(cè)免疫球蛋白，結(jié)果顯示，治療前，觀察組與對(duì)照組比較，患兒血清中IgM、IgG和IgA的水平之間的差異無顯著性意義(P>0.05)；治療后，觀察組患兒血清中IgM、IgG和IgA的水平明顯升高，跟對(duì)照組比較，其差異具有顯著性意義(P<0.05)(見表3)。

表3兩組患兒免疫球蛋白水平比較(g/L)

組別nIgM治療前治療后IgG治療前治療后IgA治療前治療后觀察組501.3±0.31.9±0.314.2±4.730.6±5.61.0±0.31.5±0.2對(duì)照組501.3±0.41.4±0.213.9±5.219.1±4.01.0±0.21.1±0.2t值0.0672.7920.8413.1210.1862.912P值0.9500.0490.4320.0360.8620.047

2.4臨床療效通過臨床療效比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，觀察組患兒的臨床療效顯著優(yōu)于對(duì)照組(92.0% vs 66.0%)，兩組之間比較，其差異有顯著性意義(P<0.05)(見表4)。

表4兩組患兒臨床療效比較(n/%)

組別n顯效有效無效總有效率觀察組5028(56.0)18(36.0)4(8.0)92.0%對(duì)照組508(16.0)25(50.0)16(34.0)66.0%Z值9.230P值0.010

3 討 論

肺炎支原體(M.Pneumonia)人類支原體肺炎的病原體，它感染宿主后，首先通過其頂端結(jié)構(gòu)粘附在宿主細(xì)胞表面致病，并可損傷細(xì)胞膜，釋放核酸酶、過氧化氫等毒性代謝產(chǎn)物，進(jìn)一步引起細(xì)胞損傷，甚至壞死，此外，它還可以通過改變宿主細(xì)胞表面抗原結(jié)構(gòu)，改變宿主機(jī)體的免疫功能[5]。近年來，發(fā)現(xiàn)支原體肺炎具有較廣泛的耐藥性，有研究者則提出糾正機(jī)體免疫功能的異常，可能是提高嬰幼兒支原體肺炎臨床療效的可靠途徑[6]。

匹多莫德作為人工合成的免疫刺激調(diào)節(jié)劑，研究發(fā)現(xiàn)，它可通過刺激機(jī)體的非特異性免疫調(diào)節(jié)機(jī)制，對(duì)機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用，并在不同的免疫反應(yīng)階段發(fā)揮著相應(yīng)的作用。在免疫反應(yīng)的快反應(yīng)期，匹多莫德可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的趨化性，促進(jìn)其吞噬作用及及殺滅感染細(xì)胞的作用，從而提高機(jī)體殺滅病原體的能力；在免疫反應(yīng)中期，匹多莫德可明顯上調(diào)IL-2及IFN表達(dá)，誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞母細(xì)胞分化，調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞亞群比例，最終糾正機(jī)體免疫功能異常，并發(fā)揮治療作用[7]。

按表型不同，T淋巴細(xì)胞可分為CD3+、CD4+和CD8+等亞群；其中CD3+的T淋巴細(xì)胞代表總T淋巴細(xì)胞，其數(shù)量直接反應(yīng)機(jī)體參與免疫應(yīng)答的免疫活性細(xì)胞的數(shù)量；CD8+則為殺傷性T細(xì)胞，它直接參與病毒等病原體的清除；CD4+為輔助性T細(xì)胞，可促進(jìn)B淋巴細(xì)胞分泌抗體，從而調(diào)節(jié)體液免疫，并且可以調(diào)節(jié)CD8+細(xì)胞的增殖和活化，但CD4、CD8不能同時(shí)表達(dá)于成熟的T淋巴細(xì)胞表面，二者起著相互誘導(dǎo)和相互制約的作用[8]。研究提示，T淋巴細(xì)胞亞群比例的變化可引起機(jī)體正常免疫功能狀態(tài)的改變[9]。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組患兒T淋巴細(xì)胞亞群中，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著升高，而CD8+明顯下降，而通過匹多莫德佐治則可上調(diào)CD3+及CD4+/CD8+比例，進(jìn)而糾正支原體肺炎所致的T淋巴細(xì)胞亞群比例失衡。

Th1/Th2免疫平衡在與嬰幼兒支原體肺炎的發(fā)生、發(fā)展過程密切相關(guān)。IL-12、IFN-γ作為Th1型細(xì)胞因子，可有效拮抗免疫球蛋白，如IgE等引起的變態(tài)反應(yīng)；IL-6、IL-8作為Th2型細(xì)胞因子，則可誘導(dǎo)IgE介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，引發(fā)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)[10-12]。我們?cè)谘芯恐幸喟l(fā)現(xiàn)，觀察組患兒血清IL-12、IFN-γ水平顯著升高，而IL-6和IL-8水平明顯降低(P<0.05)。這些結(jié)果提示，匹多莫德佐治可糾正支原體肺炎所致的機(jī)體Th1/Th2免疫失衡，減少IgE介導(dǎo)的炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，降低氣道高反應(yīng)性。

肺炎支原體感染與免疫球蛋白表達(dá)的異常存在著一定的相關(guān)性。金燕等[13]研究證實(shí)，支原體肺炎患兒血清IgM、IgG、IgA水平明顯低于健康兒童。而匹多莫德可通過上調(diào)血清IgM、IgG、IgA水平，提高機(jī)體免疫防護(hù)能力，而這對(duì)縮短病程、減少復(fù)發(fā)是極為有利的[14-15]。而我們?cè)谘芯恐幸舶l(fā)現(xiàn)，觀察組患兒血清IgM、IgG、IgA水平顯著升高(P<0.05)，進(jìn)一步證實(shí)肺炎支原體感染與免疫球蛋白表達(dá)異常之間的相關(guān)性。

綜上所述，匹多莫德佐治嬰幼兒支原體肺炎，可有效調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞亞群比例，糾正Th1/Th2免疫失衡，提高血清免疫球蛋白水平，從而增強(qiáng)患兒免疫能力，提高臨床治療效果。

[1] Youn YS,Lee KY.Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children[J].Korean J Pediatr,2012,55(2):42-47.

[2] Youn YS,Lee SC,Rhim J W,et al.Early Additional immune-modulators for mycoplasma pneumoniae pneumonia in children:an observation study[J].Infect Chemother,2014,46(4):239-247.

[3] 楚文英,徐慧,高淑青,等.高敏C-反應(yīng)蛋白與免疫功能檢測(cè)在肺炎支原體肺炎中的意義[J].臨床兒科雜志,2014,32(5):456-458.

[4] 何紅霞,壽小群.肺炎支原體肺炎患兒T細(xì)胞亞群變化及匹多莫德的治療作用[J].中國婦幼保健,2009,24(32):4560-4561.

[5] 韓文寧,李錦亮,李麗,等.肺炎支原體肺炎患兒免疫功能的變化與分析[J].中華全科醫(yī)學(xué),2012,10(1):60-61.

[6] 李政錦,周文,彭昌.嬰幼兒肺炎支原體感染后免疫功能變化的研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2012,22(15):3221-3223.

[7] 周越,戴玉旋.匹多莫德和脾氨肽對(duì)反復(fù)呼吸道感染患兒的臨床癥狀及Th1/Th2細(xì)胞因子影響的比較[J].中國生化藥物雜志,2012,33(1):64-66.

[8] Shimazu T,Borjigin L,Katayama Y,et al.Immunological characterization of peripheral blood leukocytes using vaccine for mycoplasmal pneumonia of swine (MPS) in swine line selected for resistance to MPS[J].Anim Sci,2013,84(10):683-692.

[9] 陳良東,周建波,張廷,等.肺炎支原體肺炎患兒TNF-α,IL-6,IL-8及T細(xì)胞亞群變化意義[J].臨床肺科雜志,2011,16(9):1374-1376.

[10] Kurai D,Nakagaki K,Wada H,et al.Mycoplasma pneumoniae extract induces an IL-17-associated inflammatory reaction in murine lung:implication for mycoplasmal pneumonia[J].Inflammation,2013,36(2):285-293.

[11] 陳良東,周建波,張廷,等.肺炎支原體肺炎患兒TNF-α,IL-6,IL-8及T細(xì)胞亞群變化意義[J].臨床肺科雜志,2011,16(9):1374-1376.

[12] 滕寧燕.支原體肺炎患兒血清TNF-α,IL-6,IL-8的檢測(cè)及其臨床意義[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2012,3(1):36-37.

[13] 金燕.阿奇霉素與紅霉素治療小兒支原體肺炎的療效觀察及其肺炎支原體對(duì)免疫球蛋白,T淋巴細(xì)胞亞群細(xì)胞因子的影響[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2010,26(6):593-594.

[14] Meyer Sauteur PM,Huber BM,Goetschel P.Neuroinvasive Mycoplasma pneumoniae Infection Without Intrathecal Antibody Response[J].Pediatr Infect Dis J,2012,31(11):1199-1200.

[15] 陳波,張經(jīng).支原體肺炎患兒血清體液免疫檢測(cè)的臨床研究[J].臨床肺科雜志,2012,17(6):1045-1046.

EffectofPidotimodonInfantileMycoplasmaPneumoniaandImmunologicFunction

XU Kaihong,ZHOU Luogen,CHEN Baojin

(DepartmentofPediatrics,AffiliatedChangzhouSecondPeople'sHospital,NanjingMedicalUniversity,Changzhou,Jiangsu213003,China)

ObjectiveTo evaluate the effect of pidotimod on T cell subpopulations,cytokines and immune globulin in infantile Mycoplasma pneumonia.Methods100 infantile Mycoplasma pneumonia were randomly divided into control group (n=50) and observation group (n=50).Pidotimod combined with erythromycin were used in observation group and erythromycin alone was used in control group.The T cell subpopulations,serum cytokines,serum immune globulin and clinical efficacy were compared between the two groups.ResultsAfter treatment,the CD3+,CD4+,CD4+/CD8+of observation group significantly increased,and CD8+were significantly reduced,statistically significant difference compared with control group(P<0.05).The observation group serum IL-12,IFN-γ significantly increased,and IL-6,IL-8 were significantly reduced,statistically significant difference compared with control group(P<0.05).The levels of IgM,IgG and IgA in observation group were significantly increased,statistically significant difference compared with control group(P<0.05).The clinical efficacy of observation group was better than control group (92.0% vs 66.0%),showed significant differences between the two groups(P<0.05).ConclusionUsing pidotimod treatment infantile Mycoplasma pneumonia can improve immune function,enhance curative effect,worth clinical promotion.

infantile Mycoplasma pneumonia;Pidotimod;T cell subpopulations;Cytokines; Immune globulin

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2016.03.016

2015-11-29；

2016-04-06

*通訊作者，E-mail:cz2yzlg82168@sohu.com.

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秦旭平)