(江門市人民醫(yī)院皮膚科，廣東 江門 529000)

·臨床醫(yī)學(xué)·

Th細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子水平與老年濕疹患者病理特征的系統(tǒng)分析

石志堅(jiān)

(江門市人民醫(yī)院皮膚科，廣東 江門 529000)

目的觀察輔助性T細(xì)胞1(Th1)、輔助性T細(xì)胞2(Th2)、輔助性T細(xì)胞17(Th17)在老年濕疹患者血清中的表達(dá)，探討血清細(xì)胞因子水平與濕疹的病理特征的相關(guān)性。方法收集在本科確診為老年濕疹患者60例的臨床資料，并選取健康對(duì)照組40例。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清中Th的特征細(xì)胞因子γ-干擾素(INF-γ)、白介素-4(IL-4)及白介素-17A(IL-17A)的表達(dá)水平，分別比較Th細(xì)胞相關(guān)因子在急慢性,或泛發(fā)和局限型濕疹中的差異。結(jié)果與健康對(duì)照組相比，老年濕疹患者血清IFN-γ、IL-4、IL-17A顯著升高(t=10.570，10.874，14.611；均P<0.001)。其中老年急性濕疹患者血清IFN-γ、IL-4及IL-17A顯著高于慢性期(t=3.787，3.815，5.338；均P<0.001)；泛發(fā)型患者血清IFN-γ、IL-4及IL-17A明顯高于局限型(t=2.458，2.139，3.019；均P<0.05)。結(jié)論血清IFN-γ、IL-4及IL-17A參與老年濕疹的進(jìn)展與預(yù)后，并且Th細(xì)胞相關(guān)因子表達(dá)的不同可作為反映臨床類型的指標(biāo)。

干擾素-γ； 白介素-4； 白介素-17A； 濕疹

濕疹是臨床上常見(jiàn)的炎癥性皮膚病，各年齡階段均可發(fā)生，但以老年人多見(jiàn)。本病病理機(jī)制復(fù)雜，其中免疫系統(tǒng)功能紊亂、失衡是目前研究熱點(diǎn)。T輔助細(xì)胞1/2(Helper T cell 1/2，Thl/Th2)產(chǎn)生免疫因子的動(dòng)態(tài)平衡是濕疹疾病過(guò)程中的重要因素[1]。Thl細(xì)胞分泌INF-γ、白介素-2(Interleukin-2，IL-2)及腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)，Th2細(xì)胞分泌IL-4、白介素-10(Interleukin-10，IL-10)，兩者都參與免疫炎癥反應(yīng)。過(guò)去的研究多集中在Th1/2，近年來(lái)又發(fā)現(xiàn)于Th1/2之外的Th17細(xì)胞亞群，有報(bào)道稱IL-17A與免疫及炎癥性疾病密切相關(guān)[2]。IL-17A通過(guò)調(diào)節(jié)角質(zhì)細(xì)胞中的固有免疫作用，促進(jìn)炎癥反應(yīng)進(jìn)行，對(duì)皮膚濕疹反應(yīng)中T細(xì)胞的效應(yīng)有放大作用[3]。而關(guān)于老年濕疹患者Th細(xì)胞相關(guān)因子表達(dá)水平的研究報(bào)道較少。本文探討Th細(xì)胞相關(guān)因子表達(dá)水平變化與濕疹急慢性,或泛發(fā)和局限型的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象選取2013年6月～2015年9月本科確診為老年濕疹的60例患者，患者2周內(nèi)未進(jìn)行系統(tǒng)免疫抑制劑和糖皮質(zhì)激素治療，1周內(nèi)無(wú)使用任何抗組胺藥物，無(wú)合并感染、腫瘤及其他免疫性疾病與變態(tài)反應(yīng)性。60例患者中男26例，女34例，年齡60～84歲，平均68.51±8.95歲；病程0～332月，平均28.23±5.35月。選取本院40例老年健康體檢者為對(duì)照組，其中男18例，女22例，年齡60～79歲，平均67.82±8.57歲，兩組在性別、年齡等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)。其中急性濕疹23例，男10例，女13例，平均年齡66.45±7.43歲；慢性濕疹37例，男16例，女21例，平均年齡69.79±9.18歲。局限型濕疹44例，男19例，女25例，平均年齡68.20±8.99歲；泛發(fā)型濕疹16例，男6例，女10例，平均年齡69.37±8.47歲。

1.2研究方法兩組研究對(duì)象均于門診或體檢當(dāng)天清晨進(jìn)行標(biāo)本采集，在空腹?fàn)顟B(tài)下抽取外周靜脈血5 mL，EDTA抗凝，室溫靜置30 min，3 500 r/min，離心10 min后取上層血清，置于-20 ℃冰箱保存待測(cè)。IFN-γ、IL-4及IL-17A細(xì)胞因子表達(dá)水平的檢測(cè)采用ELISA，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)(武漢博士德生物工程有限公司)操作。在酶標(biāo)儀(美國(guó)伯樂(lè)公司680型)450 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線得出血清IFN-γ、IL-4及IL-17A表達(dá)水平[4]。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSSl9.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1老年濕疹組與健康對(duì)照組血清Th細(xì)胞因子水平比較老年濕疹患者血清IFN-γ、IL-4、IL-17A表達(dá)均高于健康對(duì)照組(t=-10.570，10.874，14.611；P均<0.001)。見(jiàn)表1。

表1老年濕疹患者與健康對(duì)照組血清IFN-γ、IL-4、IL-17A的表達(dá)水平(ng/L)

組別nIFN-γIL-4IL-17A對(duì)照組4090.50±14.86178.95±18.7235.78±9.12濕疹組60124.67±16.45225.59±22.4073.16±14.35t值10.57010.87414.611P值<0.001<0.001<0.001

2.2老年急性和慢性濕疹患者血清Th細(xì)胞因子水平比較與老年慢性濕疹患者血清IFN-γ、IL-4、IL-17A相比，急性期濕疹患者的Th細(xì)胞因子水平明顯升高，差異有顯著性(t=3.787，3.815，5.338；P均<0.001)。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2老年濕疹患者急性和慢性期血清Th細(xì)胞因子水平比較(ng/L)

組別nIFN-γIL-4IL-17A急性期23135.18±17.89239.57±24.3385.95±17.85慢性期37118.14±16.34216.91±21.0865.17±12.31t值3.7873.8155.338P值<0.001<0.001<0.001

2.3老年泛發(fā)和局限型濕疹患者血清Th細(xì)胞因子水平比較與局限型老年濕疹患者血清IFN-γ、IL-4、IL-17A相比，泛發(fā)型濕疹患者血清水平明顯升高顯著性(t=2.458，2.139，3.019；P均<0.05)。見(jiàn)表3。

3 討 論

慢性濕疹在老年皮膚病中尤為常見(jiàn)，嚴(yán)重困擾著老年的生活。濕疹的發(fā)病機(jī)制及病因還尚未得到定論，研究表明濕疹的主要機(jī)制為Thl/Th2平衡失調(diào)而引起細(xì)胞因子的分泌功能紊亂[5]。過(guò)去研究發(fā)現(xiàn)正常人體中Th1和Th2處于不斷動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，而濕疹患者血清存在Th1和Th2的分泌功能失衡狀態(tài)。Thl細(xì)胞分泌INF-γ、IL-2及TNF-α，介導(dǎo)遲發(fā)型超敏反應(yīng)，促進(jìn)細(xì)胞免疫；Th2細(xì)胞分泌IL-4、IL-6及IL-10等，促進(jìn)體液免疫。姚春海等[6]研究發(fā)現(xiàn)，INF-γ及IL-4表達(dá)水平較正常人明顯升高，說(shuō)明濕疹存在Thl/Th2細(xì)胞因子失衡。而經(jīng)過(guò)藥物治療后，INF-γ、IL-4的表達(dá)均較治療前明顯降低，改善Thl/Th2失衡狀態(tài)。本文中老年濕疹患者血清IFN-γ、IL-4表達(dá)均高于健康對(duì)照組，老年急性期、泛發(fā)型濕疹患者血清細(xì)胞因子明顯高于慢性期和局限型。楊敏等[7]在對(duì)老年濕疹患者的研究中發(fā)現(xiàn)，Thl、Th2相關(guān)細(xì)胞因子IL2、IL-4及IL-10在濕疹患者血清中都明顯升高，并與濕疹急性期密切相關(guān)。然而楊梅的研究并未發(fā)現(xiàn)泛發(fā)性和局限性老年濕疹血清Th1/2表達(dá)的差異，考慮可能與本課題組研究對(duì)象病程較短有關(guān)。

表3泛發(fā)與局限型老年濕疹患者血清Th細(xì)胞因子水平比較(ng/L)

組別nIFN-γIL-4IL-17A局限型44121.67±15.20221.94±21.3569.39±15.70泛發(fā)型16132.91±16.93235.63±23.4983.41±16.49t值2.4582.1393.019P值0.0170.0370.004

Th17細(xì)胞是CD4+T細(xì)胞的一種亞型，獨(dú)立于Th1/2之外，產(chǎn)生IL-17A和IL-17F，IFN-γ和IL-4 均抑制 Th17細(xì)胞的分化[8]。研究表明IL-17能夠調(diào)控角質(zhì)細(xì)胞固有免疫，特別是促進(jìn)細(xì)胞釋放趨化因子白介素8(Chemokine interleukin 8，CXCL8)、IL-6，與IFN-γ共同誘導(dǎo)細(xì)胞間粘附分子，增強(qiáng)T細(xì)胞的粘附性及角質(zhì)T細(xì)胞的毒性作用。IL-17A導(dǎo)致濕疹的機(jī)制在于擴(kuò)大炎癥反應(yīng)中T細(xì)胞的潛在作用[8]。本實(shí)驗(yàn)研究表明老年濕疹患者血清IL-17A水平顯著高于健康對(duì)照組；而且IL-17水平在急性期、泛發(fā)型患者血清中的表達(dá)明顯高于慢性期、局限型。研究提示IL-17可能參與了濕疹的發(fā)病機(jī)理，并與病情的急慢性期和病變范圍呈相關(guān)性。這與陳宏等[10-11]的研究結(jié)果相一致，他們發(fā)現(xiàn)濕疹患者血清IL-17和白介素-23(Interleukin-23，IL-23)mRNA水平明顯高于健康對(duì)照組，表達(dá)量與濕疹面積及嚴(yán)重度指數(shù)評(píng)分呈正直線相關(guān)。而白芍總苷下調(diào)IL-17、IL-23，調(diào)節(jié)細(xì)胞因子起到治療濕疹的作用。吳浩浪等[12]也證實(shí)濕疹患者IL-17和IL-23水平表達(dá)顯著升高，并且與濕疹疾病的嚴(yán)重程度相關(guān)，隨著程度的增加而上升。

綜上所述，血清IFN-γ、IL-4及IL-17A參與老年濕疹的進(jìn)展與預(yù)后，并且Th細(xì)胞相關(guān)因子表達(dá)的不同可作為反映臨床類型的指標(biāo)。

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SystematicAnalysisofThCellRelatedCytokineLevelsandPathologicalCharacteristicsofElderlyPatientswithEczema

SHI Zhijian

(ThePeople’sHospitalofJiangmen,Jiangmen,Guangdong529000,China)

ObjectiveTo observe the expression of helper T cell 1 (Th1),helper T cell 2 (Th2) and helper T cell 17 (Th17) in serum of elderly patients with eczema,and to explore the correlation between serum cytokine levels and pathological characteristics of eczema.MethodsThe clinical data of 60 elderly patients diagnosed with eczema in our department between June 2013 and September 2015 were collected and 40 cases of healthy persons were selected as control group.The expression levels of serum Th cell related cytokines[interferon-γ (INF-γ),interleukin-4 (IL-4),interleukin-17A (IL-17A)] were detected by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA).The differences of Th cell related cytokines in acute and chronic,or generalized and localized eczema were compared.ResultsThe levels of serum IFN-γ,IL-4 and IL-17A in elderly patients with eczema were significantly higher than those in the healthy control group (t=10.570,10.874,14.611;allP<0.001).The levels of serum IFN-γ,IL-4 and IL-17A in elderly patients with acute eczema were significantly higher than those in patients with chronic eczema (t=3.787,3.815,5.338,allP<0.001);The levels of serum IFN-γ,IL-4 and IL-17A in patients with generalized eczema were significantly higher than those in patients with localized eczema (t=2.458,2.139,3.019;allP<0.05).ConclusionSerum IFN-γ,IL-4 and IL-17A are involved in the progression and prognosis of eczema,and the different expression of Th cytokines can be used as indicators for reflecting clinical types.

Interferon-γ; Interleukin -4; Interleukin -17A; Eczema

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2016.03.026

2015-12- 05；

2016-04-19

R758.23

A

秦旭平)